艾司氯胺酮对小鼠体外成骨细胞的影响

目的观察艾司氯胺酮对小鼠体外成骨细胞的影响。方法选用4~6周C57BL雄性小鼠的后肢骨中的骨髓间充质干细胞(BMSCs),定向诱导分化为成骨细胞,采用CCK-8法筛选出对成骨细胞增殖无毒性的艾司氯胺酮浓度区间,后将定向诱导分化来的成骨细胞随机分为2组:空白组和艾司氯胺酮组(Ket组,100μmol/L)。干预24,48,72 h,采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定各组成骨细胞中β-catenin、糖原合成激酶3(GSK-3β)和骨形成蛋白2(BMP2)的表达,采用荧光定量PCR(qPCR)法测定各组成骨细胞中Runt相关转录因子2(Runx2)、成骨细胞特异性转录因子Osterix mRNA的表达情况。结果0~200μmol/L艾司氯胺酮对成骨细胞增殖无明显毒性。与空白组相比,Ket组β-catenin、BMP2以及Runx2和Osterix表达升高(P<0.05),GSK-3β表达降低(P<0.05)。结论艾司氯胺酮可促进小鼠体外成骨细胞增殖和分化,其机制可能与促进β-catenin、BMP2以及Runx2、Osterix表达,降低GSK-3β表达有关。

结扎大鼠冠状动脉对心肌和背根神经节内肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的观察结扎大鼠冠状动脉（冠脉）左前降支不同时间点整体心肌（缺血区和非缺血区心肌）和背根神经节（DRG）内肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的蛋白及mRNA表达变化,探讨TNF-α在心肌缺血诱发机体神经源性反应机制中的作用及机制。方法将健康成年雄性SD大鼠随机分为3组：对照组麻醉后直接取材;假手术组（Sham组）只开胸不结扎冠脉;冠脉结扎组（CAO组）单纯扎闭冠脉左前降支;Sham组和CAO组又分为0.5、1、3和6h4个时间点。采用免疫组化、酶联免疫吸附法（ELISA）及实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术观察各组动物心肌和DRG内TNF-α的蛋白及mRNA表达变化。结果1CAO后各时间点缺血区心肌和非缺血区心肌TNF-α蛋白及TNF-αmRNA表达水平均较对照组和Sham组显著升高（P〈0.05或P〈0.01）,在CAO1h达高峰,但与0.5h时比较差异无统计学意义（P均〉0.05）;且CAO组各时间点缺血区心肌TNF-α蛋白及TNF-αmRNA表达水平均较相应时间点非缺血区显著升高（P均〈0.05）。2CAO后各时间点大鼠DRG中TNF-α蛋白及TNF-αmRNA表达水平较对照组和Sham组均显著升高,在CAO0.5h达高峰（P〈0.05或P〈0.01）。结论急性心肌缺血可能诱发激活了机体神经源性反应机制,TNF-α在其中发挥了作用;神经源性机制可能参与了急性心肌缺血诱发的心肌损伤及其调制的病理学过程。