猪流行性腹泻病毒Nsp7基因真核表达载体的构建及表达

PEDV Nsp7蛋白是猪流行性腹泻病毒的一种非结构蛋白,它在病毒复制过程中表达,并与感染细胞的内质网和细胞膜相关,是病毒基因组翻译的两个大型复制酶的关键辅助因子。为了对PEDV Nsp7蛋白进行更加深入的研究,试验从病变猪小肠中提取总RNA,并通过RT-PCR扩增获取PEDVNsp7基因,最终将其连接到pCMV-Myc载体上。试验结果显示,成功构建了pCMV-Myc-Nsp7的重组质粒,并通过Western Blot技术和免疫荧光技术在真核细胞中验证了其蛋白表达情况,为后续研究PEDV Nsp7的生物学功能奠定了良好的基础。

PEDV Nsp10基因真核表达载体的构建及蛋白的表达

猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)为猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)的病原体。Nsp10是PEDV编码的一种非结构蛋白,在病毒的复制过程中发挥着重要的作用。为研究在病毒侵染宿主细胞时Nsp10蛋白发挥的作用,通过RT-PCR技术扩增Nsp10基因片段,利用同源重组的方法将Nsp10基因连接到pCMV-Myc载体,成功构建了PEDV Nsp10基因的真核表达载体。酶切鉴定及测序结果证实,PEDV Nsp10基因成功克隆到pCMV-Myc载体中,并将重组质粒命名为pCMV-Myc-Nsp10。将重组质粒pCMV-Myc-Nsp10通过脂质体转染至IPEC-J2细胞中,利用Western Blot和间接免疫荧光技术检测pCMV-Myc-Nsp10的表达以及定位情况。结果显示,pCMV-Myc-Nsp10在IPEC-J2细胞中成功表达,并且均匀分布在细胞质和细胞核中,为后续研究PEDV Nsp10蛋白的生物学功奠定了基础。

猪流行性腹泻病毒非结构蛋白Nsp14真核表达载体构建及蛋白表达鉴定

猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)Nsp14蛋白是PEDV的一种非结构蛋白,由于它同时具有核酸外切酶活性和N7-甲基转移酶活性,在病毒的生命周期中发挥重要作用。为了对PEDV Nsp14蛋白进行更加深入的研究,从病变猪小肠中提取总RNA,并通过PCR扩增获取PEDV Nsp14基因,经过双酶切与连接试验,最终将其连接到PRK5-Myc载体上。通过构建PEDV Nsp14真核重组表达载体,并通过Western Blot技术和免疫荧光技术在真核细胞中验证其蛋白表达情况和细胞内定位情况,为后续研究PEDV Nsp14蛋白的功能奠定研究基础。

论《红楼梦》中的贾母形象

在《红楼梦》中,贾母作为封建家庭的统治者,占有重要地位。她不仅是封建家长的代表式人物,代表着尊贵、权威;从另一角度分析,贾母作为贾府中的最高长辈,在不同的场景中也表现出慈爱、宽容、开朗、富有生活情趣等人性闪光点,使得人物形象更加丰满。

库淑兰剪纸艺术传承发展之瓶颈及其解决路径

“库淑兰剪纸”艺术是具有陕西特色的民间剪纸艺术,在中国传统剪纸文化发展中有着重要地位。随着人类现代文明的不断发展和更新,剪纸逐渐淡出我们视野,跟其他传统艺术一样面临着发展的困境。本文针对“库淑兰剪纸”当下的发展问题进行分析并给出相应对策。

新时代老田吴氏重教兴学的家风渊源和时代意蕴

新时代国家和社会高度重视家风建设,尤其重视家庭、家教、家风等建设。注重家风建设不是空穴来风,而是符合历史背景、顺应新时代发展的选择。老田吴氏重教兴学的家风孕育出了无数明贤志士,具有丰富的家风渊源和时代意蕴。新时代继续发扬老田吴氏的优秀家风一方面能确保吴氏家风文化的持续传承,另一方面能够丰富新时代的家风文化内涵,促进家风建设成为融入华夏儿女血液中的文化基因。

吴氏西爽堂刻本《樊川文集》述略

《樊川文集》在长期流传中变化不大,今看到的明崇祯间丹山吴氏刻本《杜樊川集》十七卷,有朱一是、吴玙的评,专门收录杜樊川文,对通行本《樊川文集》有较多的补充。吴氏刻本中有朱一是多处评点话语,是由杜牧之文抒发其独到的议论与见解,足见其对《樊川文集》别有会心。这为研究杜牧诗文,作了一定的补充。