不同冷冻方法对人睾丸精子冷冻保存效果的研究

目的比较不同冷冻保护剂和不同冷冻载体对人睾丸精子的冷冻保存效果。方法选取在兰州大学第一医院生殖医学专科医院进行诊断性睾丸穿刺获得成熟活动精子的患者,以及行睾丸精子ICSI术后的患者,在知情同意下将剩余睾丸组织冷冻保存,共46例。将每例睾丸组织分为4份,随机分成4组进行冷冻:1.8ml冷冻管+甘油复合冷冻剂(A组,46例);1.8ml冷冻管+Fasrun冷冻保护剂(B组,46例);0.25 ml麦管+Fasrun冷冻保护剂(C组,46例);超微量冷冻麦管+Fasrun冷冻保护剂(D组,46例)。冷冻标本经液氮熏蒸后投入液氮,比较各组复苏后精子活力和复苏率。结果冷冻前各组的活动睾丸精子能够满足ICSI操作所用精子量;冷冻复苏后,C组和D组能够容易找到正常活动精子(≥0.1/200倍视野)的例数显著高于A组、B组(P<0.05);D组解冻后运动精子复苏率显著高于A组、B组(P<0.05),C组解冻后运动精子复苏率显著高于A组(P<0.05)。结论应用改良的超微量冷冻麦管+Fasrun冷冻保护剂能够提高睾丸精子的冷冻复苏率。

自然周期与激素替代周期准备内膜对冻融胚胎移植结局的影响

目的:探讨同一黄体支持剂量时两种内膜准备方案对冻融胚胎移植妊娠结局的影响。方法:回顾性分析2016年1月至2016年12月在兰州大学第一医院生殖医学专科医院采用自然周期和激素替代周期准备内膜,并采用相同剂量黄体支持的冻融胚胎移植(FET) 233例患者资料,其中自然周期121例,激素替代周期112例。比较不同内膜准备方案患者的年龄、体质量指数(BMI)、多囊卵巢综合征(PCOS)/排卵障碍比例、ICSI比例、移植胚胎数、移植日子宫内膜厚度、临床妊娠率、早期流产率、晚期流产率、早产率及活产率等。结果:自然周期组年龄大于激素替代周期组(31. 99岁vs 30. 89岁),BMI(21. 35 kg/m2vs 22. 23 kg/m2)、PCOS/排卵障碍比例(4. 13%vs 19. 64%)小于人工周期组,差异有统计学意义(P<0. 05)。两组移植胚胎数、有优胚移植比例、胚胎种植率、多胎率比较,差异无统计学意义(P>0. 05)。自然周期组和激素替代周期组患者临床妊娠率(57. 85%vs65. 18%)、早期流产率(13. 04%vs 15. 28%)、晚期流产率(1. 45%vs 4. 17%)、早产率(28. 81%vs36. 21%)、活产率(85. 51%vs 80. 56%)比较,差异无统计学意义(P>0. 05)。结论:足量黄体支持的情况下,在冻融胚胎移植中自然周期和激素替代周期准备内膜均可获得相似的妊娠结局,临床工作中可根据实际情况灵活选择。

不同手术方式处理卵巢子宫内膜异位囊肿对体外受精-胚胎移植妊娠结局的影响

目的探讨卵巢子宫内膜异位囊肿剔除术和经阴道穿刺抽吸术对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)妊娠结局的影响。方法选择2010年1月至2016年3月在我院行IVF-ET助孕治疗的98例卵巢子宫内膜异位囊肿患者为研究对象,根据助孕前处理不同分组:52例曾在外院接受囊肿剔除术的患者为囊肿剔除组,46例促排卵前行经阴道行囊肿穿刺抽吸术的患者为穿刺组;并选择同期来我院就诊因单纯输卵管因素不孕的55例患者为参照组。比较不同手术组的促排卵情况及妊娠结局,以及与本中心一般IVF患者的临床结局差异。结果穿刺组窦卵泡数显著低于参照组[(10.41±4.69)vs.(13.68±7.78)个](P<0.05)。囊肿剔除组和穿刺组的HCG日E_2水平[分别为(15 746.24±7 821.86)、(16 704.57±7 860.99)pmol/L]显著低于参照组[(21 082.45±10 316.09)pmol/L](P<0.05)。囊肿剔除组和穿刺组的获卵数[分别为(11.37±5.98)、(10.84±6.01)个]显著低于参照组[(14.05±7.27)个](P<0.05),但3组间双原核(2PN)受精率、优质胚胎率、移植胚胎数比较均无显著性差异(P>0.05)。穿刺组的临床妊娠率(39.13%)呈低于囊肿剔除组(53.85%)的趋势,但无显著性差异(P>0.05)。结论卵巢子宫内膜异位囊肿术后的IVF-ET临床结局与本中心一般IVF妊娠结局相似。卵巢子宫内膜异位囊肿行剔除术和穿刺术各有优势,在临床工作中应根据患者实际情况选择合适的治疗方式。

辅助生殖技术中多胎妊娠减胎术后妊娠结局的比较

目的比较多胎妊娠减胎术后不同保留胎儿数对出生结局的影响。方法回顾性分析208例辅助生殖技术(ART)所获多胎妊娠行减胎术患者资料,其中157例为三胎减为双胎(减为双胎组),51例为多胎减为单胎(减为单胎组;包括三胎减为单胎25例,双胎减为单胎26例),另选同期ART双胎妊娠未行减胎术611例(未减双胎组)、单胎妊娠760例(未减单胎组)作为对照。比较各组新生儿出生结局及妊娠期并发症情况。结果多胎减胎术后子代出生缺陷未显著增加(P>0.05);与单胎妊娠比较,双胎妊娠(包括减胎和未减胎)显著增加早产率、低出生体重儿率(P<0.05);减胎术后双胎妊娠早产率、低出生体重儿率显著高于未减双胎者(分别为56.69%vs.45.34%、57.79%vs.44.77%,P<0.05)。结论虽然ART后多胎妊娠减胎术并不增加子代的出生缺陷,但是仍然应该控制多胎妊娠、减少减胎术的干预,提高ART助孕的安全性。

诊断级超声对人孕早期绒毛组织的化学影响

目的 探讨诊断级B超对人胚胎发育的安全性。方法 将 12 0名孕 6～ 8周拟行人工流产的孕妇随机分成 6个组 (Ⅰ～Ⅵ ) ,其中Ⅰ为正常对照组 ,Ⅱ～Ⅴ依次为辐照 5分钟、 10分钟、 2 0分钟、 30分钟后于 1小时内取绒毛检测组 ,Ⅵ为辐照 30分钟后于 7～ 10天取绒毛检测组。分别检测各组绒毛组织的化学变化。结果诊断剂量超声辐照 2 0分钟可致人体宫内绒毛组织发生化学变化。丙二醛 (MDA)值随超声剂量增加而升高(PⅠ -Ⅲ >0 0 5 ,PⅠ -Ⅳ <0 0 1,PⅠ -Ⅴ <0 0 5 )而超氧化物歧化酶 (SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH - px)活性随超声辐照剂量增加而下降 (PⅠ -Ⅲ >0 0 5 ,PⅠ -Ⅳ <0 0 1,PⅠ -Ⅴ <0 0 1)。对照组与Ⅵ组比较P >0 0 5 ,提示损伤作用是可逆性的。结论 诊断超声辐照 2

mir-615-5p通过靶向调节癌基因TRAF4抑制非小细胞肺癌细胞的增殖

已知mi R-615-5p可抑制癌细胞的增殖,然而其具体分子机制尚不明确。本研究证明,mi R-615-5p通过负调节癌基因TRAF4,从而抑制NSCLC细胞的增殖。运用实时定量PCR检测NSCLC患者癌组织和癌旁正常组织、正常人肺支气管上皮细胞系HBE和3种人源NSCLC细胞系中mir-615-5p的表达,发现与正常的组织和细胞相比,mir-615-5p在NSCLC癌组织和癌细胞中表达水平显著降低;运用Western印迹检测HBE细胞和NSCLC细胞系中TRAF4蛋白的表达,发现TRAF4在NSCLC细胞中表达显著升高;MTT和CCK-8分析结果显示,转染mir-615-5p mimic可显著降低NSCLC细胞的增殖能力;生物学信息分析和萤光素酶报告基因检测结果显示,mir-615-5p可靶定结合TRAF4 m RNA,并下调TRAF4蛋白的水平;pc DNA-TRAF4转染后细胞增殖检测结果显示,过表达TRAF4能够消除mir-615-5p引起的细胞增殖抑制作用。综上所述,mir-615-5p通过靶定结合癌基因TRAF4的m RNA,下调TRAF4蛋白的水平,从而抑制NSCLC细胞的增殖。

改良卵裂期胚胎评级标准的临床应用

目的:探讨改良卵裂期胚胎评级系统在常规体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中的应用价值,验证其科学性和合理性。方法:回顾性分析应用改良卵裂期胚胎评级系统(1级、2级、2.5级、3级、4级)对正常受精第3天胚胎进行评级(1级为最高,4级为最低),并移植2枚胚胎,根据所移植胚胎评级的不同共分为A组(1级+1级)、B组(1级+2级)、C组(1级+2.5级)、D组(2级+2级)、E组(2级+2.5级)、F组(2级+3级)、G组(2.5级+2.5级)、H组(2.5级+3级)和I组(3级+3级)。比较各组间的种植率,同时采用化学发光法对不同评级胚胎培养液中的丙酮酸和可溶性人白细胞抗原-G(sHLA-G)进行分析,结果:在4434个常规IVF-ET周期中,总体上随着移植胚胎评级的递减,种植率呈现出下降趋势,A组最高,I组最低。至少包括1枚2级胚胎的B、D、E、F组种植率均显著高于两枚都是2级以下的胚胎(G、H、I组)(P<0.05),G组种植率(32.13%)显著低于D组(36.19%)和E组(36.47%),并且高于H组(29.97%)和I组(26.31%),差异均有统计学意义(P<0.05)。胚胎培养液中sHLA-G的阳性表达率和丙酮酸摄取量随着胚胎评级的增高,呈现出增加的趋势,并且其2.5级与其他各级之间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:改良卵裂期胚胎评级标准是选择移植胚胎的有效方法,可以反映胚胎发育的潜能。

多囊卵巢综合征发病机制的研究现状

多囊卵巢综合征(PCOS)是育龄妇女常见的内分泌紊乱性疾病之一,其病因复杂,以严重的健康损害为特征。该病主要内分泌紊乱为高雄激素与胰岛素抵抗,伴有不同程度的生殖和代谢异常,这皆由多种遗传和环境因素相互作用所致,具体发病机制尚不清楚。炎症学说是当今国内外的一个研究热点,因此,对PCOS的发病机制进行研究有利于发展一些新的治疗方法和预防措施。

唯支持细胞综合征患者睾丸组织Boule基因5'调控序列甲基化分析

目的:探讨唯支持细胞综合征(SCOS)患者睾丸组织中Boule基因5'调控序列甲基化状态。方法:收集梗阻性无精子症患者(12例)和SCOS无精子患者(15例)睾丸组织穿刺标本,门诊检查排除精索静脉曲张、隐睾、感染等疾病。试剂盒法提取患者睾丸组织基因组DNA,利用生物信息学方法分析Boule基因5'调控序列的序列特征,采用亚硫酸氢钠测序法检测睾丸组织中Boule基因甲基化状态。结果:Boule基因5'调控区存在一个Cp G岛,SCOS患者Boule基因的甲基化水平(61.4%)显著高于梗阻性无精子症患者(21.7%)(P<0.01),共14个Cp G位点甲基化有显著性差异,分别为-58 bp、-50 bp、-48 bp、-38 bp、-28 bp、-24 bp、-20 bp、-15 bp、-1 bp、+5 bp、+8 bp、+15 bp、+29 bp和+58 bp。结论:SCOS患者Boule基因的甲基化水平显著高于梗阻性无精子症患者,推测这种甲基化变化可能与精子发生障碍有关。

单卵裂期胚胎移植在体外受精-胚胎移植中的临床结局

目的探讨体外受精第3天(D3)单卵裂期胚胎移植在体外受精-胚胎移植中的临床应用前景。方法回顾性分析我院体外受精D3单卵裂期胚胎移植临床结局,收集172个新鲜胚胎移植周期,观察原发不育组和继发不育组、D3移植胚胎细胞数及评级、主动性单卵裂期胚胎移植及被动性单卵裂期胚胎移植与临床妊娠的关系。结果继发不育组女方年龄高于原发不育组,临床妊娠率(胚胎种植率)分别为33.63%、23.73%。D3移植胚胎的细胞数在8细胞以上者妊娠率与细胞数不足7细胞者相比有统计学差异(P<0.01)。主动性单卵裂期胚胎移植组虽然年龄和不育年限高于被动性单卵裂期胚胎移植组,但移植胚胎质量及妊娠率明显高于后者(P<0.01)。被动性单卵裂期胚胎移植组中各年龄段患者的移植胚胎质量没有显著性差异,但年龄低于35岁者有较好的妊娠结局。结论体外受精D3单卵裂期胚胎移植能获得良好的妊娠结果,临床妊娠结局主要与移植胚胎所含细胞数及评分密切相关。其次,年龄不足35岁,不育年限短的不育患者有更好的妊娠结局。

海水淹溺40例救治体会

海水淹溺是海难的主要死亡原因，常发生于航海事故、海上作业等，是意外伤害致死的第二大原因。我院1997年1月至2013年2月共收治海水淹溺患者40例，现将救治体会报道如下：

小鼠胚胎成纤维细胞制备方法对比

目的建立稳定高效的小鼠胚胎成纤维细胞的分离和培养途径。方法通过促排和自然受孕两种方式获得鼠胚,使用不同胎龄的鼠胚分离胚胎成纤维细胞,观察不同来源对小鼠胚胎成纤维细胞分离和培养的影响;不同来源的胚胎成纤维细胞经丝裂霉素处理后,观察其对胚胎干细胞状态的维持。结果在实验室条件下,促排和自然受孕来源的鼠胚均可以分离得到胚胎成纤维细胞,但是相同胎龄下,促排组可以获得数目较多的原代胚胎成纤维细胞,其中13.5 d鼠胚的胚胎成纤维细胞分离效果优于其他胎龄;促排和自然受孕来源的13.5 d鼠胚获得饲养层细胞均可以维持小鼠胚胎干细胞发育成典型的"鸟巢"状干细胞集落,进行10代以上的传代和培养。结论经由促排获得13.5 d胎龄鼠胚分离培养胚胎成纤维细胞效果最好,可以作为饲养层用于胚胎干细胞的培养。

两种硫辛酸对映体对胚胎体外发育的影响

目的探讨(R)-硫辛酸和(S)-硫辛酸对胚胎体外发育的影响。方法解冻复苏卵裂期胚胎,分别在含不同浓度(R)-硫辛酸和(S)-硫辛酸的GⅡ培养基微滴中培养,观察各组的桑胚率、致密化率、囊胚率和优质囊胚率。结果硫辛酸可提高胚胎体外发育率,(R)-硫辛酸浓度10×10-9mol/m3组桑胚率、致密化率、囊胚率和优质囊胚率分别达到了59.2%,55.1%,49.0%和54.2%,均高于其他浓度组(P<0.01)。(R)-硫辛酸浓度10×10-9mol/m3组的桑胚率、致密化率和优质胚胎率均高于(S)-硫辛酸10×10-9mol/m3组(P<0.05)。结论硫辛酸对胚胎体外发育具有促进作用,特别是对桑胚率和囊胚率具有显著的影响。(R)-硫辛酸10×10-9mol/m3组的效果最好。

改良单细胞核固定和荧光原位杂交技术在卵裂期胚胎性别诊断中的应用

目的建立一种快速便捷的单细胞核固定和荧光原位杂交(FISH)检测技术用于性别筛选,探究其可行性,同时分析植入前胚胎中非整倍体和嵌合体的发生情况。方法解冻12位患者32枚胚胎,同时选择同期常规冻融胚胎移植周期23位患者51枚胚胎为囊胚培养对照组。激光打孔法活检卵裂期胚胎,每枚胚胎常规活检吸取2个卵裂球,活检后胚胎继续培养囊胚。改良吐温-20/HCl法游离和固定卵裂球细胞核,XY染色体计数探针和18号染色体计数探针同时孵育后荧光镜下观察结果。结果 32枚胚胎中,X、Y和18号染色体正常胚胎24枚,正常率75%;异常胚胎8枚,其中6例为嵌合体胚胎,嵌合体率18.8%。活检组与囊胚培养对照组的囊胚形成率和优质囊胚率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论本实验所建立的改良单细胞核固定和FISH技术能够快速有效地对卵裂期胚胎进行性别选择,对解决性染色体异常和性连锁性疾病性别诊断的生育障碍有一定价值。

糖尿病眼部并发症观察

糖尿病眼部并发症观察河北秦皇岛市北戴河医院（０６６１００）王乃辉杨冬玲糖尿病在内科临床日趋严重，如果不能及早的正确治疗，多种并发症将随之发生，其中眼部并发症发生率高，致盲率亦高，必须引起高度重视。本文收集６０例Ⅱ型糖尿病患者，其中３０例同时伴有高血压...

郊区农村中学生HBV感染的调查分析

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒引起的传染病,主要是通过消化道和血液传播。为了保证中学生身体健康,为了摸清乙型肝炎在中学生的传播情况,我们对区内二所中学部分学生进行了肝功能检查,结果显示在中学生中做好乙肝预防工作,有着极其重要的意义。现将检查结果分析报告如下。 调查对象和方法 一。

诊断超声对人早孕绒毛组织的影响

目的探讨诊断级B超对人胚胎发育的安全性。方法取120名孕6～8周拟行人工流产术的孕妇,随机分成正常对照组(Ⅰ组)、辐照5min(Ⅱ组)、10min(Ⅲ组)、20min(Ⅳ组)、30min(Ⅴ组)于1h内取绒毛,超声辐照30min(Ⅵ组)于7～10d后取绒毛。检测绒毛的生物化学变化。结果诊断剂量超声辐照20min可致人体宫内绒毛发生生物化学变化。丙二醛(MDA)值随超声剂量增加而升高(pⅠ-Ⅲ>0.05,PⅠ.Ⅳ<0.01,PⅠ-Ⅴ<0.01),而超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活性随超声辐照剂量增加而下降(PⅠ-Ⅲ>0.05,PⅠ-Ⅳ<0.01,PⅠ-Ⅴ<0.01)。对照组与Ⅵ组比较P>0.05,提示损伤作用是可复性的。结论诊断超声辐照时间20min以上时对绒毛可造成潜在危害。

胰岛素样生长因子诱导人肺成纤维细胞增殖和分化

目的 探讨胰岛素一号增长因子（IGF-Ⅰ）对人肺成纤维细胞（HLF）的增殖和分化的影响及其作用机制.方法 采用浓度为1 00 ng/ml的IGF-Ⅰ单独处理细胞96 h或用浓度为100 ng/ml的IGF-Ⅰ和浓度为3μM、5 μM和10μM的LY294002共同处理细胞96h;MTT法检测细胞增殖;western blot法检测α-SMA、PI3K、Akt和p-Akt的表达量;试剂盒检测胶原蛋白含量.结果 IGF-Ⅰ单独处理可促进细胞增殖（P＜0.05）,上调胶原蛋白和α-SMA的表达（p＜0.05）,活化PI3 K/Akt信号通路;IGF-Ⅰ和LY294002共同处理后,IGF-Ⅰ促细胞增殖的作用、对胶原蛋白和α-SMA表达的促进作用及对PI3K/Akt信号通路的活化作用均可被LY294002抑制.结论 IGF-Ⅰ可通过PI3K/Akt信号通路促进HLF的增殖与分化.

N6-甲基腺苷修饰在卵母细胞发育过程中作用机制的研究进展

N6-甲基腺苷(m^(6)A)修饰是真核生物RNA中最普遍的一种表观遗传修饰,以一种动态、可逆的方式调节细胞内mRNA的甲基化水平。它由甲基转移酶、去甲基酶和甲基结合蛋白动态可逆调节。m^(6)A修饰在哺乳动物的配子发生、合子形成及胚胎发育过程中都表现出重要的调控作用。本文主要就m^(6)A甲基转移酶、去甲基酶和甲基结合蛋白各组成成员在卵母细胞发育过程中所起的作用及作用机制进行综述。