糖尿病大鼠深Ⅱ度烫伤创面成纤维细胞生物学行为的改变

目的研究糖尿病深Ⅱ度烫伤对真皮成纤维细胞(FB)生物学行为的影响。方法以链脲菌素(STZ)诱导糖尿病的深Ⅱ度10%TBSA烫伤大鼠模型,观察创面愈合情况。流式细胞术检测真皮组织中FB细胞周期;TUNEL法检测FB凋亡;伤后0、3、7、21d检测皮肤组织的羟脯氨酸含量。结果糖尿病大鼠深二度烫伤后愈合延迟,糖尿病组烫伤后进入S期的成纤维细胞数量明显低于正常组(P<0.01,P<0.05),创面凋亡细胞数量高于正常组(P<0.01,P<0.05);烫伤前和烫伤后糖尿病组皮肤组织单位面积羟脯氨酸含量均低于正常大鼠(P<0.01,P<0.05)。结论在糖尿病病理状态下,皮肤损伤后主要的修复细胞FB增殖异常,凋亡增多,胶原含量减少,可能是创面修复延迟的原因之一。

糖基化细胞外基质对成纤维细胞生物学行为的影响

目的研究皮肤组织中细胞外基质(ECM)成分的糖基化对成纤维细胞(FB)黏附增殖能力的影响。方法对糖尿病患者皮肤组织中晚期糖基化终末产物(AGEs)的表达进行免疫组化测定;体外将FB的ECM糖基化处理,观察FB细胞的形态变化和糖基化基质对其黏附、增殖能力的影响,以非糖尿病皮肤组织作为对照。结果糖尿病患者皮肤组织中FB的细胞浆和ECM中AGEs的阳性表达明显多于非糖尿病皮肤;体外糖基化基质上接种的FB较小,胞体突起既少又短,黏附的细胞明显少于对照组(P<0.01);接种1 h,黏附细胞增多,逐渐与对照组接近,但仍低于对照组。结论糖尿病患者皮肤组织中的ECM被糖基化,产生的AGEs可抑制FB的黏附、增殖,可能是糖尿病创面愈合延迟的重要机制之一。

FGF2对糖尿病大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合的影响

目的观察成纤维细胞生长因子-2(FGF2)在糖尿病大鼠深Ⅱ度烫伤创面组织中的表达,探讨外源性FGF2应用对创面愈合的影响。方法18只SD大鼠随机分为单纯烫伤组(对照组)、糖尿病烫伤组(糖尿病组)和糖尿病烫伤FGF2干预组(FGF2组)(n=6)。糖尿病组和FGF2组大鼠先经链脲佐菌素诱导建立糖尿病模型后再制备深Ⅱ度烫伤模型,FGF2组大鼠建模后给予创面局部皮内注射FGF2。烫伤后3、7、14 d记录创面未愈合面积并计算创面愈合率;组织学检查观察创面愈合情况;流式细胞仪检测创面细胞周期分布;免疫荧光双标记和双抗体夹心法检测创面组织FGF2表达。结果烫伤后14 d,FGF2组的创面愈合率显著高于糖尿病组,为(53.14±11.44)%vs(25.40±3.00)%(P<0.01),FGF2组与对照组比较差异无统计学意义;与糖尿病组比较,FGF2组创面坏死胶原和G0/G1期细胞比例明显减少。与对照组比较,糖尿病组创面组织释放FGF2减少,为(74.500±13.115)ng/mLvs(100.078±17.863)ng/mL(P<0.05)。糖尿病组创面组织中FGF2和晚期糖基化终末产物(AGEs)共表达。结论糖尿病创面难愈与局部FGF2的数量和功能缺陷有关。创面局部应用外源性生长因子FGF2,可满足糖尿病创面修复细胞对功能性生长因子的需求,促进创面愈合。

糖尿病真皮组织中细胞的增殖和凋亡状态

目的研究在未受到外源损伤时,糖尿病真皮组织中细胞的行为表现特征。方法以糖尿病患者(糖尿病组)和非糖尿病对照者(对照组)的皮肤组织标本作为研究对象,分别进行组织学观察,免疫组化检测PCNA、cyclin B1的表达,TUNEL法检测凋亡细胞,组织蛋白提取ELISA法测定p53、Bcl-2和Bax表达水平。结果与对照组相比,糖尿病组真皮组织胶原排列松散杂乱,纤细的浅层胶原范围广。两组真皮组织中PCNA、cyclin B1和Bax表达无明显差别;与对照组相比,糖尿病组真皮组织中凋亡细胞表达明显增加(P<0.01),p53水平增高而Bcl-2水平减低(均P<0.05)。结论无外源性损伤时,糖尿病真皮组织已有病理改变。凋亡细胞比例增加,相关的凋亡调控蛋白表达异常。提示糖尿病创面有一个异常的愈合起点。

基质金属蛋白酶-2及其组织抑制因子-2在糖尿病皮肤损伤修复过程中的动态变化(英文)

背景:创面愈合是个复杂而有序的生物学过程,近期研究表明慢性创面愈合延迟往往与一些特定的基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase,MMP)表达失调有关。目的:研究活化的MMP(activematrixmetalloproteinase,aMMP)-2及其组织抑制因子(tissueinhibitorofmetalloproteinases,TIMPs)在糖尿病皮肤损伤修复过程中的动态变化。设计:随机对照实验研究。地点和对象:实验在上海市第二医科大学附属瑞金医院烧伤研究所完成。对象为SPF级Sprague-Dawley大鼠72只,体质量250g左右,雌雄不限,以链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠深Ⅱ度烫伤为模型,将伤后0,1,3,7,21d的组织标本进行组织块培养24h。主要观察指标:组织培养上清液中aMMP-2和TIMP-2的含量。结果:伤后糖尿病和正常鼠皮肤组织释放的aMMP-2和TIMP-2逐渐升高,糖尿病组未损伤组织释放的aMMP-2明显高于正常组(t=3.214,P<0.05),伤后21dTIMP-2明显低于正常组(t=2.427,P<0.05);正常组aMMP-2/TIMP-2比值基本稳定于一定的水平,而糖尿病组aMMP-2/TIMP-2比值逐渐下降,自伤后7d起,显著低于0时相点(t=10.019,P<0.01)。结论:糖尿病者在创伤前后皮肤组织中基质金属蛋白酶及其相关的生物活性物质的平衡均出现异常。

糖尿病鼠烫伤皮肤组织的aMMP-2和TIMP-2变化

目的 研究活化的基质金属蛋白酶-2(aMMP2)及其组织抑制因子(TIMPs)在皮肤损伤和修复过程中的动态平衡变化。方法 建立以STZ诱导的糖尿病大鼠深Ⅱ度烫伤模型,测定烫伤后0、1、3、7、21 d组织培养上清液中aMMP-2和TIMP-2含量。结果 烫伤后糖尿病和正常鼠皮肤组织释放的aMMP-2和TIMP-2逐渐升高。糖尿病组未损伤组织释放的aMMP-2明显高于正常组(P<0.05),伤后21d TIMP-2明显低于对照组(P<0.05);正常组aMMP-2/TIMP-2比值基本稳定于一定的水平,而糖尿病组aMMP-2/TIMP-2比值逐渐下降,自伤后7 d起,显著低于0时相点(P<0.01)。结论 糖尿病者刨伤前后皮肤组织中基质金属蛋白酶及其相关的生物活性物质的平衡均出现异常。

晚期糖基化终末产物受体与创伤修复

随着年龄的增长,循环和组织中糖基化终末产物(ad- vaneed glycation end products,AGE)的积聚逐渐增加,并在糖尿病组织中加速形成,与糖尿病、老年患者并发的创伤修复延迟相关。晚期糖基化终末产物受体(Receptor for ad- vanced glycation end products,RAGE)是多配体的表面受体之一,介导并放大了细胞对AGE的大部分应答反应,了解RAGE对创伤修复的影响及可能机制,可能会为一些难愈创面的治疗提供新的方法。AGE是1984年由美国的Vlassara等首先提出的,是生物系统内碳水化合物和蛋白质之间的非酶促反应,

严重烧伤后早期动脉血碱缺失指标的临床意义

目的分析严重烧伤早期动脉血碱缺失水平的变化及其临床意义。 方法回顾 12 6例烧伤面积 >30 %的患者伤后 48h内碱缺失 (BD)值的动态变化 ,比较存活者和死亡者BD值的变化及BD与烧伤总面积 (TBSA)之间的关系。 结果烧伤早期 48h内BD逐渐升高 ,存活组伤后 4～ 8hBD显著提高 (P <0 .0 5 ) ,死亡组伤后 16～2 4h才明显提高 (P <0 .0 5 ) ,两组在伤后 4～ 8hBD差异显著 (P <0 .0 1)。伤后 48h内存活组BD与TBSA均无明显相关性 ,而死亡组伤后 4～ 16hBD与TBSA显著相关 (P≤ 0 .0 5 )。死亡组的器官衰竭发生率亦明显高于存活组。结论严重烧伤早期BD可作为烧伤早期液体复苏时的监测指标之一 ,目前采用的瑞金补液复苏方法能有效改善烧伤早期组织器官的低灌注状态。若在此治疗过程中 ,伤后 4～ 16hBD仍持续低水平可能提示预后不良。

烧伤早期液体复苏时组织与细胞代谢变化的监测意义

严重烧伤早期常规的监测方法并不能敏感地反映器官实际的灌注和细胞代谢状况,应用肺动脉导管插管进行氧运输指标监测及碱缺失、血清乳酸盐、胃肠道粘膜内pH、组织氧张力和pH、Pco_2等测定可较好地反映全身或局部脏器的灌注和细胞代谢状况。

基质金属蛋白酶在慢性创面中的表达及其意义

皮肤创面愈合时，基质金属蛋白酶（MMPs)对细胞外基质的蛋白分解系修复和塑型的一种必需过程，MMPs及其相关的生物活性物质的动态平衡调控失衡可能是创面难愈的重要因素之一。本文综述了慢性创面中部分MMPs的异常表达，探讨其异常表达对创面愈合过程的可能影响机制。

泰能和头孢他啶的临床观察比较

比较了泰能和头孢他啶１９９１～１９９３年组（１９９１年组）和１９９３～１９９５年组（１９９３年组）的临床疗效，结果显示，１９９１年组中泰能组及头孢他啶组的临床疗效有一定的差异（Ｐ＜０．０５），而１９９３年组中两药的临床疗效差异显著（Ｐ＜０．０２５），说明两药临床都有疗效，但随着细菌耐药性的增加，泰能的疗效则优于头孢他啶，这与泰能的独特结构和具有拮抗β内酰胺酶稳定性有关。

大面积烧伤瘢痕的后期整复治疗

目的为解决大面积烧伤患者后期瘢痕整复治疗时的皮源问题提供一种有效的临床治疗方案。方法选择大面积烧伤后期进行整复治疗的患者21例,其中行瘢痕皮片移植术15例(47例次手术),瘢痕皮瓣移植术6例。分别在患者的瘢痕部位切取断层皮片或瘢痕皮瓣,行皮片移植术或皮瓣移植术,并在供皮区行邮票皮片回植。结果在47例次瘢痕皮片移植术中,皮片全部成活42例,手术部位外观明显改善,功能恢复。6例瘢痕皮瓣移植术病例中,5例皮瓣全部成活,手术部位创面修复,功能改善;1例瘢痕皮瓣表皮坏死,经过局部换药后伤口愈合,手术部位功能基本恢复。结论临床实践证实瘢痕皮片和瘢痕皮瓣移植适用于皮源奇缺的大面积烧伤患者的后期整复治疗,能提供足够的皮源。

巨噬细胞活化与创面愈合

巨噬细胞在创面愈合中扮演重要角色。巨噬细胞活化状态是其执行功能的主要工作状态,近年的研究表明巨噬细胞具有经典巨噬细胞活化和替代性巨噬细胞活化两种活化方式。创面中巨噬细胞所呈现的不同活化状态影响了创面修复的结局。该文就巨噬细胞活化及其与创面愈合的关系进行综述。

晚期糖基化终末产物与糖尿病皮肤微血管病变的相关性研究

目的 研究晚期糖基化终末产物 (AGE)与糖尿病 (DM)皮肤微血管病变的关系 ,探讨DM创面新生血管化障碍或延迟的机制。方法 应用链脲佐菌素 (STZ)将SD大鼠诱导成速发型DM大鼠模型 ,并以正常SD大鼠作为对照 ,于致病后 12周获取大鼠背部中央的皮肤标本。应用F 30 10荧光分光光度计和免疫组织化学技术测定皮肤中AGE含量的变化 ;应用透射电镜观察皮肤微血管超微结构的改变。再选用人脐静脉内皮细胞株ECV30 4细胞与不同浓度的AGE修饰人血清白蛋白 (AGE HSA)在体外共同培养 ,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和流式细胞仪检测AGE对人血管内皮细胞活性的的影响。结果 DM大鼠皮肤胶原提取液的荧光值明显高于相应年龄的正常大鼠 (P <0 .0 1) ;免疫组织化学检测显示DM大鼠皮肤中AGE呈片状或块状沉积 ,其表达阳性率和强阳性率显著高于正常大鼠 (P <0 .0 1) ;DM大鼠皮肤普遍存在微血管病变 ,主要表现为血管内皮细胞变性和基底膜增厚 ;内皮细胞经 10 0 μg/mlAGE HSA干预 6h后 ,采用MTT法测定其吸光度值显著低于正常大鼠 (P <0 .0 1) ,流式细胞仪测定的各时相点凋亡细胞百分率亦明显高于正常大鼠 (P <0 .0 1) ,且均呈时间和剂量的依赖性。结论 AGE是DM皮肤微血管病变的重要致病因素 。

氧化应激对糖尿病大鼠烫伤创面愈合的影响

目的探讨糖尿病机体氧化应激状态的改变及其对烧伤创面愈合过程的影响。方法应用STZ诱导糖尿病大鼠烫伤模型,检测其血浆中H2O2以及MDA水平与创面愈合的情况;流式细胞仪检测H2O2对大鼠成纤维细胞凋亡的影响。结果糖尿病大鼠创面愈合显著延迟,血浆中H2O2以及MDA水平明显增加;H2O2可促进大鼠成纤维细胞凋亡。结论氧化应激增强是糖尿病创面难愈发生的可能原因之一。

糖尿病合并创面难愈的机制研究

糖尿病合并难愈创面是导致创面修复”失控”难愈的因素中最值得重视的领域之一。其患病率日渐升高，治疗手段局限，使相关预后较差．从而需要耗费大量的卫生保健资源。糖尿病下肢溃疡，特别是糖尿病足溃疡在糖尿病合并难愈创面中占有重要的地位．国内外对其相关机制进行了大量的研究。

口服精氨酸对糖尿病大鼠皮肤组织糖利用的影响

目的:探讨精氨酸对糖尿病大鼠皮肤组织糖利用的影响及其可能的机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病对照组、糖尿病精氨酸治疗组和糖尿病甘氨酸对照组。糖尿病模型通过腹腔注射链脲佐菌素建立。模型成功后糖尿病精氨酸治疗组和糖尿病甘氨酸对照组分别予精氨酸和甘氨酸200mg/(kg·d)喂养,测其不同时期的血糖和体质量。8周后取胰腺组织观察组织形态学改变,并对血浆胰岛素含量、皮肤组织糖含量进行检测。结果:与甘氨酸对照组相比,精氨酸治疗后血糖恢复正常者显著增加;与糖尿病组相比,胰腺组织修复不明显的情况下,应用精氨酸后,血浆胰岛素增加,皮肤组织糖含量降低,体质量增加。结论:口服精氨酸可通过改善胰腺功能,促进胰岛素分泌,增加糖尿病皮肤组织等糖利用,降低血糖。

糖尿病大鼠表皮角质形成细胞生物学变化的机制研究

目的通过体内、外2部分实验,研究糖尿病状态下表皮角质形成细胞(KCs)增殖能力的变化及其信号转导途径。方法STZ(streptozotocin,链脲佐菌素)诱导正常SD大鼠,成模后8周(晚期糖尿病大鼠模型),荧光自显影技术检测皮肤组织中晚期糖基化终末产物(advanced glycation end-products,AGEs)的沉积;ELSA法检测表皮层中EGF(epidermal growth factor表皮生长因子)含量;提取大鼠KCs,用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)法测定细胞增殖速度;检测细胞周期;观察KCs核内NF-κB活性。分离培养正常SD大鼠KCs,加入不同浓度AGEs干预细胞,选择细胞反应敏感,差异显著的100mg/L AGEs干预组进行实验:测定细胞增殖速度;细胞对EGF的利用;检测KCs周期的变化,观察KCs核内NF-κB的活化状态。抑制NF-κB活性后观察细胞周期、细胞对EGF利用的变化。结果晚期糖尿病大鼠KCs细胞周期循环阻滞,细胞的增殖能力受到了抑制;体外100mg/L AGEs可以明显抑制KCs的增殖。抑制NF-κB的活性后,部分恢复细胞的增殖能力。结论AGEs可以通过NF-κB途径影响糖尿病大鼠表皮角质形成细胞的增殖能力。

早期应用参附注射液对严重烧伤患者重要脏器功能的保护作用

目的观察早期应用参附注射液对严重烧伤患者重要脏器功能的影响。方法将收治的伤后24h内入院、烧伤面积≥50%总体表面积的严重烧伤患者64例随机分为治疗组和对照组各32例,均予常规治疗,治疗组在此基础上加用参附注射液入液静滴连续14d。烧伤后1、3、7、14d检测两组患者血常规和肝肾功能指标、心肌酶谱。结果治疗组患者各项检测指标恢复较明显,能较好度过休克期、感染期和围手术期,病情相对平稳。患者28d生存率为100%,死亡率为3.13%,明显优于对照组。结论早期应用参附注射液治疗严重烧伤患者可有效保护严重烧伤患者的脏器功能。