妊娠高血压疾病的多因素logistic回归分析

目的回归分析妊娠高血压疾病(HDP)的危险因素,为其预防提供证据支持。方法选取2016-01至2017-12在天津市东丽区、河东区、河北区等多家社区建本的孕妇队列,随机抽取具有妊娠结局的3747例,将其中309例患有HDP的患者为观察组,剩余3438例为对照组进行统计分析。对潜在影响因素进行单因素logistic分析,考虑到各因素间可能存在相互作用,进一步采用多因素logistic模型分析。最后,通过单因素分析HDP导致分娩的严重不良结局,以及新生儿出生42 d内的发育情况。结果单因素logistic分析显示,HDP与年龄、初检体重指数,家族高血压史、高血压史,以及妊娠期高危情况,如辅助生殖技术、妊娠期糖尿病、血清游离甲状腺素异常等有关。多因素logistic分析显示,初检BMI(OR=1.172,95%CI:1.138~1.207)、家族高血压史(OR=6.599,95%CI:3.670~11.865)、高血压史(OR=7.415,95%CI:3.431~16.027)及辅助生殖技术(OR=3.406,95%CI:1.767~6.566)作为危险因素,对HDP有影响。通过单因素分析,得到HDP对分娩方式、分娩孕周、产后42 d的血压,新生儿的出生体重、身长及42 d的体重有影响。结论对于初检BMI较大的、有家族高血压史、高血压史、采用辅助生殖技术妊娠的孕妇做好早期预防,减少对分娩方式、分娩孕周、及产后42 d的血压及新生儿发育的影响。

IL-8调节卵巢癌细胞VEGF表达、体外黏附与侵袭特性的机制研究

目的探讨IL-8对卵巢癌细胞VEGF表达水平、体外黏附和侵袭特性的影响及相关分子机制。方法在原工作基础上,利用前期构建的过表达IL-8的人卵巢癌A2780细胞株和抑制表达IL-8的人卵巢癌SKOV3细胞株,分别应用半定量RT-PCR法、Western blot技术、细胞体外黏附实验、Transwell小室体外侵袭实验及明胶酶谱法等观察IL-8对卵巢癌细胞VEGF表达、黏附和侵袭特性的影响,并对其作用机制和可能的信号通路进行研究。结果与对照组相比,过表达IL-8可增强卵巢癌细胞VEGF的基因转录和蛋白表达水平,促进细胞的体外黏附和侵袭能力(P<0.001);抑制IL-8表达,细胞的VEGF表达水平和黏附、侵袭能力均减弱。进一步研究发现,IL-8的促细胞黏附和侵袭活性,与激活PI3K/Akt和Raf/MEK/ERK信号通路、增强MMP-2和MMP-9的活性和表达水平密切相关。结论 IL-8可促进卵巢癌细胞VEGF表达,增强细胞的黏附侵袭能力;IL-8及其相关信号分子有望成为抑制肿瘤转移、延缓病程进展的新靶点。

内源性IL-8诱导卵巢癌细胞对顺铂与紫杉醇产生耐药的机制研究

目的探讨内源性IL-8诱导卵巢癌细胞对顺铂和紫杉醇产生耐药的机制及相关信号转导通路。方法在原有工作基础上,以2种人卵巢癌细胞系A2780(不分泌IL-8,对顺铂、紫杉醇敏感)和SKOV-3(高分泌IL-8,对顺铂、紫杉醇耐药)为研究模型,分别将正义(sense,ss)IL-8基因或反义(antisense,as)IL-8基因稳定转染至A2780细胞或SKOV3细胞,应用MTT法、Caspase-3活性测定、RT-PCR及Western blot技术等观察内源性IL-8是否影响卵巢癌细胞对顺铂和紫杉醇的敏感性,并对其作用的机制和可能的信号传导通路进行研究。结果 1)内源性过表达IL-8可诱导A2780细胞对顺铂和紫杉醇产生耐药,而抑制IL-8表达可恢复SKOV3细胞对顺铂和紫杉醇的敏感性,IL-8诱导的卵巢癌细胞化疗耐药是通过降低Caspase-3活性来实现的;2)内源性过表达IL-8可上调A2780细胞的耐药相关基因MDR1和凋亡抑制基因Bcl-2、Bcl-xL及XIAP的表达,而抑制IL-8表达可使上述基因的表达明显降低;3)Wortmannin(PI3K抑制剂)和PD98059(MEK1/2抑制剂)能分别阻断IL-8诱导下卵巢癌细胞的Akt和ERK活化及化疗耐药作用。结论 IL-8诱导的卵巢癌细胞化疗耐药可能与其上调耐药相关基因MDR1和凋亡抑制基因Bcl-2、Bcl-xL及XIAP的表达以及活化Raf/MEK/ERK和PI3K/Akt信号通路相关,提示调节IL-8表达或其相关信号通路可能是治疗耐药性卵巢癌的一种良好策略。

雌激素受体亚型对乳腺癌MCF-7细胞生长及微环境中Th平衡的影响

目的:研究雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型对人乳腺癌细胞MCF-7的生长及Th1/Th2类细胞因子分泌的影响。方法:采用RNA干扰技术沉默MCF-7细胞中ERα或ERβ的表达,获得ERα/ERβ不同表达状态的MCF-7细胞。应用MTT法、流式细胞术、RT-PCR法分别检测MCF-7细胞的增殖、细胞周期和凋亡抑制基因的表达,ELISA法检测细胞上清中IFN-γ和IL-4的分泌水平。结果:经RNA干扰后MCF-7细胞的ERα或ERβ蛋白表达水平分别下降了(77.7±3.3)%和(68.3±2.1)%。与对照组相比,ERα基因沉默后,MCF-7细胞生长减慢(P<0.05),受阻于G0～G1期,凋亡抑制基因XIAP的表达水平降低为对照组的(43.0±2.0)%,IFN-γ分泌水平增加至对照组的(1.89±0.34)倍;ERβ基因沉默促进MCF-7细胞的生长(P<0.05),S期细胞比例增加,凋亡抑制基因Bcl-2、Bcl-xl、XIAP的表达水平分别升高至对照组的(1.28±0.21)、(1.61±0.32)和(1.65±0.29)倍,IFN-γ分泌水平降低为对照组的(28.0±4.0)%。结论:ER亚型的表达状态可影响MCF-7细胞的生长,并通过调节IFN-γ的自分泌水平诱导微环境发生Th偏移。

哇巴因抑制乳腺癌细胞增殖与雌激素受体亚型介导的信号通路有关

目的在确定哇巴因是否经雌激素受体(estrogen re-ceptor,ER)途径发挥抗乳腺癌细胞增殖作用的基础上,进一步探讨ER亚型在哇巴因介导的增殖抑制中的作用。方法选择兼有两种ER亚型表达的人乳腺癌细胞株MCF-7为研究对象,采用MTT法、RNA干扰技术及蛋白印迹检测技术,观察ER亚型对哇巴因介导的细胞增殖抑制作用的影响。结果在0.1～1 000 nmol.L-1浓度范围内,哇巴因以剂量依赖性方式明显抑制MCF-7细胞的增殖活性,该抑制作用可被ER阻断剂ICI 182,780部分阻断。应用RNA干扰技术沉默ERα或ERβ基因表达,进一步证实哇巴因对MCF-7细胞的增殖抑制作用主要由ERα介导。结论哇巴因可通过ERα信号通路对乳腺癌发挥抗肿瘤效应。NKA结合ER可能是未来开发抗乳癌药物的潜在重要靶点。

免疫学PBL授课模式初探

PBL教学开展日益广泛,但在具体实施中出现了许多问题。通过总结医学免疫学PBL教学模式的经验,提出PBL与LBL取长补短,选准PBL授课内容,根据内容适时调整侧重点,并提出营造讨论氛围的具体做法,以供探索PBL的医学教育改革者参考。

免疫学教学中的“授之以渔”教学体会

医学免疫学的理论性强、概念抽象、发展迅速，指导学生建立起一套以理解为基础、进而分析问题并解决问题的学习方法，对其授之以渔，是提高免疫学教学效果的根本途径。

人IL-8正义和反义真核表达载体的构建与表达

目的:构建人IL-8正义和反义真核表达载体。方法:RT-PCR扩增正义和反义IL-8基因片段后,将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+),通过菌落PCR、双酶切及测序进行鉴定后,采用脂质体法分别瞬时转染至人卵巢癌细胞系A2780和SKOV3细胞中,并用RT-PCR和ELISA法检测细胞转染后IL-8的表达水平。结果:经验证,重组人IL-8正义/反义真核表达载体构建正确。pcDNA3.1(+)-ssIL-8转染A2780细胞后,其IL-8 mRNA及蛋白表达水平均显著增加;而pcDNA3.1(+)-asIL-8转染SKOV3细胞后,其IL-8分泌水平降低。结论:成功构建了人IL-8正义/反义真核表达质粒pcDNA3.1(+)-ssIL-8/pcDNA3.1(+)-asIL-8,为后续研究IL-8在卵巢癌及其他肿瘤中的作用打下基础。

妊娠水平E2对免疫小鼠脾细胞活化的调节

目的研究妊娠水平E2对免疫小鼠脾细胞活化的调节作用,探讨其在细胞接触依赖性调控水平和细胞因子依赖性调控水平上,对T细胞活化与分化的调节机制。方法皮下注射BSA和弗氏完全佐剂免疫Balb/c小鼠。间接ELISA法用于检测小鼠血清BSA特异性IgG抗体;MTT试验用于检测小鼠脾细胞增生水平;RT-PCR法用于检测CTLA-4、B7-1、B7-2、IFN-γ、IL-2、IL-12p40、IL-4、IL-10的基因转录水平;双抗体夹心ELISA法用于检测脾细胞培养上清中IFN-γ、IL-4的蛋白表达水平。结果未观察到妊娠水平E2对BSA特异性IgG的生成有明显的调节作用。妊娠水平E2抑制免疫小鼠脾细胞增生;促进脾细胞CTLA-4基因转录水平;不影响B7-1、B7-2基因转录。妊娠水平E2抑制脾细胞IL-2的基因转录;促进IFN-γ、IL-12p40等Th1类细胞因子的基因转录水平;促进IL-4、IL-10等Th2类细胞因子的基因转录水平;妊娠水平E2促进脾细胞IFN-γ、IL-4的蛋白表达水平。结论妊娠水平E2促进CTLA-4/B7-1途径的抑制性协同信号,抑制免疫小鼠T细胞的增生水平,同时促进Th1、Th2细胞分化,但Th1/Th2分化失衡,偏向于Th2细胞。

关于免疫学专科教学的几点体会

分析了当前在以本科教学为主的高等医学院校中，专科教学存在的问题，探讨了搞好免疫学专科数学的几点做法，并对现代化专科教学进行了展望。

救援医学专业免疫学实验教学改革的探讨

救援医学是整合急救医学、灾难医学和管理学等多学科为一体的新兴学科[1],是伴随近年来自然灾难、人为灾害等突发事件频发应运而生的急救科学.救援医学对专业人才具有独特的要求,既要有过硬的政治素质、军事素质、心理素质,又要有不畏艰难的大无畏的牺牲精神;既要有医学专业的基础医学和临床医学的基本知识,又要有处理危、急、重病人的急救技能.此外,救援人员所面对的大多是人员繁杂、场面混乱的灾害场景,

卵巢癌细胞IL-6、IL-8分泌与其化疗敏感性及耐药相关基因和凋亡抑制基因表达关系的初步探讨

目的分析比较4种常见的人上皮性卵巢癌细胞系IL-6、IL-8分泌与其化疗敏感性及部分耐药相关基因和凋亡抑制基因表达的关系,为今后研究IL-6、IL-8诱导卵巢癌细胞对化疗药物产生耐药的机制奠定基础。方法IL-6、IL-8及其受体的表达采用RT-PCR、ELISA及免疫印迹技术进行检测,卵巢癌细胞对顺铂和紫杉醇的敏感性采用MTT试验进行分析,耐药相关基因和凋亡抑制基因的表达则采用RT-PCR进行测定。结果1)4种卵巢癌细胞除A2780细胞外均组成性分泌IL-6和IL-8,二者转录水平与其蛋白水平基本一致。2)4种卵巢癌细胞均表达IL-6受体和IL-8受体。3)4种卵巢癌细胞对顺铂和紫杉醇的敏感性不同,其中A2780细胞最敏感,ES-2细胞次之,CAOV-3和SKOV-3细胞则有不同程度的耐药性。4)部分耐药相关基因和凋亡抑制基因在A2780和ES-2细胞中的表达水平均较低,而在CAOV-3和SKOV-3细胞中的表达水平均较高。结论卵巢癌细胞IL-6、IL-8的自分泌水平(尤其是IL-6的水平)与其对顺铂和紫杉醇的敏感性基本呈负相关趋势,与其部分耐药相关基因和凋亡抑制基因的表达水平相一致。

白藜芦醇调节STAT3抗急性髓性白血病作用的研究

目的初步探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)通过何种途径发挥抗急性髓性白血病作用。方法以人急性髓性白血病细胞Kasumi-1为研究对象,不同浓度Res作用不同时间,甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期分布的变化,计算细胞凋亡率,进而分别从基因和蛋白水平检测Bcl-2、Bax表达,应用免疫印迹及荧光素酶报告基因分析等方法检测Res干预前后信号转导子和转录激活子(signal transducersand activators of transcription,STAT)3的变化。利用白血病小鼠模型以Western blot与免疫组化等方法在整体水平研究Res对动物存活状态及STAT3活性表达的影响。结果Res明显抑制白血病细胞Kasumi-1生长增殖、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡、下调Bcl-2/Bax比值以及STAT3的活性水平;此外,Res还能剂量依赖的促进荷瘤小鼠存活、减弱小鼠p-STAT3表达。结论提取自传统中药材的Res是一种高效低毒的新型抗肿瘤药物,通过多种机制发挥抗白血病效应,特别是对STAT3信号途径的调控可能是其重要的作用靶点。

卵巢癌细胞IL-6、IL-8分泌与他莫西芬敏感性及MAPK、Akt活性和ER特异性位点磷酸化水平的关系

目的:分析比较4种常见的人上皮性卵巢癌细胞系(A2780、CAOV-3、SKOV-3和ES-2)IL-6、IL-8分泌与他莫西芬(TAM)敏感性及MAPK、Akt活性和雌激素受体(ER)特异性位点磷酸化水平的关系,探讨IL-6、IL-8诱导卵巢癌细胞对内分泌治疗产生耐药的机制。方法:RT-PCR及ELISA法检测IL-6、IL-8的表达,MTT法分析卵巢癌细胞对TAM的敏感性,免疫印迹法测定MAPK、Akt活性及ER特异性位点的磷酸化水平。结果:(1)4种卵巢癌细胞除A2780细胞外均组成性分泌IL-6和IL-8,二者转录水平与其蛋白水平基本一致;(2)4种卵巢癌细胞对TAM的敏感性不同,其中A2780细胞最敏感,CAOV-3、SKOV-3和ES-2细胞则有不同程度的耐药性,其耐药倍数分别为4.99、3.76和2.66;(3)4种卵巢癌细胞的MAPK、Akt活性存在差异,CAOV-3细胞的二者活性最强,SKOV-3细胞的MAPK活性弱于ES-2细胞,而其Akt活性则强于ES-2细胞,A2780细胞未检测到二者有活性;(4)ER的第167位丝氨酸(Ser167)在四种卵巢癌细胞中均存在不同程度的磷酸化,ER的第118位丝氨酸(Ser118)除A2780细胞外亦存在不同程度的磷酸化。结论:卵巢癌细胞IL-6、IL-8的自分泌水平与其对TAM的敏感性呈负相关,与其MAPK、Akt活性和ER特异性位点(Ser167、Ser118)的磷酸化水平相一致。

雌激素受体β在乳腺癌他莫昔芬内分泌治疗耐药中的作用

目的:探讨雌激素受体β(estrogen receptorβ,ERβ)的表达与乳腺癌他莫昔芬(tamoxifen,TAM)内分泌治疗耐药的相关性及其机制。方法:以前期构建的ERα/ERβ不同表达的人乳腺癌MCF-7细胞株[M/HK(阴性对照)、M/siα(ERαlow/ERβhigh)、M/siβ(ERαhigh/ERβlow)细胞]为研究对象,MTT法评估乳腺癌细胞对TAM的耐药性;用半定量RT-PCR法检测细胞中耐药相关基因MDR1、TOPOⅡ、LRP和GST-π的mRNA表达水平,用Western blotting法检测细胞中耐药相关信号通路MAPK、PI3K/Akt的p-ERK、p-Akt蛋白表达水平。结果:与对照组MCF-7细胞相比,MCF-7细胞中的ERβ高表达可促进高浓度TAM(1、5、10μmol/L)对MCF-7细胞增殖的抑制作用[(45.788±1.641)%vs(24.288±1.170)%,(57.899±1.583)%vs(31.499±1.978)%,(59.853±1.648)%vs(38.039±1.482)%;均P<0.05)],该抑制作用与TAM浓度呈剂量依赖性。ERβ高表达可显著抑制MCF-7细胞耐药基因MDR1、TOPOⅡ、LRP的mRNA表达水平(0.431±0.032 vs 0.932±0.083,0.234±0.008 vs 0.391±0.002,0.47±0.028 vs 0.586±0.036;均P<0.05);可显著下调Akt和ERK蛋白的磷酸化水平(0.224±0.006 vs 0.437±0.007,0.367±0.015 vs 0.756±0.039;均P<0.05)。结论:ERβ表达水平可影响乳腺癌细胞MCF-7对TAM的耐药性,该作用机制可能与耐药基因的表达及PI3K/AKT、MAPK信号通路激活有关。

IL-17在肿瘤血管生成和转移中的作用

Th17细胞是近年来发现的、不同于经典的Th1和Th2细胞的第3类辅助性T(Th)细胞亚群。Th17细胞能特异性分泌IL-17,在肿瘤发生和转移中发挥重要作用。文章主要就Th17细胞的来源与分化调节、IL-17与肿瘤微环境、IL-17与肿瘤的血管生成及转移的关系进行综述,力图为肿瘤的诊断和治疗提供一个新的方向。

旋毛虫成虫抗原和肌幼虫抗原保护性免疫的比较研究

目的:比较旋毛虫成虫抗原和肌幼虫抗原诱导小鼠产生保护性免疫效果的异同。方法:制备旋毛虫成虫抗原和肌幼虫抗原,分组免疫小鼠,并于末次免疫后10d用旋毛虫感染性幼虫对各组小鼠实施攻击感染,检测攻击感染后各组小鼠肠道成虫和肌肉幼虫数并计算减虫率,同时采用ELISA法检测各组小鼠血清IgG抗体水平。结果:成虫抗原免疫组小鼠和肌幼虫抗原免疫组小鼠检获的肠道成虫数和肌幼虫数均显著少于对照组(P<0.05),其中以成虫抗原免疫组小鼠减虫率最高(P<0.01)。成虫抗原免疫组和肌幼虫抗原免疫组小鼠于实施旋毛虫感染性幼虫进行攻击感染的当日所检测的血清IgG抗体水平与其免疫前相比均升高(P<0.01,P<0.05),与对照组相比亦升高(P<0.01,P<0.05),其中也以成虫抗原免疫组小鼠血清IgG抗体升高最为显著(P<0.01)。结论:旋毛虫成虫抗原和肌幼虫抗原均能激发小鼠产生保护性免疫,其中成虫抗原免疫组小鼠显示出更好的抗感染保护性。

RNA干扰INK4位点反义非编码RNA抑制人肺癌细胞系生长的分子机制

目的探讨INK4位点反义非编码RNA(ANRIL)下调对CDKN2B-CDKN2A-ARF基因簇的调控及对人肺癌细胞生长的影响。方法通过RNA干扰下调人肺鳞状细胞癌细胞系H520中ANRIL的表达,实时荧光定量聚合酶链反应检测RNA干扰前后细胞中ANRIL mRNA的表达变化,绘制细胞生长曲线;实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测RNA干扰前后细胞中细胞同期蛋白依赖性激酶抑制剂2B(CDKN2B)、CDKN2A、ARF mRNA和蛋白的表达变化。结果 RNA干扰可显著下调ANRIL mRNA的表达(P<0.05),ANRIL下调能抑制人肺鳞状细胞癌细胞系H520的生长(P<0.05),引起CDKN2B、CDKN2A、ARF mRNA和蛋白的表达升高(P<0.05)。结论 RNA干扰AN-RIL能抑制人肺鳞状细胞癌细胞的生长,ANRIL可能通过调控CDKN2B-CDKN2A-ARF基因簇起作用。

对武警某部官兵常见寄生虫病预防知识行为的调查

目的 :了解武警某部官兵对常见寄生虫病预防有关的知识、态度、信念及行为(knowledge、attitude、belief、practice ,简称KABP)的情况 ,为开展常见寄生虫病的健康教育提供依据。方法 :参照有关“KABP”调查标准评分 ,采取无记名问卷方法对华北武警某部 10 80基层官兵进行调查。结果 :知识平均得分 37.0 0 (满分 10 0分 ) ;态度与信念平均得分 64.93(满分 90分 ) ;行为平均得分 64.0 1(满分 10 0分 )。知识知晓率 16项有 14项在 60 %以下。结论 :被调查某部官兵关于常见寄生虫病预防KABP水平较低 ,很有必要进行健康教育 ,以提高相关知识水平 ,纠正不正确的态度与信念 。