目的观察脐血来源树突状细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共培养(DC-CIK)对结肠癌细胞HT29的杀伤作用,探讨脐血来源DC-CIK替代外周血来源DC-CIK的可行性。方法取脐血及外周血各50 m L,密度梯度离心法分离单个核细胞,诱导培养7天...目的观察脐血来源树突状细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共培养(DC-CIK)对结肠癌细胞HT29的杀伤作用,探讨脐血来源DC-CIK替代外周血来源DC-CIK的可行性。方法取脐血及外周血各50 m L,密度梯度离心法分离单个核细胞,诱导培养7天至DC成熟,将成熟DC和CIK混合培养8天,观察DC-CIK的形态变化;培养4、8、12、16天检测不同来源CIK/DC-CIK的增殖情况,培养前及培养第7天DC表型(CD40+、CD80+、CD86+),培养前CIK及培养第16天DC-CIK CD3+、CD3+CD56+比例。按效应细胞(脐血或外周血DC-CIK)∶靶细胞(HT29细胞)=5∶1、10∶1、20∶1混合,培养24 h,采用CCK-8法检测不同来源DC-CIK对HT29细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果脐血及外周血来源DC、DC-CIK形态培养前后无明显差别,CD40+、CD80+、CD86+DC所占比例培养前后比较均无明显统计学差异(P均>0.05)。体外诱导培养第16天,脐血来源CD3+及CD3+CD56+DC-CIK增殖能力显著高于外周血来源DC-CIK,不同效靶比脐血来源DC-CIK对HT29细胞的增殖抑制及促凋亡作用效果均优于外周血来源DC-CIK(P均<0.05)。结论脐血来源DC-CIK可替代外周血来源DC-CIK作为肿瘤免疫治疗的种子细胞。展开更多
文摘目的观察脐血来源树突状细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共培养(DC-CIK)对结肠癌细胞HT29的杀伤作用,探讨脐血来源DC-CIK替代外周血来源DC-CIK的可行性。方法取脐血及外周血各50 m L,密度梯度离心法分离单个核细胞,诱导培养7天至DC成熟,将成熟DC和CIK混合培养8天,观察DC-CIK的形态变化;培养4、8、12、16天检测不同来源CIK/DC-CIK的增殖情况,培养前及培养第7天DC表型(CD40+、CD80+、CD86+),培养前CIK及培养第16天DC-CIK CD3+、CD3+CD56+比例。按效应细胞(脐血或外周血DC-CIK)∶靶细胞(HT29细胞)=5∶1、10∶1、20∶1混合,培养24 h,采用CCK-8法检测不同来源DC-CIK对HT29细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果脐血及外周血来源DC、DC-CIK形态培养前后无明显差别,CD40+、CD80+、CD86+DC所占比例培养前后比较均无明显统计学差异(P均>0.05)。体外诱导培养第16天,脐血来源CD3+及CD3+CD56+DC-CIK增殖能力显著高于外周血来源DC-CIK,不同效靶比脐血来源DC-CIK对HT29细胞的增殖抑制及促凋亡作用效果均优于外周血来源DC-CIK(P均<0.05)。结论脐血来源DC-CIK可替代外周血来源DC-CIK作为肿瘤免疫治疗的种子细胞。