长牡蛎尼氏单孢子虫的初步研究

采集大连大窑湾养殖区的长牡蛎(Crassostrea gigas),抽取其血淋巴液在显微镜下观察,观察到尼氏单孢子虫(Hap-losporidium nelsoni)原生质体的类似物。对抽取的血淋巴液进行总基因组DNA的提取,将扩增单孢子虫(Haplosporidiosis)SSU rDNA区域的引物对HAP-F2和HAP-R2进行改进,经过特异性试验证明其特异性很好,得到引物对HAP-F和HAP-R,应用此对引物进行聚合酶链式反应(PCR),结果扩增出239bp条带。将PCR产物进行测序,经序列比对分析确定为尼氏单孢子虫。同时,采用尼氏单孢子虫的特异性DNA探针MSX1347对抽取的长牡蛎血淋巴液进行原位杂交,结果也检测到了尼氏单孢子虫。

辐射耐受性宫颈癌细胞系的建立及DNA损伤修复相关基因的差异表达

目的筛选来源相同辐射耐受性不同的宫颈低分化鳞癌细胞DNA损伤修复相关基因的差异表达,探讨宫颈癌辐射耐受的机制。方法用9MeV-β射线反复多次间歇大剂量照射人宫颈低分化鳞癌细胞株SiHa,建立辐射耐受性细胞SiHaR,用DNA损伤修复相关PCR基因芯片检测SiHa与SiHaR差异表达基因,并对筛选出的部分基因进行Western blot验证。结果 SiHa及SiHaR细胞经射线照射后呈指数性杀灭,同一剂量照射后SiHaR细胞存活分数(survival fraction,SF)值更高,SiHaR细胞在2Gy照射后细胞存活分数(SF2)是SiHa的2.26倍;二者有差异表达的DNA损伤修复相关基因41个,其中上调基因27个,下调14个。有13个位点出现6倍以上或低于0.1的差异。Western blot对4个差异表达蛋白质验证结果提示,与SiHa细胞相比,糖尿病关联Ras相关基因(ras-related associated with diabetes,RRAD1)、复制因子C2[replication factor C(activator 1)2,RCF2]在SiHaR表达水平明显下调,而X线修复交叉互补基因1(X-ray repair complementing defective repair,XRCC1)及切除修复交叉互补基因(excision repair cross-complementing,ERCC1)蛋白质明显上调。结论人宫颈癌细胞系SiHa经间歇性大剂量射线多次照射后筛选获得的SiHaR细胞具有稳定的辐射耐受性;这与DNA损伤修复能力在基因水平上发生了某些突变明显相关。这为通过调控相关基因进行放射敏感性调控提供了依据。

蛋白组学分析放射抗拒性鼻咽癌细胞差异表达蛋白

目的筛选同一来源放射敏感性不同的鼻咽癌细胞蛋白组学差异表达,探讨鼻咽癌放射抗拒机制。方法建立放射敏感性不同的人鼻咽癌细胞株,采用双向凝胶电泳技术和图像分析软件PDQuest分离和分析不同阶段细胞间的差异蛋白质点,采用LC-MS/MS质谱分析系统鉴定差异蛋白质点,采用Gene Oncology Annotation将已知差异蛋白质进行分类。部分筛选蛋白质采用Western blot进行验证。结果 CNE-2和CNE-2R细胞有差异候选差异蛋白质27个,其中11个蛋白质在放射抗拒CNE-2R细胞中表达下调,16个上调。其中的4个:4-3-3σ、GADD45、PRKDC和HSP27用Western blot的方法得到了进一步确认。结论 CNE-2细胞受射线反复照射产生放射抗拒性细胞,在蛋白组学水平上发生了某些突变,并将这些突变稳定的遗传下来,从而表现出放射抗拒性的表型;通过调控其中与放射抗拒性产生相关的某些蛋白表达,就有可能调控细胞的放射敏感。4-3-3σ、GADD45、PRKDC和HSP27是预测NPC放疗敏感性的潜在基因标志物,它们表达失调可能参与NPC放射抗拒性的产生。

大连地区某流域河段底栖动物监测与评价

2020年9月(平水期)和2021年4月(枯水期)对大连地区某流域河段底栖动物进行了调查,并运用生物多样性指数和均匀度指数对群落组成进行了分析。调查及分析结果表明:该流域河段底栖动物隶属于2门4纲,其中,2020年9月(平水期)共采集到节肢动物36种、环节动物2种;2021年4月(枯水期)共采集到节肢动物14种、环节动物2种。平水期该流域河段的优势物种为苏氏尾鳃蚓,其次为中华齿米虾;枯水期该流域河段的优势物种为苏氏尾鳃蚓。该流域河段各断面生物多样性水平整体较低,枯水期多样性指数介于1.22~2.07之间,平水期介于0.99~2.76之间。该流域河段不同断面整体生物种类分布均匀性较差,枯水期均匀度指数介于0.33~0.46之间,平水期介于0.26~0.50之间。各断面水体均存在一定程度的生物多样性问题。

局部晚期宫颈癌CT图像引导下192Ir三维腔内后装治疗剂量体积参数与疗效关系

目的探讨CT图像引导下192Ir三维腔内后装治疗剂量体积参数与局部晚期宫颈癌临床疗效的相关关系。方法选取我院2011年1月到2013年12月间50例局部晚期宫颈癌患者为研究对象,对其进行盆腔外照射40Gy和同期化疗后进行CT图像引导下192Ir三维腔内后装治疗,且每次均在治疗前进行CT扫描定位,探讨剂量体积参数与局部晚期宫颈癌临床疗效的相关关系。结果 90.0%GTV的BED与EQD分别为(101.3±6.6)Gy、(85.3±5.6)Gy(α/β=10);90.0%CTV的BED与EQD分别为(95.2±6.3)Gy、(79.3±5.4)Gy(α/β=10);90.0%处方剂量对GTV和CTV的V90分别为(91.4±4.5)%、(88.4±7.3)%。1-2级放射性肠炎患者乙状结肠D2cm3剂量明显的高于其他危及器官的D2cm3剂量(P<0.05),统计学有意义。三维治疗计划中D90和V90明显的高于二维治疗计划D90和V90,数据的比较差异有统计学意义(P<0.05)。二维治疗计划拟合CT图像上显示其直肠参考点剂量和D2cm3以及A点剂量无明显的差异(P>0.05),统计学无意义;三维治疗计划仅仅提高膀胱参考点的剂量。结论 CT图像引导下192Ir三维腔内后装治疗能够提高其处方剂量对肿瘤靶区的覆盖率,提高临床治疗效果。

TXT+DDP方案同步放化疗治疗非小细胞肺癌疗效观察

目的:探讨TXT+DDP方案同步放化疗治疗非小细胞肺癌临床疗效。方法:选择非小细胞肺癌患者60例,将其随机分为观察组与对照组各30例。观察组给予TXT+DDP方案同步放化疗,对照组给予TXT+DDP方案序贯放化疗。结果:观察组治疗后临床有效率70.00%,高于对照组53.33%;观察组患者无进展生存期为7.6±1.2月,优于对照组4.3±0.9月;观察组不良反应发生率70.00%,对照组不良反应发生率46.67%,两组比较差异具有统计学意义。结论:TXT+DDP方案同步放化疗治疗非小细胞肺癌,可提高临床疗效,延长患者无进展生存期。

局部晚期鼻咽癌替吉奥化疗同步放疗临床观察

目的:观察局部晚期鼻咽癌替吉奥化疗同步放疗临床应用效果以及安全性。方法:选取2011年1月-2012年1月于我院进行治疗的局部晚期鼻咽癌患者60例,随机分为两组,研究组和对照组,每组各30例。对照组采取单纯放疗方式进行治疗,研究组采用替吉奥化疗同步放疗进行治疗。观察并比较两组患者的疗效、不良反应、复发以及生存情况。结果:研究组患者治疗后总有效率为80.00%(24/30)显著高于对照组的53.33%(16/30)(P<0.05)。对照组患者治疗后骨髓抑制10例(33.33%)、胃肠反应14例(46.67%)、口腔黏膜反应10例(33.33%)、放射性皮炎12例(40.00%)均显著低于研究组的20例(66.67%)、24例(80.00%)、20例(66.67%)、22例(73.33%)(均P<0.05)。研究组患者治疗后1年生存率为100%,与对照组的93.33%没有差异(P>0.05)。研究组患者治疗后2年生存率为96.67%,1年复发率为3.33%,2年复发率为6.67%均显著优于对照组的83.33%,16.67%,23.33%(均P<0.05)。结论:替吉奥化疗同步放疗对于局部晚期鼻咽癌患者近、远期疗效好,值得推广应用,但应注意毒副反应。

中外饮用水水质标准的微生物指标比较

结合《生活饮用水卫生标准》(GB 5749-2006),与国外标准(美国环保署的《美国饮用水水质标准》、欧盟的《饮用水水质指令》、世界卫生组织的《饮用水水质准则》及其他某些国家的饮用水标准)中的微生物指标进行了分析比较。综合评价了各水质标准的特点,并对我国的水质标准的微生物指标提出了意见和建议。

海产贝类尼氏单孢子虫病害的研究进展

目前,我国形成规模养殖的经济贝类有近20种,贝类增养殖已经成为沿海海水养殖业的支柱产业。资料显示,2004年全国海水贝类产量为1024万吨,占海水养殖总产量的77．82％。但是目前,由于气候变化、海洋环境污染、外来生物入侵等因素导致我国海产贝类病害越来越重,寄生虫就是主要病原之一,其中尼氏单孢子虫就是其中的一种原生动物寄生虫,寄生于很多种海产贝类体内。这种病害在很多地区都有暴发,国外对其研究较多,国内梁玉波等对这一病害进行了研究。因此,系统阐述国外贝类尼氏单孢子虫病害的研究现状与进展,对我国海产贝类病害的研究具有现实意义。本文对尼氏单孢子虫的分类、病害的流行情况、尼氏单孢子虫的形态学,病害的主要症状,尼氏单孢子虫的检测方法,尼氏单孢子虫与寄主之间的交互作用,环境因素对病害流行的影响等方面进行了论述,为我国贝类病害的研究和防治提供参考。

术前短程放疗对于直肠癌根治性切除术手术的安全性影响及远期疗效探讨

目的观察术前短程放疗在直肠癌根治性切除术中的远期疗效及安全性。方法选取90例直肠癌患者,根据治疗方法的不同分为观察组(n=45)与对照组(n=45)。对照组患者采用直接性切除术治疗,观察组患者先行断层放疗后进行手术治疗,对两组患者的手术一般情况、远期疗效及术后安全性指标进行比较。结果两组患者的术前Ⅰ级和Ⅱ级不良反应发生率、平均手术时间、术中出血量、术后排气时间和平均住院时间比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05);观察组患者的术后并发症发生率低于对照组患者,差异无统计学意义(P﹥0.05);观察组患者的淋巴结转移率、盆腔局部复发率均低于对照组患者(P﹤0.05),3年生存率优于对照组患者(P﹤0.05)。结论直肠癌根治性切除术前进行短程放疗具有较好的安全性,且患者远期疗效明显优于单纯根治性切除术,具有较好的临床应用价值。

大连市中心城区地下水“三氮”污染分析

依据《地下水质量标准》(GB/T 14848—1993),对大连市中心城区2006—2010年地下水"三氮"监测资料进行分析。结果表明,"三氮"的检出率(最高为100%)和超标率(最高为58.8%)都较高,其中亚硝酸盐氮超标显著。氨氮浓度各年均值均超标,呈波动变化;亚硝酸盐氮浓度各年均值均超标,并呈上升趋势;硝酸盐氮各年均值波动变化,总体呈上升趋势。除2009年以外,其他4年中丰水期的硝酸盐氮浓度都比枯水期高;除2007年外,其他4年中的丰水期氨氮浓度都比枯水期低。"三氮"最高浓度值主要出现在中心城区周边区域。

基于底栖动物群落结构特征的大连地区某河流流域生态健康研究

2016年-2020年4月(枯水期)和9月(平水期)对某河流某断面流域底栖动物进行了调查。调查结果表明:该流河某断面流域底栖动物共有41种,隶属于3门6纲。其中环节动物5种,占总数的12.20%;软体动物8种,占总数的19.51%;节肢动物28种,占总数的68.29%。断面流域优势种为中华齿米虾、东方蜉、红纹蜉B种、条纹角石蚕。断面流域2016年-2020年平水期底栖动物栖息密度总量为304 ind·m^(-2),枯水期栖息密度总量为756 ind·m^(-2),底栖动物的密度被少数种类所主导。Shannon-Wiener多样性指数和Pielou均匀度指数表明,断面流域整体生物多样性水平偏低且生物种类分布均匀性较差,个体分布均匀程度从时间来看呈现逐年下降趋势。2018年-2020年断面流域中清洁物种明显多于2016年-2017年,而耐污物种则呈相反趋势。

Livin、survivin在乳腺癌中的表达及其与caspase-3和临床病理的相关性

目的探讨livin、survivin在乳腺肿瘤组织中的表达及其与caspase-3和临床病理的相关性。方法免疫组化SP法检测76例乳腺恶性肿瘤及17例乳腺良性病变石蜡包埋标本的livin、survivin和caspase-3的表达,分析livin、survivin表达与caspase-3及临床病理学特征的关系。结果Livin、survivin蛋白在乳腺正常组织、不典型增生、导管内原位癌和浸润性癌病变进展过程中呈递增趋势,而caspase-3蛋白呈递减趋势,二者呈明显的负相关(P<0.05);Livin蛋白表达与患者年龄、临床分期和淋巴结转移明显相关(P<0.05),与肿瘤大小、组织学分级无关(P>0.05);Survivin表达与淋巴结转移和肿瘤大小明显相关(P<0.05),与年龄、组织学分级、临床分期无关(P>0.05)。结论乳腺癌中livin、survivin可通过诱发凋亡的效应性蛋白酶caspase-3抑制凋亡促使肿瘤增殖。年轻患者乳腺癌发生过程中与livin关系更为密切,survivin蛋白在乳腺癌细胞的转移、侵袭等活动中可起到促进作用。

Survivin mRNA反义寡核苷酸诱导胰腺癌细胞凋亡

目的:用反义寡核苷酸(ASODN)封闭胰腺癌细胞中Survivin 基因的表达,研究其诱导细胞凋亡的作用及其机制. 方法:用脂质体介导SurvivinASODN转染人胰腺癌细胞株SW1990细胞,用Annexin Ⅴ-FITC/PI复染、流式细胞术检测及电镜术观察凋亡,激酶活性检测法测定细胞内caspase-3活性变化,免疫沉淀法测定细胞内丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)活性的变化早期细胞变化情况. 结果:脂质体介导SurvivinASODN转染胰腺癌细胞后细胞内p38MAPK及caspase-3活性较对照组明显升高(55.3% vs 2.9%,3.2%,4.5%,4.8%respectively,P<0.05).细胞出现典型的凋亡形态学特征,细胞凋亡率较对照组明显增加(8.81±1.33 vs 47.87±2.91,and 14.73±1.36 vs 23.47±3.61.P<0.05). 结论:脂质体介导转染Survivin ASODN可以诱导细胞激活,诱导活化进而诱导细胞发生凋亡.

苦参碱对结直肠癌患者术后化疗减毒增效及增强免疫力的影响

目的观察苦参碱注射液对结直肠癌患者术后化疗减毒增效及增强免疫力的作用。方法将80例结直肠癌术后化疗患者随机分为治疗组与对照组各40例,术后均给予XELOX化疗方案,治疗组在此基础上加用苦参碱注射液,每3周重复1次,连续治疗6个周期。比较2组治疗前后生存质量、免疫功能及不良反应情况。结果治疗组有效率明显高于对照组(P<0.05),白细胞减少、恶心呕吐、胃肠道不适及脱发发生率明显低于对照组(P均<0.05),且Ⅲ度以上毒副反应发生率也明显降低(P<0.05),但2组血小板减少、红细胞减少及肝功能损害发生率比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均较治疗前、同期对照组明显升高(P均<0.05),CD8+水平较对照组明显降低(P<0.05)。结论苦参碱注射液对结直肠癌术后化疗患者具有减毒增效作用,且可明显增强细胞免疫功能,对改善患者预后有重要价值。

放射抗拒性鼻咽癌细胞系的建立及差异表达基因

目的筛选同一来源放射敏感性不同鼻咽癌细胞基因差异表达,探讨鼻咽癌放射抗拒机理。方法用X射线间歇多次照射鼻咽癌细胞株CNE-2建立放射抗拒性细胞CNE-2R,采用BioStarH-141s型基因芯片检测CNE-2与CNE-2R差异表达基因。结果CNE-2和CNE-2R细胞有差异表达的基因308条,上调176个,下调132个。在差异表达的基因中,有76个位点出现6倍以上的差异,其中36个下调、40个上调,包括与DNA修复相关、细胞周期、凋亡、细胞骨架相关蛋白、细胞增殖、代谢、蛋白质合成、信号转导、免疫相关等方面相关的基因,基因分布变化较明显的主要是DNA修复相关基因、细胞骨架、细胞周期和凋亡相关基因。结论CNE-2细胞反复照射后产生放射抗拒性细胞,在基因水平上发生了某些突变,通过调控其中相关基因,就有可能调控细胞的放射敏感性。

复方苦参注射液联合同期放化疗治疗局部晚期鼻咽癌的疗效及其对患者免疫功能的影响

目的观察复方苦参注射液联合同期放化疗治疗局部晚期鼻咽癌的疗效及其对患者免疫功能的影响。方法将2012年6月至2015年6月在西安交通大学第二附属医院肿瘤科门诊诊治的82例局部晚期鼻咽癌患者按照随机数法分为观察组42例和对照组40例,对照组采用顺铂3周化疗方案联合同期调强放射治疗(IMRT),观察组在对照组治疗的基础上加用复方苦参注射液20 m L静脉滴注,1次/d,连续14 d,停药7 d为一个周期,连续治疗3个周期。治疗前1 d及结束后1周观察并比较两组患者各项细胞免疫指标(CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+)的变化情况;两组患者治疗过程中骨髓抑制最高等级反应程度;治疗结束后3个月时两组治疗的近期效果。结果所有的患者均完成放疗计划。观察组患者治疗后的CD4+水平较治疗前升高[(42.93±10.78)%vs(36.00±10.21)%],CD8+降低[(24.42±9.79)%vs(29.73±8.25)%),CD4+/CD8+比值升高(2.10±1.32 vs 1.38±0.83),观察组治疗后的细胞免疫功能水平优于其治疗前水平,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组患者治疗后的CD4+、CD4+/CD8+增加量高于对照组[(6.65±1.34)%vs(-5.09±1.38)%、(0.56±0.15)vs(-0.57±0.16)],CD8+降低量高于对照组(-3.86±1.51)%vs(7.03±1.54)%,观察组治疗结束后细胞免疫功能水平优于对照组治疗后水平,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组骨髓抑制程度低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者的近期疗效比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论复方苦参注射液虽未能提高局部晚期鼻咽癌同期放化疗近期疗效,但能有效激活患者的细胞免疫功能,减轻局部晚期鼻咽癌同期放化疗对骨髓的损伤,值得临床推广应用。

乳腺癌中GRP78、Survivin表达的相关性及与预后的关系

目的:探讨乳腺癌中GRP78、Survivin表达的相关性及其与乳腺癌患者预后的关系。方法:采用免疫组化Envision法检测169例乳腺癌石蜡标本中GRP78、Survivin的表达状况,并对其表达的相关性以及与乳腺癌患者预后的关系进行了统计分析。结果:在169例乳腺癌标本中,GRP78强表达为68例(40.2%),弱表达为101例(59.8%);Survivin强表达为96例(56.8%),弱表达为73例(43.2%)。对二者相关性的分析表明二者表达的吻合度具有统计学意义,但吻合程度较弱。单因素生存分析结果表明GRP78(+)Survivin(+)组(1组)、GRP78(-)Survivin(+)组(2组)、GRP78(+)Survivin(-)(3组)之间的无病生存时间差异无显著性(P>0.05),但与GRP78(-)Survivin(-)组(4组)相比,其无病生存时间均较差,差异有显著性(P<0.05);1、2、3组间的总生存时间差异无显著性(P>0.05),但与4组相比,其总生存时间均较差,差异有显著性(P<0.05)。多因素Cox回归分析表明GRP78、Survivin的表达状况是影响乳腺癌患者无病生存时间的独立预后因素(P<0.05),但不是总生存时间的独立预后因素(P>0.05)。结论:乳腺癌中GRP78与Survivn存在着相关性,GRP78和/或Survivn强表达提示患者预后不良,GRP78、Survivin的表达状况对判断乳腺癌患者的预后具有一定的参考价值。

基于FPGA的铁路异物检测算法的硬件实现

针对现有铁路异物检测算法无法实时检测的问题,提出了一种基于FPGA的铁路异检测算法的硬件实现。该算法实现了图像的采集、运动目标检测、单次扫描连通域标记和异物特征提取,设计二维数组的存储结构用于记录标号、等价关系和特征参数,在单次扫描期间完成异物多个特征参数的存储,扫描结束后完成参数的整理和提取。最后,在搭建的铁路异物检测硬件平台上实现了该算法,并在此基础上进行了验证试验和现场试验。试验结果表明,该算法能够有效提取检测异物特征,参数提取正确,速度满足实时检测的要求,可在铁路现场完成异物的实时检测,多参数的提取可用于异物的分类和跟踪。