哺乳动物卵母细胞透明带结构及其在体外受精中的作用

卵母细胞在成熟过程中经过减数分裂和分化形成配子,卵母细胞透明带（ZP）主要具有ZP1、ZP2、ZP3以及ZP4等4种结构蛋白。不同物种中ZP结构不同,且卵母细胞ZP在体外受精过程中能够阻止多精入卵。文章主要综述了卵母细胞ZP的结构和其在体外受精过程中的作用机制,以期为研究体外受精提供参考。

抑制泛素结合酶改变猪卵母细胞透明带泛素化状态及精-卵结合能力

本研究旨在探究猪卵母细胞体外成熟过程中添加泛素结合酶(E2)抑制剂对卵母细胞透明带蛋白泛素化水平及精-卵结合能力的影响。试验分为6组:对照组、DMSO组、5、10、15和20μmol·L^(-1) NSC697923处理组。采用Western blot方法分析体外成熟培养液中添加不同浓度泛素结合酶抑制剂NSC697923对猪卵母细胞透明带泛素化水平表达的影响。通过Hoechst染色检测不同组别的精卵结合能力。结果表明:1)猪卵母细胞体外成熟培养液中,添加10、15和20μmol·L^(-1) NSC697923显著降低卵母细胞成熟率(P<0.05),透明带硬化时间(P<0.05)以及精卵结合率(P<0.05)。2)对照组和各处理组的透明带蛋白在61、81、106 ku处发生不同程度的泛素化标记,而添加15和20μmol·L^(-1) NSC697923显著地降低透明带蛋白泛素化水平(P<0.05)。综上表明,猪卵母细胞体外成熟过程中泛素结合酶(E2)改变成熟卵母细胞透明带泛素化水平以及精卵结合能力。

小鼠精子与卵透明带蛋白的识别机制

受精是一个非常灵巧、独特的和有时也很"棘手"的过程,包括一些必不可少的步骤,最后形成受精卵。在受精过程中卵透明带具有重要作用,卵透明带内含有许多种糖蛋白并能识别精子进行与卵子识别再融合。精子受体是指这些能识别精子的卵透明带内的糖蛋白,在受精和早期胚胎发育过程中发挥各种功能。文章主要针对卵透明带内的精子受体与受精过程进行综述。

LDL对玻璃化冷冻解冻培养MⅡ期猪卵母细胞线粒体膜电位和透明带泛素化水平的影响

本试验旨在探究添加低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)对玻璃化冷冻解冻后MⅡ期猪卵母细胞发育率、线粒体膜电位及透明带泛素化水平的影响。采用线粒体膜电位特异性探针JC-1检测各处理组线粒体膜电位,并采用SDS-PAGE及Western blotting方法分析不同处理组MⅡ期猪卵母细胞透明带蛋白泛素化水平。结果显示,玻璃化冷冻法处理中,10mg/mL LDL处理组MⅡ期卵母细胞正常率和成熟率(71.92%和69.86%)显著高于对照组(58.26%和54.55%)(P<0.05),最接近未冷冻组。10mg/mL LDL处理组MⅡ期卵母细胞线粒体膜电位显著高于对照组、1和20mg/mL LDL组(P<0.05)。免疫印迹结果显示,未冷冻组和LDL处理组MⅡ期卵母细胞ZP1、ZP2及ZP3蛋白分别在61、80、106ku发生不同程度的泛素化标记;10 mg/mL LDL处理组ZPs(ZP1、ZP2、ZP3)蛋白泛素化水平显著高于1和20 mg/mL LDL组(P<0.05),但显著低于非冷冻组(P<0.05)。结果表明LDL可改善玻璃化冷冻解冻培养后MⅡ期猪卵母细胞成熟率、线粒体膜电位及透明带泛素化水平。