低剂量ATG联合低剂量PTCY预防单倍型相合移植患者移植物抗宿主病的回顾性分析

目的 回顾性分析低剂量抗胸腺细胞球蛋白(antithymocyte globulin, ATG)联合低剂量移植后环磷酰胺(post transplantation cyclophosphamide, PTCY)预防单倍型相合移植患者移植物抗宿主病(graft versus host disease, GVHD)的疗效及安全性。方法 收集2022年1月至2023年2月在中国人民解放军联勤保障部队第九二○医院血液科行单倍型相合移植的90例患者资料,按照研究对象接受不同的GVHD预防方案分为研究组和对照组,研究组为低剂量ATG联合低剂量PTCY组,总共47例;对照组为标准剂量PTCY组,总共43例。对两组患者的植入情况、GVHD的发生情况、生存情况等指标进行分析。结果 (1)两组患者均成功植入,研究组中性粒细胞植入的中位时间显著短于对照组(11 vs 17 d,P<0.05)、血小板植入的中位时间显著短于对照组(12 vs 20 d,P<0.05)。研究组Ⅱ~Ⅳ度aGVHD发生率显著低于对照组(12.8%vs 34.9%,P<0.05)、Ⅲ~Ⅳ度aGVHD发生率显著低于对照组(6.4%vs 20.9%,P<0.05)、非复发死亡率显著低于对照组(6.4%vs 20.9%,P<0.05)、出血性膀胱炎的发生率显著低于对照组(12.8%vs 34.9%,P<0.05)。(2)截至研究结束,两组轻度cGVHD的发生率、中重度cGVHD的发生率、复发率、EB病毒及巨细胞病毒再激活率、总生存率、无进展生存率差异均无统计学意义。结论 对于单倍型相合移植而言,低剂量ATG联合低剂量PTCY方案具有较低的GVHD发生率、非复发死亡率、出血性膀胱炎发生率及植入较快的优势。

达沙替尼对靶向CD123的CAR-T治疗AML及不良反应的控制作用1例报告及文献复习

目的 初步探索靶向CD123的嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cells, CAR-T)治疗复发急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)的效果及达沙替尼对靶向CD123的CAR-T治疗AML引起的不良反应的效果。方法 收集第九二○医院血液科2019年9月收治的1例复发AML患者资料,患者既往多线化疗后复发,入组接受靶向CD123的CAR-T治疗。观察患者治疗后的血象变化,出现粒细胞缺乏时使用达沙替尼(40 mg口服,每8小时1次),粒细胞缺乏缓解即停用达沙替尼。观察患者治疗期间血象变化、CAR-T扩增及疾病控制情况。随访时间超过1年。结果 患者骨髓流式检测微小残留病在CAR-T回输第30天转阴,输注CAR-T细胞后患者无病生存1年。患者回输靶向CD123 CAR-T细胞后观察到CAR-T细胞显著扩增的同时出现粒细胞缺乏及细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome, CRS),在使用达沙替尼后CAR-T细胞扩增受抑制并伴随血象恢复,CRS症状缓解,停止使用达沙替尼后CAR-T细胞再次扩增且血象再次下降。结论 靶向CD123的CAR-T细胞对复发AML有一定疗效,初步显示达沙替尼对CAR-T细胞的扩增和功能具有关闭作用,并可缓解靶向CD123的CAR-T治疗引起的骨髓抑制,避免严重CRS发生。

以SEAM预处理方案行自体外周血干细胞移植治疗非何杰金淋巴瘤

背景：造血干细胞移植治疗非何杰金淋巴瘤前，预处理方案对移植效果至关重要。目前经典BEAM方案中的药物卡莫司汀在国内不易购得，且该方案毒副作用较大，复发率较高。目的：以司莫司汀取代卡莫司汀组成SEAM预处理方案，观察自体外周血干细胞移植治疗非何杰金淋巴瘤的效果。设计、时间及地点：病例分析，于2003—06／2006-02在解放军成都军区昆明总医院血液科进行。对象：选取同期收治的15例Ⅲ～Ⅳ期非何杰金淋巴瘤患者，男13例，女2例，平均年龄43．8岁，均经过2-8个疗程的化疗，CR14例，CR21例，部分缓解10例；病理证实T细胞淋巴瘤3例，弥漫大B细胞淋巴瘤12例；移植前复查肝肾功能及肺功能均正常。组成SEAM预处理方案的4种药物：司莫司汀（Semustine）为浙江瑞新公司产品，批号20071125；足叶乙甙（Etopside）为江苏恒瑞公司产品，批号07101231；阿糖胞苷（Ara—C）为浙江海正公司产品，批号080103A；马法兰（Mephalan）为葛兰素史克产品，批号7001。方法：皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子动员后12d采集患者外周血干细胞，与羟乙基淀粉、人血白蛋白及二甲基亚砜配成冻存液移植备用。动员后1个月行自体外周血干细胞移植，移植前患者行SEAM预处理方案：移植前8d口服司莫司汀320mg／m^2。移植前7d～移植前4d，静滴足叶乙甙200mg／m^2，1次／d；静滴阿糖胞苷200mg／m^2，1次／12h。移植前3d～移植前2d，静滴马法兰70mg／m^2，1次／d。移植当天将预先冻存的自体外周血干细胞水浴解冻，经锁骨下静脉插管快速回输给患者，一般输注细胞量为（3．0～5．0）×10^8／kg。主要观察指标：①预处理的毒副作用。②移植后造血功能恢复。③疾病转归。结果：SEAM预处理过程中15例患者均出现不同程度消化道反应，1例出现心动过速，3例出现肝功能损害。所有患者在自体外周血干细胞移植后造血功能均快速重建，中性粒细胞计数≥0．5×10^9L^-1的中位时间为11d，血小板计数≥20×10^9L^-1的中位时间为13d。中位随访时间39个月，13例患者无病存活，2例分别于移植后4，13个月死于疾病复发。结论：非何杰金淋巴瘤患者对SEAM预处理方案耐受性好，该方案毒副作用轻微，造血重建恢复较快，目前随访治疗效果较好。

HLA不全相合异基因外周血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血

目的探索HLA不全相合异基因外周血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血（SAA）的可行性。方法4例SAA患者接受HLA1～3个位点不合造血干细胞移植。供者给予G-CSF 5μg／（kg·d），皮下注射，连续5天，以动员外周血干细胞，在第4、5天采集外周血干细胞。预处理采用氟达拉宾（Flu）＋CTX＋ATG＋TBI组成的新方案。受者应用环孢素A（CsA）＋甲氨蝶呤（MTX）＋骁悉（MMF）＋舒莱预防GVHD。结果4例全部成功植入，中性粒细胞〉0．5×10^9／L的时间平均为15．3（14-16）天，PLT〉20×10^9／L的时间平均为17．5（16-19）天。中位随访时间14个月，仅1例患者发生Ⅱ度急性GVHD。1例因系统性念珠菌病死亡外，其余3例无病生存。结论新的HLA不全相合移植方案耐受性好，可以获得长期稳定的植活，而且不增加GVHD等并发症的发生。

新型免疫抑制剂霉酚酸酯的作用机理及临床作用

霉酚酸酯 (mycophenolate m ofetil,MMF)是一种新型、高效免疫抑制剂 ,主要通过非竞争性、可逆性抑制嘌呤从头合成途径的限速酶次黄嘌呤单核苷酸脱氢酶 (IMPDH) ,强烈抑制 T、B淋巴细胞增殖发挥免疫抑制作用。由于 MMF选择性作用于淋巴细胞 ,副作用较少 ,因而在器官移植。

TJU103对小鼠同种异基因造血干细胞移植模型GVHD的预防作用

目的探讨TJU103对小鼠同种异基因造血干细胞移植模型移植物抗宿主病(GVHD)是否起预防作用。方法(1)用单向混合淋巴细胞培养方法检测TJU103对T淋巴细胞增殖的影响;(2)以BALB/c(H-2d)、CB6F1(H-2d/b)分别作为完全异基因移植和半相合基因移植的受鼠,给予9.0Gy全身照射后4h,单纯照射组经尾静脉注射0.3mlD-Hank's液,不进行细胞移植;对照组经尾静脉注射C57BL/6小鼠混合细胞悬液(4.5×106骨髓细胞+3.0×107脾细胞),但不进行其他治疗处理;实验组经尾静脉注射C57BL/6小鼠混合细胞悬液(4.5×106骨髓细胞+3.0×107脾细胞)+TJU103(终浓度25μg/ml),此后腹腔注射TJU10350μg/d,共7d,然后观察其造血恢复、植入及GVHD的情况。结果(1)TJU103可以显著抑制T细胞活化增殖,其抑制作用呈剂量依赖性,在25μg/ml浓度时,可以抑制83%细胞增殖。(2)由于没有给予GVHD防治措施,对照组受鼠GVHD的发生率和死亡率分别为10/10和10/10;而完全异基因移植实验组小鼠GVHD发生率仅为2/10,30d生存率增加至8/10(P<0.01),中位生存期延长至30d以上(P<0.01);半相合基因移植实验组小鼠GVHD发生率为1/10,30d生存率增加至9/10(P<0.01),中位生存期延长至30d以上(P<0.01)。结论TJU103不仅可以显著抑制体外T淋巴细胞增殖效应,而且可显著降低小鼠同种异基因造血干细胞移植模型GVHD的发生率。

新型免疫抑制剂霉酚酸酯的作用机理及临床应用

霉酚酸酯 (MMF)是一种新型、高效免疫抑制剂 ,主要通过非竞争性、可逆性抑制嘌呤从头合成途径的限速酶次黄嘌呤单核苷酸脱氢酶 (IMPDH) ,强烈抑制T、B淋巴细胞增殖发挥免疫抑制作用。由于MMF选择性作用于淋巴细胞 ,副作用较少 ,因而在器官移植、骨髓移植及自身免疫性疾病的治疗中得到越来越广泛的应用。

小鼠同种异体骨髓移植GVHD模型的建立

目的选择C57BL／6（H-2^b）→BALB／c（H-2^d）、C57BL／6（H-2^b）→CB6F1（H-2^d/b）分别作为完全异基因移植和半相合基因移植的供、受者；建立小鼠移植物抗宿主病（GVHD）模型。结果此GVHD模型动物于移植后1周体重进行性下降，前3天平均每天下降2g左右，此后体重下降趋势有所减缓。第8-12d体重略有回升，第12d后体重再度开始下降。并伴有皱毛、弓背、脱毛、腹泻及肛门红肿，皮肤增厚等症象。移植后12d开始有小鼠死亡，至移植后3周小鼠全部死亡，死亡时平均体重下降10g左右。病理学检查结果显示，肝脏汇管区大量分叶核细胞和淋巴细胞浸润，肝血窦内也有淋巴细胞浸润；肝血窦和中央静脉扩张瘀血。肠粘膜下层有大量淋巴细胞及分叶核细胞浸润，肠粘膜上皮坏死脱落。皮肤真皮层毛细血管扩张，有淋巴细胞和分叶核细胞浸润，符合GVHD症象及病理诊断。结论本实验动物模型是可靠的，可用于GVHD防治的实验性研究。

父方否决细胞对小鼠半相合干细胞移植模型移植物抗宿主病的预防作用

目的探讨父方否决细胞对小鼠半相合干细胞移植模型移植物抗宿主病(GVHD)是否起预防作用。方法以B6CF1(H-2b/d)作为半相合干细胞移植的受鼠,给予9.0Gy全身照射后4h,单纯照射组经尾静脉注射0.3mlD-Hank's液,不进行细胞移植;对照组经尾静脉注射C57BL/6小鼠混合细胞悬液(4.5×106骨髓细胞+3.0×107脾细胞),但不进行其他治疗处理;实验组于移植4d后经尾静脉注射BALB/c小鼠脾细胞悬液(数量分别为5.0×106、1.0×107),然后观察其造血恢复、植入及移植物抗宿主病(GVHD)的情况。结果由于没有给予GVHD防治措施,对照组受鼠GVHD的发生率和死亡率分别为10/10和10/10;而1/6量否决细胞组小鼠GVHD的发生率为5/10,30d生存率增加至5/10(P<0.01),5只因GVHD死亡的受鼠中位生存期为20d,较对照组(中位生存期14d)有显著性差异(P<0.05);1/3量否决细胞组小鼠GVHD的发生率为2/10,30d生存率增加至8/10,中位生存期延长至30d以上(P<0.05)。结论半相合干细胞移植后输注父方否决细胞,可以诱导特异性免疫耐受,显著降低半相合干细胞移植GVHD的发生率。

非去髓性预处理的研究进展

造血干细胞移植前需进行预处理。传统方法是给予大剂量的放化疗 ,以最大限度地清除患者自身的骨髓组织 ,这种方法被称为骨髓清除性预处理方案或去髓性预处理方案。最近几年基于免疫学的发展 ,部分学者提出了非去髓性预处理的新策略 ,并在实践中获得成功。

同种异基因Th2细胞移植对GVHD和GVL效应的作用

为探讨同种异基因Th2细胞移植是否可以减低移植物抗宿主病 (GVHD)的发生和保留移植物抗白血病 (GVL)效应的作用 ,在体外用rmIL 4 ,ConA和离子霉素把供鼠 (C5 7BL/ 6 H 2b)T细胞优势化诱导培养为Th2细胞 ,再把Th2细胞与供鼠骨髓细胞混合移植给红白血病受鼠模型(EL96 11H 2d)。结果表明 :未处理的对照组 ,受鼠平均存活时间为 (10 .6± 1 3)天 ,10只均死于白血病 ;环磷酰胺化疗组 ,小鼠平均存活 (18 7± 4 2 )天 ,10只小鼠最终均死于白血病 ;骨髓细胞和脾T淋巴细胞移植组 ,小鼠平均存活 (2 2 7± 7 4 )天 ,9/ 10只均死于GVHD ;骨髓细胞和Th2细胞移植组 ,3/ 10只在 2 8天内死于GVHD ,其余 7/ 10只无GVHD发生 ,白血病发病时间明显推迟 ,平均存活 (36 9± 10 8)天 ,在 5 0天时检查有 2只鼠无白血病证据。研究证明体外极向化诱导培养的Th2细胞移植可减低GVHD发生的同时保留了抗白血病的能力。

唯阴康联合宫颈射频消融术治疗持续CINⅠ的临床效果观察

目的:探讨宫颈射频消融术后使用唯阴康(阴道吸附器)治疗持续CINⅠ的临床疗效。方法:对137例持续CINⅠ患者,随机分为两组,单纯宫颈射频消融治疗70例(单纯射频组),宫颈射频消融术后使用唯阴康治疗67例(射频+唯阴康组),连续阴道用药至宫颈创面愈合。观察两组愈合、术后排液、出血、感染发生及治愈情况。结果:两组术后6个月随访治愈率均较好,分别为91.4%和94.0%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);射频+唯阴康组患者宫颈创面愈合时间(32.78±4.52天)低于单纯射频组(47.53±3.46天)(P<0.05),术后阴道流液、出血等情况优于单纯射频组;术后随访4周,射频+唯阴康组愈合率(56.7%)高于单纯射频组(27.1%)(P<0.05)。结论:宫颈射频消融联合唯阴康治疗持续CINⅠ疗效满意,患者依从性好、安全性高,是较为理想的方法。

Tju103和CTLA4-Ig诱导T淋巴细胞免疫耐受的比较(英文)

目的观察比较Tju103和CTLA4-Ig分别调节、诱导T淋巴细胞免疫耐受的作用。方法用经丝裂霉素处理的异基因正常BALB/c(H-2d)小鼠巨噬细胞做耐受诱导原,分别用Tju103和CTLA4-Ig体外训导、调节C57BL/6(H-2d)小鼠T淋巴细胞,通过增殖效应(单向混合淋巴细胞反应,MLR)和杀伤效应(MTT法),考察经训导的C57BL/6小鼠T淋巴细胞分别对BALB/c小鼠和CBA(H-2k)小鼠脾细胞以及EL9611(H-2d)红白血病细胞的增殖效应和杀伤效应的改变。结果经Tju103调节后,C57BL/6小鼠T淋巴细胞对BALB/c和CBA小鼠脾细胞以及EL9611红白病细胞的增殖反应和杀伤效应抑制作用明显,未能诱导对已接触抗原(BALB/c小鼠)产生特异性免疫耐受。经CTLA4-Ig孵育后,C57BL/6小鼠T淋巴细胞对这三种细胞的增殖反应和杀伤效应抑制作用明显;对已接触抗原呈现免疫耐受,而对第三种抗原(CBA小鼠)和EL9611白血病细胞保持反应性。结论在特异抗原存在下,Tju103和CTLA4-Ig均能明显抑制异基因小鼠T淋巴细胞增殖反应性和杀伤效应,但Tju103诱导非特异免疫抑制,而CTLA4-Ig诱导特异免疫耐受,更适合于诱导移植免耐受。

大黄虫丸治疗难治性特发性血小板减少性紫癜临床观察

目的观察大黄虫丸对难治性特发性血小板减少性紫癜(ITP)的疗效,并对其作用机制做初步探讨。方法选取难治性特发性ITP患者12例,予口服大黄虫丸治疗,停用后随访至少半年,对治疗前后的血小板水平进行比较。结果显效3例(25%),良效4例(33%),进步2例(17%),无效3例(25%),总有效率为75%。患者血小板相关抗体明显降低,与治疗前比较有显著性差异(P<0.05)。无明显不良反应发生。结论大黄虫丸能抑制体内血小板相关抗体的产生,升高血小板的作用明显,安全有效。

KIR/HLA受配体模式对亲缘造血干细胞移植预后的影响

目的探讨供者杀伤细胞免疫球蛋白样受体KIR和受者HLA受配体模式,及其遗传背景对亲缘造血干细胞移植预后的影响。方法采用PCR-SBT基因序列分析和(或)序列特异性引物PCR-SSP分型技术检测HLA基因型,采用多重PCR-SSP技术检测供者KIR基因型。对29例接受亲缘造血干细胞移植的恶性血液病患者病例资料进行回顾性分析。结果29名患者中,8名受者表达供者KIR所有相应配体HLA-C1、C2、Bw4,此8对供受者即为KIR相合组,另外21对供者KIR缺失受者1～3个相应配体的供受者则为KIR不相合组。

白血病人骨髓间充质干细胞是否是恶性细胞?

本研究探索白血病人的骨髓间充质干细胞是否也具有白血病恶变特征。分别分离培养急性早幼粒细胞白血病(APL)及慢性髓系白血病(CML)患者的骨髓间充质干细胞并与正常对照比较其形态、生长曲线、细胞表面标志及是否带有白血病细胞的恶性克隆性的基因异常标志。结果表明:白血病患者的骨髓间充质干细胞在细胞生物学特征方面与正常健康人无任何明显差异,未发现白血病患者的骨髓间充质干细胞带有白血病细胞的恶性克隆性基因改变。结论:来源于白血病患者的骨髓间充质干细胞并无相应白血病细胞的克隆性异常,提示可能作为自体移植的辅助治疗和细胞治疗或基因治疗的可供选择的细胞载体。