血管钠肽抑制肝纤维化的实验研究

目的探讨人工合成的钠尿肽-血管钠肽(VNP)对肝纤维化的抑制作用。方法雄性Balb/c小鼠,随机分为玉米油对照组(对照组:腹腔注射玉米油1mL/kg,每周2次,持续12周),肝纤维化模型组(模型组:腹腔注射CCl41mL/kg,每周2次,持续12周,最后6周静脉注射生理盐水1mL/kg.d)和肝纤维化模型+VNP治疗组(VNP治疗组:腹腔注射CCl41mL/kg,每周2次,持续12周,最后6周静脉注射VNP50μg/kg.d)。于末次注射后3d取各组小鼠肝脏标本,观察肝脏病变程度和纤维化水平。体外培养鼠肝星状细胞株(HSC-T6),并加以不同浓度的VNP处理,分别采用[3H]-胸苷和[3H]-脯氨酸掺入的方法检测细胞DNA和胶原的合成水平。结果和对照组比较,模型组出现显著肝脏损伤和胶原沉积,而VNP治疗能明显减轻CCl4诱导的肝脏损伤和胶原沉积;对照组,模型组,VNP治疗组肝脏胶原浓度分别为(43.6±6.3)μg/mg,(93.5±7.2)μg/mg,(62.2±5.1)μg/mg,差异有统计学意义(P<0.05);VNP(10-7mol/L)处理后,HSC-T6的[3H]-胸苷和[3H]-脯氨酸掺入量分别较对照组减少了48.5%和43.7%(均P<0.05)。结论 VNP能抑制CCl4诱导的肝纤维化,该作用可能与其抑制肝星形细胞的增殖以及胶原合成有关。

血管钠肽通过激活NPR／cGMP／PKG信号转导通路抑制肝纤维化

目的研究人工合成的新的钠尿肽-血管钠肽（vasonatrinpeptide，VNP）对肝纤维化的抑制作用及其信号转导通路。方法用四氯化碳处理小鼠12周，实验组在后6周使用VNP，对照组不使用VNP。对肝组织行伊红和苏丹红染色来评价肝纤维化水平。在体外实验，用梯度浓度的VNP处理HSC—T6细胞，分别采用[^3HI-胸苷和[^3H]脯氨酸掺人法检测细胞合成DNA和胶原的水平。用8-br—cGMP（一种可穿过细胞膜的cGMP类似物）模拟VNP。用HS142—1（一种钠尿肽受体阻断剂）、KT-5823（PKG阻滞剂）阻断VNP的作用通路。用放射免疫的方法检测胞内cGMP水平。结果VNP显著减轻四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化。离体实验发现，经VNP处理的HSC-T6细胞，其DNA和胶原合成呈现VNP剂量依赖性减少；VNP显著增高了胞内的cGMP水平。VNP的这些效应可以被8-br-cGMP模拟，也可以被HS-1421或KT-5823阻断。结论VNP可通过激活NPR／cGMP／PKG信号传导通路减少肝星形细胞胶原的产生。VNP可能是一个新的有效的治疗肝纤维化的药物。