胶原酶浓度对大鼠胰岛分离纯化产量的影响

目的观察胶原酶浓度对大鼠胰岛分离纯化产量的影响,筛选出获取高产量胰岛的最佳消化液的胶原酶浓度。方法 75只雄性SD大鼠按胶原酶浓度分为5组：Ⅰ组（0.5 mg/ml）、Ⅱ组（0.75 mg/ml）、Ⅲ组（1.0 mg/ml）Ⅳ组（1.2 mg/ml）和Ⅴ组（1.5 mg/ml）,每组15只。通过胆灌注胶原酶V来消化大鼠胰腺,分离胰岛,采用不连续密度梯度Ficoll离心法纯化胰岛,根据胰岛直径计数所获胰岛的数量及胰岛当量,并利用葡萄糖刺激胰岛素释放试验评估胰岛功能。结果分离的大鼠胰岛具有较好的质量,胰岛纯度为95%左右,活性率为90%左右,体外培养生长良好。随着胶原酶的浓度增加,胰岛数量和胰岛当量明显增加（P〈0.05）,并且最大直径的胰岛数量也在增加（P〈0.05）,在胶原酶浓度1.0 mg/ml时获得的胰岛产量最高,其次为1.2 mg/ml,在其他浓度时,胰岛产量都较低（P〈0.05）。在低糖和高糖刺激下胰岛素的释放分别为（1.346±0.128）ng/ml和（2.565±0.208）ng/ml,差异具有显著性意义（P〈0.05）,刺激指数为（1.908±0.152）,提示胰岛细胞功能良好,电镜照片显示胰岛生长状况良好。结论进行大鼠胰岛分离纯化时最适宜的胶原酶浓度为1.0~1.2 mg/ml,可获得稳定高产量的胰岛,过低和过高的浓度都是不适宜的。

五指山小型猪胰岛分离和纯化的初步研究

目的探讨封闭群五指山小型猪胰岛的分离和纯化,并在体外检测分离纯化后的胰岛对高低糖刺激反应来判定胰岛功能。方法 7只雄性五指山小型猪和6只普通成年猪的胰腺分别被用于胰岛分离纯化实验研究。胰腺获取后,胰管插管并注入消化液(胶原酶V,1.8g/L),胰腺充分灌注后,切成碎块并转入消化罐内消化,消化液过滤后并经梯度离心后,收集纯化的胰岛,经双硫宗(DTZ)染色后计数,并在不同浓度葡萄糖培养液里检测释放的胰岛素浓度来判定胰岛的活性。结果小型猪胰腺解剖上更接近人类,胰腺消化时间平均为(30±8)min,消化程度为(70±8)%,胰岛产量纯化前为(5500±1025)IEQ/g,纯化后为(4120±625)IEQ/g,纯度为85%,活力为80%;取自屠宰场猪胰岛产量纯化前为(2500±625)IEQ/g,纯化后为(1720±435)IEQ/g,活力为60%。镜下观察,小型猪胰岛镜下可被DTZ染色呈红色,纯化后的胰岛大小一致,形态完整,体外培养小型猪胰岛在低糖和高糖刺激下胰岛素释放分别为(1.346±0.128)ng/mL和(2.565±0.208)ng/mL,差异有显著性意义(P<0.05),刺激指数为(1.908±0.152),而取自屠宰场猪胰岛素释放分别为(1.246±0.18)ng/mL和(1.4±0.208)ng/mL,差异无显著性。结论封闭群五指山小型猪胰腺解剖结构和人类相似,分离纯化后的胰岛产量高,功能良好,适合异种胰岛移植。

五指山小型猪胰岛对糖尿病大鼠的治疗作用

目的:探讨小型猪胰岛治疗糖尿病大鼠的作用和功效.方法:成年健康♂五指山小型猪和普通家猪作为胰岛供体.胰腺获取后经胶原酶消化后进行胰岛提取纯化,纯化后的胰岛通过门静脉移植到糖尿病SPF大鼠的肝内,术后每天肌注环孢菌素(20mg/kg)作为免疫抑制剂,并通过检测糖尿病大鼠的血糖变化和肝脏组织学检查来判定胰岛移植后的存活情况和纠正胰岛移植的效果.结果:五指山小型猪胰腺消化后胰岛产量为4608 IEQ/g±593 IEQ/g,纯化后为3820 IEQ/g±718 IEQ/g,纯度为85%,取自屠宰场猪胰岛产量为纯化前为3500 IEQ/g±625 IEQ/g,纯化后为2720 IEQ/g±435 IEQ/g,纯度为80%.两组84.6%糖尿病大鼠在移植术后第1天,血糖降至正常.维持时间:小型猪胰岛术后存活时间为3-5d(中位存活时间:4.5d),普通家猪胰岛存活时间为2-4d(中位存活时间:3.7d).经Kaplan-Meier分析,两组胰岛存活时间无差别.结论:封闭群五指山小型猪分离纯化后的胰岛产量高,功能良好,可以纠正糖尿病大鼠的高血糖,适合作为异种胰岛移植的理想供体.

结直肠癌患者围手术期T淋巴细胞亚群检测的意义及临床应用研究

目的:探讨结直肠癌患者围手术期T淋巴细胞亚群的变化及其与肿瘤进展的关系。方法:选择2021年5月—2022年5月我院收治的40例结直肠癌患者入选观察组,另选择同时期于我院进行身体健康检查的60名健康人员入选对照组。分别检测外周血T淋巴亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))的表达比例,并分析观察组患者不同临床特征下CD4^(+)/CD8^(+)变化情况。结果:观察组术前与术后10天CD3^(+)、CD4^(+)均低于对照组,CD8^(+)高于对照组(P<0.05)。观察组术后10天CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)均高于术前,CD8^(+)低于术前(P<0.05)。单因素分析结果表明,结直肠癌患者肿瘤直径、淋巴结转移、TNM分期均与其免疫功能低下有密切关联性(P<0.05)。多因素分析结果显示,结直肠癌患者免疫能力低下的主要危险因素为肿瘤直径>4cm、有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ+Ⅳ期(P<0.05)。结论:结直肠癌患者存在不同程度免疫能力下降,对结直肠患者围手术期进行T淋巴细胞亚群检测可为疾病的诊断提供数据支持,还可为评估患者病情进展及治疗效果情况提供临床依据,具有较高的临床应用价值。

用腹腔镜肝囊肿开窗术治疗肝囊肿的效果分析

目的:探讨使用腹腔镜肝囊肿开窗术治疗肝囊肿的效果。方法:选取近几年某院收治的56例肝囊肿患者作为研究对象。根据随机数表法将这些患者分为开腹组和腹腔镜组。为开腹组患者使用开腹肝囊肿开窗术进行治疗,为腹腔镜组患者使用腹腔镜肝囊肿开窗术进行治疗。然后比较两组患者治疗的效果、术后并发症的发生情况及术后一年内病情复发的情况。结果:经治疗,腹腔镜组患者的术中出血量、手术持续的时间、术后住院的时间、术毕至肝功能恢复的时间、并发症的发生率及病情的复发率均优于开腹组患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:使用腹腔镜肝囊肿开窗术治疗肝囊肿对患者造成的创伤小,其并发症的发生率低,术后身体恢复的速度快,其病情不易复发。

腹腔镜经腹腹膜前疝修补术与开放无张力疝修补创伤反应的对比研究

目的:对比研究腹腔镜经腹腹膜前疝修补术(TAPP)与开放无张力疝修补术(OTFH)对机体创伤反应的影响。方法:选择2013年2月至2018年3月收治的106例成人单侧腹股沟斜疝患者作为研究对象,分为TAPP组(n=63)与OTFH组(n=43),对比两组术前1 h及术后12 h、24 h血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、超敏C反应蛋白三个创伤应激指标的变化;同时比较两组患者手术时间、住院时间。结果:TAPP组手术时间、住院时间短于OTFH组(P<0.05);两组患者术后12 h、24 h血清肿瘤坏死因子!、白细胞介素6、超敏C反应蛋白均较术前1 h升高(P<0.05);两组术前1 h及术后12 h、24 h血清肿瘤坏死因子!、白细胞介素6、超敏C反应蛋白水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:与传统OTFH相比,TAPP手术时间、住院时间缩短,但两者对机体创伤反应方面的影响相似。

高中化学实验实施开放的探索

开放高中化学实验，是落实新课程理念的重要举措，是从创新角度加强化学实验教学，是实施素质教育的有效途径。几年来，我对高中学生试行开放式化学实验，给学生创造了更多动手操作和观察实验的机会，让学生积累更多、更丰富、更细致的感性材料，使学生学习化学积极性、主动性和创造性在实验中得到充分发挥。学生在开放实验中，开阔了视野，启迪了智慧，培养了独立的实践能力和创新精神。本文就如何实施开放化学实验，谈谈自己的做法和体会。

泰癌注射液联合化疗对Ⅳ期胃癌的疗效及免疫功能的影响

目的观察泰癌注射液联合化疗对Ⅳ期胃癌的疗效及免疫功能的影响。方法 68例Ⅳ期胃癌患者随机分成观察组和对照组。所有病例均接受FOLFOX化疗方案:奥沙利铂100 mg/m^2静脉滴注2 h,第1天;亚叶酸钙400 mg/m^2,5-氟尿嘧啶500 mg/m^2,第1~5天。观察组在此基础上加用泰癌注射液2 m L肌注,2次/d,第1~5天。每3周为1个疗程,3个疗程后评价疗效。结果观察组治疗有效率较对照组高,化疗不良反应较对照组低,免疫功能较对照组明显提高(P<0.05)。结论化疗联合泰癌注射液具有增效减毒作用,能明显提高晚期胃癌化疗患者的免疫功能。

经胸乳入路腔镜甲状腺手术与传统开放手术对创伤反应的影响

目的 比较经胸乳入路腔镜甲状腺腺叶切除术(ETCBA)与传统开放甲状腺腺叶切除术(TOT)对机体创伤反应的影响。方法 99例成人单侧良性甲状腺肿物患者分为TOT组(n=56)和ETCBA组(n=43),比较两组术前2 h及术后12、24 h血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、超敏C反应蛋白水平的变化;同时比较两组患者手术时间、术中出血量、术后引流量及切口美容满意度的差异。结果 两组患者术后12、24 h血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、超敏C反应蛋白均较术前2 h升高(P<0.01),但组间差异无统计学意义(P>0.05)。ETCBA组手术时间长于TOT组(P<0.01),但术中出血量、术后引流量少于TOT组(P<0.01),术后切口美容满意度评分高于TOT组(P<0.01)。结论 与TOT手术相比,ETCBA手术时间长,但术中出血量、术后引流量少,术后切口美容满意度高,对机体创伤反应的影响相似。

大鼠胸腺石蜡切片自发荧光的去除方法及应用

目的研究高效去除大鼠胸腺石蜡切片自发荧光的方法,并探索其在免疫荧光染色中的应用。方法应用硼氢化钠、台盼蓝、苏丹黑B对大鼠胸腺组织的石蜡切片进行处理并在荧光显微镜下观察自发荧光猝灭情况;并通过免疫荧光双标法对胸腺CD103及CD4阳性细胞进行染色探究其实用价值。结果经硼氢化钠处理后的切片红、绿、蓝三种颜色的自发荧光均较对照组明显减弱,且可增强胸腺组织切片免疫荧光染色效果。其他两种试剂处理后的石蜡切片自发荧光的强度与对照组无明显差异。结论硼氢化钠能显著的减低胸腺石蜡切片的自发荧光,可使免疫荧光特异性染色更加鲜明。

正常成人胰岛移植治疗糖尿病的实验研究

目的探讨正常成人胰岛移植治疗糖尿病的作用。方法 2012年1月至2013年1月健康成人胰腺供体共13例。获取胰腺后经胶原酶消化并进行胰岛提取纯化,将纯化后的胰岛移植到糖尿病裸鼠肾包膜下为实验组,生理盐水代替胰岛移植为对照组,各13只。术后通过检测糖尿病裸鼠的血糖变化和组织学检查来判定胰岛移植后的存活情况和纠正血糖的效果。结果成人胰腺消化后胰岛产量为纯化前(3608±403)IEQ/g,纯化后(2820±318)IEQ/g,纯度为85%。实验组84.6%(11/13)糖尿病裸鼠在移植术后第1天,血糖降至正常,对照组血糖无明显变化。两组糖尿病裸鼠存活时间:实验组存活时间35～57d,中位存活时间46d。对照组存活时间5～12d,中位存活时间7d。两组比较差异具有统计学意义,Log-rank(Mantel-Cox)值为8.74,P值为0.0012。结论成人胰腺消化后,可得到高纯度活力正常的胰岛,并能纠正糖尿病裸鼠的高血糖。正常成人胰岛移植可能成为临床糖尿病患者的一种有效治疗方法。