贵州矮马IGF-I启动子-529 CpG甲基化及个别核苷酸变异与贵州矮马矮小表型有关

胰岛素样生长因子(insulin-like growth factors,IGFs)和生长(激)素(growth hormone,GH)是动物机体主要的促生长因子,它们的表达水平直接决定成熟个体的高度。贵州矮马的体高明显低于伊犁马等大型马,但其原因尚不清楚。本研究从贵州矮马基因组DNA中克隆了GH和IGF-I基因5'-侧翼序列,分别为239 bp和817 bp,包括部分启动子结构;进而采用生物信息学、比较基因组学方法对比分析了贵州矮马与伊犁马两个基因5'-侧翼序列/启动子的转录因子结合位点及潜在甲基化位点(Cp G岛)分布。亚硫酸氢盐PCR测序法(bisulfite sequencing PCR,BSP)显示,两个马群的GH基因5'-侧翼区域(239 bp)内的6个Cp G位点均发生了甲基化,甲基化频率无明显差异。然而,在IGF-I基因5'-侧翼区的148 bp片段内含有4个Cp G位点中,贵州矮马的-529 bp处Cp G位点的甲基化程度明显高于伊犁马(P<0.01),且该甲基化位点处于基本启动子邻近3'端;此外,两个马群IGF-I基因5'-侧翼区的-561 bp处检测到T、C碱基改变,导致贵州矮马的顺式调控元件/转录因子结合位点较伊犁马少1个,有可能影响IGF-I基因的转录效率。血清IGF-I浓度测定揭示,贵州矮马血清IGF-I含量极显著低于伊犁马(P<0.01)。Spearman相关性结果显示,贵州矮马及伊犁马的IGF-Ⅰ基因甲基化频率与血清IGF-I浓度呈中度负相关(r=-0.468),提示IGF-Ⅰ基因甲基化抑制其编码蛋白质的表达。结果证明,IGF-I启动子高甲基化及某些核苷酸(碱基)序列变异可能是贵州矮马个体矮小的部分原因。

贵州矮马与伊犁马生长激素基因5’侧翼区的结构特征

为了摸索贵州矮马生长发育的调控机制,探明贵州矮马与伊犁马生长激素基因5’侧翼区的结构特征,以4～5龄的贵州矮马和7～8龄的新疆伊犁马为研究对象,采用直接测序法从两种马基因组中克隆了生长激素(GH)基因5’侧翼区的DNA序列,并进行生物信息学分析。结果表明:1)从基因组中克隆的711bp片段为GH基因5’侧翼区序列;2)两个马品种的GH基因5’侧翼区中都存在TATA box、CAATbox、GC box和Octamer位点等真核生物启动子结构;3)从伊犁马GH基因5’侧翼区中检测到1个位于30bp处的突变位点发生了G→C颠换,由此新增了1个转录因子upstream stimulatory factor(USF)结合位点;4)从贵州矮马和伊犁马GH基因的5’侧翼区序列中发现了MZF1、CdxA、Nkx-2、AML-1a和c-Myc等19种共58个转录因子的结合位点。结论:克隆的711bp基因序列中存在大量的转录调控元件。

三个猪品种为父本对大约克母猪繁殖性能的影响

选择长白猪、杜洛克猪和可乐猪3个猪品种为父本,以大约克猪纯繁(大约克×大约克)和杜洛克猪纯繁(杜洛克×杜洛克)组为对照,研究大约克母猪繁殖性能的变化。结果表明:可乐猪为父本时,大约克母猪的妊娠期缩短了2 d,仔猪的有效乳头数略有下降,但产活仔数(11.0±1.41)头/窝、断奶仔猪数(9.7±1.45)头/窝、断奶育成率(94.41±2.826)%均为最高(P<0.05),死胎数(0.3±0.25)头/窝和死胎率(3.25±3.250)%显著低于其他试验组(P<0.05),总产仔数最高(11.3±1.81)头/窝,说明有良好适应性的可乐猪为父本可明显提高后代的成活率;从窝重上来看,可×大杂交组的初生窝重(14.850±2.443 2)kg/窝、20日龄窝重(45.700±12.3641)kg/窝、断奶窝重(67.500±9.565 7)kg/窝均高于其他试验组。相关性分析显示,死胎数影响仔猪的初生窝重、20日龄窝重及断奶窝重。这些结果说明以可乐猪为父本,可明显改善大约克猪的繁殖力,值得在毕节地区推广应用。

应用促卵泡激素基因SINE标记测定大约克猪纯合度

为了使猪种引进有便捷、准确的检测手段,采用聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)方法,检测了120头大约克种猪的纯合度。结果表明:受检母猪FSHβ基因的BB纯合基因型频率为82.5%,AB杂合基因型频率为17.5%,未检测到AA纯合基因型,经计算B等位基因的频率明显高于A等位基因频率。表明,该批次大约克猪存在一定比例的内二元或内三元杂交猪,应加强管理,严格控制再引种的纯度。该检测方法适用于区分国内地方猪品种和欧洲猪品种的纯合度,为引种种猪的纯合度检测提供准确的鉴定手段,有良好的应用前景。

紫云县贵州矮马资源评价

对贵州省紫云县境内现存的贵州矮马数量及分布进行了调查。全县12个乡镇中,贵州矮马存栏1 421匹,其中公马611匹,母马810匹;其毛色以骝毛和栗毛为主。雌雄矮马的体高、体长、胸围、头长和颈长没有明显差异,但雄性个体的管围明显较粗。雄性矮马的红细胞数量较多但体积较小,血小板和中间细胞数量较高,血清总胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇水平较雌性的低;雌性矮马妊娠时血小板数量和低密度脂蛋白水平代偿性下降,但中性粒细胞数量和CO2结合能力升高。雄性矮马与雌性矮马的使役能力没有明显差别。目前贵州矮马混养、无序买卖及疾病预防不足是其死亡率高、体高上升的重要原因。

猪伪狂犬病对养猪业的危害

伪狂犬病（PR）是由疱疹病毒科、α-疱疹病毒亚科中的伪狂犬病毒（PRV）引起的一种或多种动物感染的急性传染病，以发热、流产、死胎、奇痒（猪除外）和脑脊髓炎为主要症状，目前给养猪业造成的经济损失仅次于猪瘟。在我国将其列为二类传染病。