RNA干扰乳腺癌MCF-7细胞HSPA8基因表达

目的:构建并筛选高干扰率的热休克蛋白8(HSPA8)(相对分子质量70000)基因干扰质粒,为进一步研究HSPA8基因在乳腺癌中的作用提供材料。方法:根据GenBank所发表的HSPA8的基因序列合成4个干扰片段,依次构建1、2、3和4组干扰质粒:pGPU6/GFP/Neo-349、pGPU6/GFP/Neo-818、pGPU6/GFP/Neo-931和pGPU6/GFP/Neo-1180,将这4组干扰质粒分别转染至人乳腺癌MCF-7细胞,并设阴性及空白对照组。经过G418筛选后得到稳定转染的细胞株,采用RT-PCR和Westernblotting方法分别从mRNA和蛋白质水平检测各组干扰质粒对HSPA8基因的干扰效果。结果:RT-PCR检测转染shRNA干扰质粒的各组MCF-7细胞的HSPA8基因mRNA转录水平与未转染组比较,干扰质粒1组HSPA8基因的表达量下降了25.0%,干扰质粒2组下降了37.5%,干扰质粒3组下降了43.7%,干扰质粒4组下降了68.5%。Westen-blotting检测结果显示:各实验组与对照组之间蛋白表达比较差异有显著性(P<0.05),pGPU6/GFP/Neo-1180干扰质粒的干扰效率最高。结论:成功构建了HSPA8基因的干扰质粒,提示HSPA8基因及其表达产物为研究HSPA8基因在乳腺癌的发生、发展中的作用提供了材料。

兔皮肤病原真菌的分离及其ITS序列的分析

分离发病兔场皮肤真菌病的病原,并对其内转录间隔区(ITS)序列进行分析鉴定。采集病兔患病部位的皮屑、痂皮进行培养,并根据形态学的特点进行鉴定;然后采用真菌内转录间隔区通用引物对该区域进行PCR扩增测序,并将该区域序列与GenBank中的核酸数据库进行比对分析,确定病原真菌的生物学分类,最后对其亲缘关系进行系统发育分析。分离得到的病原真菌经形态学初步鉴定为小孢子菌属;序列比对和系统发育分析表明,该菌与Microsporum gypseumstrain WCH-MG001(序列号:GU348990.1)的内转录间隔区(ITS)序列具有99%的同源性,在系统发育树上属于同一分支,从而确定该菌为石膏样小孢子菌。

几种常用消毒剂对兔舍内真菌控制效果的观察

通过药敏试验,在癸甲溴铵、苯扎溴铵、甲酚皂、复合碘4种环境消毒剂中筛选出了对3种分离到的兔皮肤病原真菌(石膏样小孢子菌、絮状表皮癣菌、断发毛癣菌)敏感的环境消毒剂:癸甲溴铵,苯扎溴铵,甲酚皂。再将3种消毒剂以不同浓度对同一兔场不同兔舍进行环境消毒,检测消毒前后兔舍内空气真菌气溶胶和表面真菌浓度,对比3种消毒剂的消毒效果。检测结果:经过统计学分析,癸甲溴铵1:400时对空气、表面真菌的消毒效果较好,消毒后1h效果最好,见效快,持续时间长,在3种消毒剂中最好;在1:600时对空气和表面真菌的消毒效果好,见效快,但对地面消毒6h后效果不明显,持续时间较短。苯扎溴铵在1:400和1:600时对空气消毒效果明显,但持续时间短,对表面的消毒效果较好,消毒后1h效果最明显,但对地面消毒6h后效果都不明显。甲酚皂1:10和1:20时空气消毒效果较好,但见效较慢;1:10浓度时在消毒后3h效果最明显,对表面消毒效果在消毒后1h效果较好,对地面消毒后3h效果不明显,对墙壁和笼具在消毒后6h效果不明显,持续时间较短。

青岛地区兔肺炎克雷伯氏菌分离鉴定

对青岛地区某兔场病死兔的病变器官组织进行细菌分离和纯培养,对所分离的细菌进行形态特征、理化性质和16SrRNA序列的分子鉴定和测序,人工感染以及药敏试验,判定为肺炎克雷伯氏菌。代表菌株16SrRNA序列长度1414bp,与GeneBank登录号为EU360123.1的肺炎克雷伯氏菌16SrRNA序列同源性100%,人工感染小鼠24h全部死亡,对供试的诺氟沙星等药物高度敏感,对供试的强力霉素等中毒敏感,对头孢拉定等耐药。应用筛选的敏感药物,并采取综合防治措施,使疫情得到了有效控制。

规模化兔场寄生虫病的防治

兔的寄生虫病是由各种易感寄生虫入侵兔体表面或机体内部，引起的各种疾病。兔的寄生虫病较少，虽然不会像其他细菌性疾病或病毒性疾病的危害那么严重，但兔群一旦感染寄生虫病，就会导致机体的抵抗力降低，

兔场在规模化后如何实现高效益

一、规模化兔场设计的缺陷兔场设计是非常重要的基础性工作,高的投资不一定是科学正确的,相反,科学的设计并不一定是要有高的投入,以下就兔舍布局、设计、笼子设计、环境控制和水质的质量问题展开叙述,避免规模化兔场的设计存在缺陷。（一）兔场布局问题兔场整体布局应依据兔子健康卫生和节省人工为基本原则。最基本的应该是兔场的净道和脏道区分开。人、饲料车等通道不能与运输粪便和死亡兔子的道路共用;

兔患腹泻病的原因分析及防治措施

规模化种兔场每年因腹泻病死亡的兔只占兔群总死亡率的70%,尤其以仔、幼兔发病率高。腹泻病是兔常见病和多发病,以发病率高、死亡率高为特点,对养兔业的发展造成极大威胁。下面对兔群发生腹泻病的原因进行分析,并提出相应的预防措施。1发病原因1.1疾病因素许多疾病在临床上都有腹泻的症状,主要以仔、幼兔发病率高,感染细菌、病毒、寄生虫等将导致腹泻,如魏氏梭菌、大肠杆菌、轮状病毒、球虫病等。

国产操作系统稳定性测试系统设计与实现

本文针对国产操作系统设计并现了一套综合测试系统,可对适配不同厂商的操作系统,具备良好的通用性,界面操作简便,极大地提高了测试效率,无需测试人员编写测试脚本,降低了测试难度,弥补了对国产操作系统进行综合测试区域的空白,为对国产操作系统进一步测试研究打下了基础。

规模化兔场寄生虫病的防治

兔的寄生虫病是由各种易感寄生虫入侵兔体表面或机体内部,引起的各种疾病。兔的寄生虫病较少,虽然不会像其他细菌性疾病或病毒性疾病的危害那么严重,但兔群一旦感染寄生虫病,就会导致机体的抵抗力降低,容易感染其他各类疾病,同时会严重影响兔群的生产性能。因此,规模化养兔场必须重视寄生虫病的防治工作,保证兔群的健康,才能获得较好的经济效益。1寄生虫病的特点和危害1.1急性发病,引起死亡有的寄生虫感染兔群后,会引起急性发病,

如何提高肉兔繁殖力

提高肉兔养殖效益,充分发挥肉兔繁殖潜力,达到多怀、多产、多壮的目的,要从以下几方面做好肉兔繁殖性能的关键技术。1做好选种、选配工作首先要严格选种。要选留遗传品质好、生产性能突出的优良公母兔留种;同时要求种兔健康无病,性欲旺盛,生殖器官发育良好。公兔要求睾丸对称,阴囊周径较大,精液品质优良,无恶癖;母兔选择生长发育良好、发情期明显、母性好、泌乳力强、产仔数多、成活率高的青年种兔。其次要注意选配,避免近亲繁殖。

高温季节合理使用小苏打可以减少热应激危害

<正>家兔作为一种体型较小的哺乳动物,新陈代谢较快,体表被毛正常体温范围约为38.3~39.5℃左右,属于耐寒不耐热的动物。最适宜的环境温度为15~20℃左右,正常生理临界温度为5~30℃,当环境温度超过这个温度范围时,就会对家兔的正常生长、繁殖造成不利影响。其中包括种兔繁殖性能的明显下降,种兔、育肥兔采食量降低,兔群免疫力降低,易发生各种疾病等。1小苏打的作用小苏打能够中和胃酸,溶解稀释黏液。

兔皮肤病原真菌的分离及其ITS序列的分析鉴定

【目的】分离发病兔场皮肤真菌病的病原,并对其ITS序列进行分析鉴定。【方法】采集病兔患病部位的皮屑、结痂进行培养,并根据形态学的特点进行鉴定;然后采用真菌ITS区通用引物对其ITS区进行PCR扩增测序,并将其ITS区序列与Gen Bank中的核酸数据库进行比对分析,确定病原真菌的生物学分类,最后对其亲缘关系进行系统发育分析。【结果】分离得到的病原真菌经形态学初步鉴定为小孢子菌属;序列比对和系统发育分析表明,该菌与Microsporum gypseum strain WCH-MG001(序列号:GU348990.1)的ITS序列具有99%的同源性,在系统发育树上也属于同一分支,从而确定该菌为石膏样小孢子菌。

兔皮肤病原真菌的分离及其ITS序列的分析鉴定

本试验的目的是分离发病兔场皮肤真菌病的病原,并对其ITS序列进行分析鉴定。采集病兔患病部位的皮屑、结痂进行培养,并根据形态学的特点进行鉴定;然后采用真菌ITS区通用引物对其ITS区进行PCR扩增测序,并将其ITS区序列与GenBank中的核酸数据库进行比对分析,确定病原真菌的生物学分类,最后对其亲缘关系进行系统发育分析。结果显示:分离得到的病原真菌经形态学初步鉴定为小孢子菌属;序列比对和系统发育分析表明,该菌与Microsporum gypseum strain WCH-MG001(序列号:GU348990.1)的ITS序列具有99%的同源性,在系统发育树上也属于同一分支,从而确定该菌为石膏样小孢子菌。