吲哚美辛对喉癌Hep-2细胞增殖与iNOS活性的影响

目的:探讨吲哚美辛对喉癌细胞增殖与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性的影响,为喉癌的预防和治疗提供理论依据。方法:Hep-2细胞培养于含吲哚美辛(30、60、125和250μmol.L-1)的培养基中,分别培养24h和48h;用MTT方法检测吲哚美辛组细胞增殖的抑制率,用台盼蓝染色法检测吲哚美辛组细胞活力的抑制作用,并与溶剂对照组进行比较;吲哚美辛(125、250和500μmol.L-1)与脂多糖(LPS,10μmol.L-1)同时处理细胞16h,同时设只加LPS对照组,采用酶法和分光光度法检测细胞培养上清液中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的活性。结果:与对照组比较,不同浓度的吲哚美辛(30、60、125和250μmol.L-1)组Hep-2细胞增殖的抑制率均显著增加(P<0.05)。相同浓度的吲哚美辛,随作用时间延长,Hep-2细胞增殖的抑制率显著降低(P<0.05);与对照组比较,不同浓度的吲哚美辛(30、60、125和250μmol.L-1)随剂量增加,Hep-2细胞活力的抑制程度均显著增加(P<0.05)。相同浓度的吲哚美辛,随作用时间延长,Hep-2细胞活力的抑制程度显著降低(P<0.05);与LPS对照组比较,吲哚美辛在125、250及500μmol.L-1浓度时,LPS诱导的细胞培养上清液中iNOS的活性显著降低(P<0.05)。结论:吲哚美辛在30～250μmol.L-1浓度范围内显著抑制Hep-2细胞的细胞增殖与细胞活力,明显降低LPS诱导的细胞iNOS的活性升高。

吲哚美辛对喉癌细胞Hep-2增殖与凋亡及COX-2蛋白表达的影响

目的探索吲哚美辛对喉癌细胞增殖与凋亡的作用以及对细胞COX-2蛋白表达的影响。方法Hep-2细胞暴露于含吲哚美辛(125,250,500μM)的培养基中,培养24小时,用MTT方法检测各组药物与溶剂对照组相比对细胞增殖的影响;用台盼蓝染色法检测吲哚美辛对细胞活力的影响;吖啶橙染色法观察吲哚美辛(250μM)对细胞形态的影响;流式细胞仪分析法检测吲哚美辛(250μM)对细胞周期和细胞凋亡的影响,Western blot检测吲哚美辛对细胞COX-2蛋白表达的影响。结果吲哚美辛使Hep-2细胞增殖及细胞活力明显降低,细胞形态发生明显变化,细胞质萎缩而细胞核相对较大,S期细胞分数明显增加,细胞出现凋亡峰,而COX-2蛋白表达量增加。结论吲哚美辛强烈抑制Hep-2细胞增殖与细胞活力,明显改变细胞初始形态,阻滞细胞从S期向G2/M期转化,并诱导其凋亡,吲哚美辛对Hep-2细胞的上述作用机制与COX-2的特异性抑制途径无关。

吲哚美辛与雄激素对喉癌细胞Hep-2增生与凋亡的影响

目的探索吲哚美辛(IND)与雄激素(Mib)对喉癌细胞增生与凋亡的作用。方法Hep-2细胞暴露于含IN(D125,250,500μmo/lL),或Mi(b1,10,100nmo/lL),或IND与维持剂量的Mib(1nmo/lL)同时存在的培养基中,分别培养24h;用MTT法、锥虫蓝染色法与流式细胞仪分析法分别检测细胞增生、细胞活力、细胞周期和细胞凋亡。结果IND使Hep-2细胞增生及细胞活力明显降低,S期细胞含量明显增加,且出现凋亡峰;Mi(b100nmo/lL)明显促进Hep-2细胞增生;Mi(b1nmo/lL)与IN(D250μmo/lL)同时作用,下调细胞增生的抑制率,明显减少死细胞数,但S期细胞含量以及细胞凋亡比率明显上升。结论IND强烈抑制Hep-2细胞增生与细胞活力,阻滞细胞从S期向G/2M期转化,并诱导其凋亡;维持剂量的Mib具有保护细胞膜的作用,而另一方面又具有促进IND诱导细胞凋亡的作用。