大蒜RAPD反应体系的建立及优化

该试验以弥渡紫皮大蒜叶片基因组DNA为试材，采用不同浓度MgCl2、引物、dNTP、TapDNA聚合酶对大蒜的RAPD体系进行单因素反应条件优化。结果表明，25μL总反应体积中，最佳浓度配比为：模板DNA40ng。MgCl2 2．0mmoL／L，引物12pmol，dNTP50μmoL／L，Taq DNA聚合酶unit，10×反应缓冲液2．5μL。扩增程序为：94℃变性3min，94℃变性30s，37℃退火30s，72℃延伸1min，共35个循环，72℃最终延伸10min。