载超顺磁性氧化铁和DiI荧光高分子微球巨噬细胞MR成像

目的制备载超顺磁氧化铁(SPIO)纳米粒和DiI荧光高分子微球(DiI-SPIO-PLGA),探讨其作为MRI对比剂体外巨噬细胞成像的效果和作为荧光示踪剂体外示踪巨噬细胞的可行性。方法采用双乳化法制备DiI-SPIO-PLGA微球,并检测其理化性质。培养小鼠RAW264.7巨噬细胞,与DiI-SPIO-PLGA微球共孵育12 h后行普鲁士蓝染色和荧光显微镜观察,将吞噬了微球的细胞和空白细胞分别重悬于0.5 ml 1%琼脂糖Eppendof管中,行MR扫描。结果所得样品为外壳装载SPIO颗粒和DiI荧光的微球,粒径(868.00±68.73)nm。普鲁士蓝染色结果显示,几乎所有细胞内都有蓝染颗粒分布,部分区域聚集成堆;倒置荧光显微镜下可见细胞内有大量红色微球。MRI显示吞噬了DiI-SPIO-PLGA微球的实验组管内信号显著降低,管内信号值/背景信号值明显低于对照组(P<0.05)。结论 DiI-SPIO-PLGA微球能有效加强MR成像效果,荧光信号强烈,可同时作为MRI阴性对比剂和荧光示踪剂。

载吲哚菁绿超声微泡造影剂活体近红外荧光显像兔淋巴结

目的制备载吲哚菁绿的聚乳酸羟基乙酸(ICG-PLGA)超声微泡造影剂并检测其特性,观察以之进行活体近红外荧光显像兔淋巴结的效果。方法用双乳化法制备ICG-PLGA超声微泡造影剂,行光镜、扫描电镜、粒径检测检查,观察其形态及大小;用分光光度法绘制吲哚菁绿的标准曲线,计算造影剂中吲哚菁绿的载药量和包封率。对3只正常大白兔经足垫注射该造影剂,观察活体近红外荧光显像兔腘窝淋巴结的效果。结果 ICG-PLGA超声微泡造影剂为淡绿色乳液,光镜和电镜下形态规则,表面光滑,大小均匀;活体近红外荧光成像能清晰显示兔腘窝淋巴结。结论 ICG-PLGA超声微泡造影剂具备荧光成像的特征,具有高敏感性,可作为荧光成像的示踪剂。

近红外荧光/超声双模式纳米级造影剂显像淋巴结的实验研究

目的制备近红外荧光/超声双模式纳米级造影剂(ICG-PLGA),观察其活体近红外荧光显像小鼠腋窝淋巴结及超声显像兔腘窝淋巴结的效果。方法采用双乳化法制备ICG-PLGA,检测其基本特性,并比较其与吲哚菁绿(ICG)溶液不同时间点(即刻、2 h、8 h、24 h)的荧光稳定性。正常小鼠前爪垫分别注射ICG-PLGA溶液(实验组)和ICG溶液(对照组),观察比较两组活体近红外荧光显像小鼠腋窝淋巴结的效果;正常大白兔经一侧足垫注射ICG-PLGA,并与注射ICG溶液侧比较,观察超声显像兔腘窝淋巴结的效果。结果成功制备出ICG-PLGA,其平均粒径为(294.02±64.24)nm,载药量0.1%,包封率40.0%;近红外荧光显像结果显示不同时间点ICG-PLGA溶液的稳定性均高于ICG溶液。两组小鼠注射前的荧光强度与同组注射后1 min、10 min及30 min比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);活体近红外荧光显像均能清晰显示两组小鼠腋窝淋巴结。注射ICG-PLGA溶液侧兔腘窝淋巴结超声显像效果较注射ICG溶液侧显著增强。结论 ICG-PLGA对小鼠淋巴结的荧光显像效果好,同时可增强兔淋巴结的超声显像,有望成为一种良好的淋巴结示踪剂。

裸鼠移植瘤相变型液态氟碳纳米粒超声显像实验研究

目的制备一种载超顺磁性氧化铁纳米粒(Fe3O4)包裹全氟正戊烷(PFP)的相变型液态氟碳超声造影剂PFP-MPLGA纳米粒,观察其在裸鼠移植瘤内发生相变及增强超声显像的效果,探讨其对肿瘤组织的作用。方法用单乳化法制备PFP-MPLGA纳米粒,检测其一般特性;对裸鼠移植瘤局部注射纳米粒,用近红外线照射肿瘤部位,用超声诊断仪观察纳米粒相变后增强超声显像的效果。结果成功制备出PFP-MPLGA纳米粒;裸鼠瘤内局部注射纳米粒后,近红外线照射可致其相变,显著增强超声显像;肿瘤组织HE染色观察到肿瘤组织内有大量空泡产生。结论 PFP-MPLGA纳米粒在近红外线照射下能在移植瘤内发生相变增强超声显像,且能起到消融肿瘤组织的作用。

载超顺磁性氧化铁高分子微球对兔肝癌MR成像效果的影响

目的观察自制载超顺磁性氧化铁(SPIO)高分子微球(s-PLGA)对兔肝癌MR成像效果的影响。方法双乳化法制备载SPIO的高分子微球。建立兔VX2肝癌模型12只,于肿瘤种植后21天将随机分为3组,分别经耳缘静脉注入s-PLGA(s-PLGA组)、生理盐水(生理盐水组)以及PLGA 1ml/kg体质量(PLGA组)。注射前、后行MR平扫及增强扫描,分别测量肝实质和肿瘤的信号强度,计算肿瘤/肝实质信号强度比。扫描结束后处死动物,取肝癌标本行HE及普鲁士蓝染色,于显微镜下观察。结果制备的s-PLGA呈规则球形,直径约800nm。MR成像显示,注射s-PLGA后,肝实质信号强度显著下降,肿瘤信号无明显变化,肿瘤/肝实质信号强度比相对高,明显高于生理盐水及PLGA组(P<0.05)。普鲁士蓝染色显示,s-PLGA组兔肝实质内有较多蓝染颗粒分布。结论自制s-PLGA能有效增强兔肝脏肿瘤与正常组织间的信号强度对比,对诊断肝癌可能具有一定应用价值。

高频超声生物显微镜动态观测兔耳增生性瘢痕形成

目的应用高频超声显微镜(HFB)动态观测兔耳增生性瘢痕(HS)的形态学变化过程。方法应用Panoviewβ1500HFB和50MHz高频探头,在兔耳HS模型形成过程中的不同时间点(术后第1、3、5、7、11、16、20、28、36、60、90天)进行观察,同时进行大体形态、病理对比观察。结果兔耳腹侧创面可产生与人类HS类似的过度增生过程。利用HFB可清楚、动态观测HS的形成过程,且超声对瘢痕的测量值与病理切片测量值高度相关(r=0.996,P<0.01)。结论 HFB不仅能动态观测兔耳HS的全貌,还可观察其内部细微结构并进行定量分析,可为研究HS提供一种有效的观测手段。

靶向VEGFR-3载阿霉素脂质微泡超声造影剂体外显影及寻靶能力的实验研究

目的:制备一种靶向淋巴管内皮细胞载阿霉素脂质微泡超声造影剂,并考察其体外显影及寻靶能力。方法:制备生物素化抗VEGFR-3单克隆抗体,检测其生物素化程度;用机械振荡法,及生物素-亲和素桥连方式构建靶向VEGFR-3载阿霉素的脂质超声微泡。检测其一般特性;行体外超声,观察其显影效果;并在荧光下观察靶向载药微泡在体外与细胞的结合能力,与载药非靶向微泡做比较。结果:每个单抗分子平均可与9个生物素分子结合,所制备的载药靶向脂质微泡超声造影剂分散度佳,其平均粒径为1.66μm;体外超声显影,载药靶向脂质微泡呈高回声,回声强度随浓度及机械指数减小而降低;体外寻靶试验显示,该靶向载药脂质微泡较多并牢固的聚集在淋巴管内皮细胞表面。结论:成功制备的靶向VEGFR-3载阿霉素脂质微泡超声造影剂,有较高的包封率及载药率,其在体外有增强超声显影效果,并对淋巴管内皮细胞亲和力有较强的特异性。

包载经PEG修饰的重组腺病毒PLGA超声造影剂的制备及特性

目的制备包载经聚乙二醇(PEG)修饰的重组腺病毒Ad-EGFP/HIF-1α高分子超声造影剂(PLGA),以改善腺病毒载体(Adv)在体内的安全性,提高Adv基因在细胞的转染效率。方法使用活化的甲氧基PEG对重组Adv衣壳蛋白质进行修饰得到PEG化Adv(PEG-Adv),用双乳化法制备载PEG-Adv高分子超声造影剂(PLGA),观测其粒径、包封率、释放规律及释放病毒的活性,并检测其在巨噬细胞中的免疫反应程度。结果 PLGA分布均匀,平均粒径为6.23μm;包封率为17.23%;PEG-Adv和单纯Adv从PLGA释放规律相似,但从PLGA释放出来的PEG-Adv的转染效率比从PLGA释放出来的单纯Adv高;包载PEG-Adv的PLGA产生的免疫反应强度也较低。结论用PLGA微球包载PEG化的重组腺病毒Ad-EGFP/HIF-1α,可改善Adv在体内安全性差的缺点,释放出来的病毒稳定性好,转染效率较高,作为心血管疾病的基因治疗载体具有较好的研究前景。

甲状腺木乃伊结节的常规超声、声触诊组织量化成像及超声造影表现

目的探讨常规超声、声触诊组织量化成像(VTIQ)及超声造影(CEUS)在鉴别甲状腺木乃伊结节中的临床价值。方法选取23例甲状腺木乃伊良性结节患者(木乃伊结节组)和17例甲状腺乳头状癌患者(PTCs组),应用常规超声、VTIQ及CEUS获取结节的大小、形态、边界、回声、钙化、声影、黑白双层晕环征、血流、剪切波速度(SWV)及CEUS各参数,并进行比较分析,绘制受试者工作特征(ROC)曲线获得SWV的截断值,计算曲线下面积。采用Logistic回归分析获得木乃伊结节的独立影响因素。结果木乃伊结节组与PTCs组血流信号、SWV值、增强模式、峰值强度比<1、曲线下面积比<1比较差异均有统计学意义(均P<0.05),其余特征比较差异均无统计学意义。ROC曲线分析显示以SWV值3.69 m/s为截断值,其诊断甲状腺木乃伊结节的敏感性82.4%,特异性52.2%,曲线下面积0.673。Logistic回归分析显示黑白双层晕环征和峰值强度比<1是甲状腺木乃伊结节的独立影响因素(OR=27.589、40.877,P=0.012、0.007)。结论熟悉和掌握木乃伊结节的超声特征,并结合既往超声检查的结果,有助于鉴别甲状腺木乃伊结节。常规超声、VTIQ及CEUS对甲状腺木乃伊结节的鉴别诊断均具有重要价值。

纳米材料改善肿瘤缺氧增强声动力疗效的研究进展

声动力疗法(SDT)是一种由光动力学疗法(PDT)发展而来的新兴、无创的治疗方法,由于具有更深的辐射距离且无光毒性特点逐渐替代传统的PDT。氧气是SDT发挥抗肿瘤过程的重要因素,但是肿瘤长期处于缺氧微环境中,极大限制SDT的疗效。纳米材料可灵活应对肿瘤微环境这一缺氧特点,提供有效的供氧策略增强SDT抗肿瘤效应。当前对于纳米材料改善缺氧来增强SDT抗肿瘤疗效方面的综述较少,本文就SDT的作用机制,以及纳米材料改善肿瘤缺氧从而增强SDT的研究进展进行综述。

乡村振兴战略背景下甘肃省深度贫困地区新型职业农民培育路径研究

乡村振兴的主体是农民,因此新型职业农民的培育是乡村振兴战略实施的重要举措。文章在调查研究的基础上,认为甘肃省深度贫困地区新型职业农民培育的现状为培训类型不均衡,培训渠道及获取信息方式单一,培训不符合当地农民实际需求,培训效果一般且缺乏后续反馈;新型职业农民培育存在政府管理与培育主体间协调机制不合理,培育机制不健全,培育方式方法不完善,培育考核方式不符合当地现实等困境,为此提出了甘肃省深度贫困地区新型职业农民培育的路径,主要是加强政府对基层的管理及协调各培训主体单位合理参与培育,建立健全完善的培育机制,培育方式方法因地制宜多样化,坚持全面考核,因地制宜地优化考核标准。

载超顺磁性氧化铁和阿霉素多功能高分子微泡的制备和体外显影实验研究

目的制备一种载超顺磁性氧化铁和化疗药物阿霉素的多功能高分子微泡（MPMBs），探讨其体外超声和磁共振显像效果。方法采用双乳化法和冷冻干燥法制备MPMBs和普通高分子微泡（PMBs），检测前者的一般性质及其包封率和载药量，观察其体外释药特性以及超声和磁共振的显像效果。结果MPMBs形态规则，粒径分布较均匀，包封率为（60．20±2．69）％，载药量为（6．02±0．27）％；体外释药实验证明超声能促进MPMBs中阿霉素的释放；体外超声显影实验显示MPMBs较PMBs显影效果好，体外磁共振显影实验证实MPMBs具备增强磁共振显像的功能。结论成功制备出的MPMBs是一种具备治疗功能以及超声、磁共振双模式显影效果的多功能造影剂。

肿瘤超声分子显像研究进展

掌握肿瘤细胞发生、发展与凋亡的在体活动规律，十分有利于对肿瘤的早期诊治和疗效评估。超声分子成像能够实现在分子水平对肿瘤细胞进行无创、动态、实时、定量观察，并可结合其它分子成像技术，对不同影像信息进行必要的融合，弥补各自的不足。提供既具备高质量的解剖结构定位图像，又具备良好分子水平显像功能的复合图像，为肿瘤的分子影像研究带来革命性的飞跃。本文就超声分子成像技术及其在肿瘤分子显像方面的应用研究作一综述。

载苏丹黑高分子超声造影剂增强兔淋巴结显影的实验研究

目的制备一种载染料苏丹黑的聚乳酸羟基乙酸高分子超声造影剂（SB-PLGA），研究其增强兔肿瘤淋巴结显像的效果及作为前哨淋巴结（SLN）活检指示剂的可行性和价值。方法采用双乳化法和冷冻干燥法制备载苏丹黑的高分子超声造影剂。建立兔大腿皮下VX2肿瘤淋巴结模型8只，经足垫皮下注射造影剂，超声造影显像胭窝肿瘤前哨淋巴结及第二站腹股沟淋巴结，观察其造影增强情况。分别于30min后行胴窝淋巴结清扫切除蓝染的淋巴结，观察第一站胭窝淋巴结及第二站腹股沟淋巴结的染色情况，并行冰冻切片HE染色。结果SB-PLGA超声造影剂形态规则，粒径分布均匀；超声造影可明显增强肿瘤淋巴结显像，而第二站淋巴结显像不明显；胭窝淋巴结清扫术中可见淋巴结染色效果好，30min后，冰冻切片HE染色可见淋巴结内造影剂存在于淋巴窦内，并有大量进入巨噬细胞；行腹股沟淋巴结清扫，均未见第二站淋巴结蓝染。结论SB-PLGA超声造影剂是一种良好的肿瘤淋巴结显影剂和指示剂。淋巴结内巨噬细胞吞噬造影剂后导致造影剂在淋巴结内滞留和聚集可能与其增强淋巴结显影的机制有关。

儿童呼吸道感染血清微量元素水平变化及意义

目的：研究儿童呼吸道感染血清微量元素水平的变化。方法：选取2014年6月~2014年12月在该院诊治的呼吸道感染患儿120例为感染组,同时选取该院同年龄段健康体检小儿80名为对照组,取两组静脉血进行微量元素检测和分析。结果：感染组血清中锌的水平低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.001）,感染组血清铁水平低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）,镁和铜的水平两组间差异无统计学意义（P〉0.05）。锌和铁水平呈正相关性r=0.34（P〈0.05）,锌和铜水平呈负相关差异有统计学意义（r=-0.31,P〈0.05）,锌和镁水平无相关性。结论：呼吸道感染患儿血清锌及铁水平呈一致性降低,也可能是感染防治的重要环节之一,提示感染期间应补充锌,也应同时补充铁剂,防治儿童呼吸道感染。

多功能超声造影剂体外超声-磁共振双模态显像及增效高强度聚焦超声的实验研究

【摘要】目的制备一种新型的多功能超声造影剂，体外观察其超声、磁共振（MR）成像效果及增强高强度聚焦超声（high—intensity focused ultrasound，HIFU）消融效果。方法采用双乳化法合成载超顺磁性氧化铁（superparamagnetic iron oxide，SPIO）纳米颗粒的高分子微球（s—PLGA），检测其一般性质。制备体外成像模型，应用超声诊断仪及磁共振扫描仪对不同浓度s—PLGA分别行超声及MR成像。另取新鲜离体牛肝，局部注射s—PLGA后，给予不同HIFU辐照参数，通过计算辐照区凝固性坏死体积评价s—PLGA增强HIFU消融效果。结果制备的s—PLGA呈球形，平均直径为（885．6±133．2）nm。体外超声显像，s—PLGA呈高回声，回声强度随浓度及机械指数减小而降低；磁共振T2WI呈负增强显像。注射s—PLGA后行HIFU辐照，辐照区凝固性坏死体积明显增大（P〈O．05）。结论自制的多功能超声造影剂一载超顺磁性氧化铁高分子微球具备超声、MR双模态复合成像与增效HIFU的功能。

携紫杉醇和Herceptin高分子造影剂联合超声体外寻靶及显影效果研究

目的探讨携紫杉醇（Pac）和注射用曲妥珠单克隆抗体（Herceptin）高分子造影剂（Pac．PLGA—HER）联合超声体外寻靶能力及显影效果。方法通过双乳化法和碳二亚胺法制备载Pac靶向高分子造影剂。将MCF-7细胞种植于12个培养皿中，培养24h，分为4组，每组3个：非靶向造影剂组（Pac—PLGA组）、靶向造影剂组（Pac—PLGA—HER组）、靶向造影剂＋超声组（Pac—PLGA—HER＋超声组）和抗体封闭组。在激光共聚焦显微镜下对比观察高分子造影剂与细胞的结合能力。观察体外显影效果，并用DFY型定量仪进行定量，采用独立样本t检验进行统计学分析。结果靶向载Pac高分子造影剂平均粒径为（596±12）nm，体外寻靶能力实验显示靶向载Pac高分子造影剂可与MCF-7细胞大量结合。体外显影实验示靶向与非靶向载Pac高分子造影剂平均声强分别为（134．50±10．19）和（135．11±11．49）dB，平均灰阶分别为147．83±11．12和148．50±12．63，两者比较差异均无统计学意义（t均为一0．097，P均〉0．05）。结论携Pac和Herceptin的高分子造影剂对高表达HER2的人乳腺癌MCF-7有较强的结合能力，在体外显影实验中有较好的显影效果。

人膜联蛋白A3的原核表达及纯化

目的原核表达人膜联蛋白(annexin,ANX)A3(ANX A3),并进行纯化。方法提取人胎盘样品总RNA,反转录建立c DNA文库,用KOD-Plus高保真DNA聚合酶扩增anx A3基因编码区全长,连接至克隆载体p EASY-Blunt上,测序鉴定。用primix extaq酶重新扩增anx A3基因,与表达载体p EASY-E1连接,构建重组表达质粒p EASY-anx A3,转化E.coli Transetta DE3,IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经6×His纯化介质及Bio-Rad Bio Logic Duo Flow Chromatography Systems纯化后,经SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果重组表达质粒经菌落PCR鉴定,阳性克隆可扩增出972 bp的目的片段,与NCBI中Gen Bank上报道的anx A3序列完全一致。纯化的重组蛋白相对分子质量约为36 000,可与鼠Anti 6×His-Tag单克隆抗体特异性结合,浓度为400μg/ml。结论成功构建了重组原核表达质粒p EASY-anx A3,并在E.coli Transetta DE3中表达了重组蛋白,为进一步研究ANX A3在哮喘病的起因和形成中的作用及机制奠定了基础。

新型冠状病毒防控期间超声医护人员防护指导意见

当前新型冠状病毒导致的疫情防控形势十分严峻。2020年2月7日,国家卫生健康委将新型冠状病毒感染的肺炎暂命名为“新型冠状病毒肺炎”(简称“新冠肺炎”),英文名称为“Novel Coronavirus Pneumonia”(简称“NCP”);2020年2月11日,世界卫生组织将新型冠状病毒引发的疾病命名为“COVID-19”(Corona Virus Disease 2019);随后,国际病毒分类委员会将新型冠状病毒命名为“SARS-CoV-2”。

乡村振兴战略下农民思想政治教育困境及对策

甘肃相对贫困地区农民思想教育、政治教育、道德教育、法制教育、心理健康教育均呈现重视不够、教育状况不佳等情况,面临着农民普遍思想观念滞后、当前农村客观环境不佳、农民思想政治教育主体的作用发挥不充分、思想政治教育内容“不接地气”、教育队伍素质良莠不齐、教育方式方法未考虑实际状况、教育载体落后及教育机制不完善等困境。鉴于此,提出以“产业兴旺”为目标,为农民思想政治教育打好经济基础;促进“乡风文明”为农民思想政治教育提供良好的环境;坚持“治理有效”,强化基层党组织在思想政治教育工作中的积极主导作用;创新教育方法,为农民思想政治教育提供人才支撑;健全农村基层服务体系,为农民思想政治教育工作保驾护航等提高农民思想政治教育水平的对策。