枸橼酸氢钾钠颗粒与八正散对小鼠三聚氰胺中毒模型的治疗效果

【目的】观察八正散(bazheng powder,BZP)和枸橼酸氢钾钠颗粒(potassium sodium hydrogen citrate,PSHC)单独或联合用药对三聚氰胺中毒小鼠模型的治疗效果,为三聚氰胺中毒的临床治疗提供参考。【方法】以1 500mg/kg三聚氰胺连续15或30d对小鼠灌胃0.4mL/(只.d),构建小鼠三聚氰胺中毒模型,然后将其分成生理盐水对照组和药物治疗组,用质量浓度为1.12,0.56,0.28g/mL的BZP和含量为1.44,0.72,0.36g/kg的PSHC单独或联合治疗,每天1次,灌胃量0.4mL/(只.d),7和15d后测定血清肌酐(CRE)、尿素氮(BUN)和尿酸(UA)浓度,治疗15d后处死小鼠,取肾脏称质量,计算肾脏系数。【结果】治疗7d后,治疗组血清指标CRE、BUN、UA值均比对照组低;与治疗7d相比,治疗15d时,CRE、BUN、UA值进一步降低,且仍低于对照组。除0.56g/mL BZP+0.72g/kg PSHC和1.44g/kg PSHC组外,其他各治疗组小鼠总肾脏系数均显著低于对照组(P<0.05)。【结论】BZP和PSHC单独或联合用药对小鼠三聚氰胺(1 500mg/kg)中毒有治疗效果。治疗7d时,0.56g/mL BZP+0.72g/kg PSHC组和0.28g/mL BZP+1.44g/kg PSHC组的联合治疗效果较好;治疗15d时,以0.28g/mL BZP组的单独治疗效果及0.28g/mL BZP+1.44g/kg PSHC和0.28g/mL BZP+0.36g/kg PSHC组的联合治疗效果较好。

中国仓鼠卵巢细胞和人胚肾T细胞骨架及其迁移特性的比较

【目的】比较中国仓鼠卵巢(CHO)细胞和人胚肾T(HEK293T)细胞的迁移能力,筛选适用于细胞骨架形态和外源基因对细胞迁移影响研究的细胞系。【方法】通过免疫荧光组织化学比较CHO和HEK293T细胞骨架的形态差异,通过延时成像和划痕试验比较细胞迁移能力,通过免疫印迹比较2株细胞系细胞骨架基因的相对表达,并从细胞骨架差异和结构基因的选择性表达方面解释细胞迁移能力的差异。【结果】CHO和HEK293T细胞系的细胞骨架在形态上存在较大差异,HEK293T细胞系的核质比是CHO细胞的2.25倍;CHO细胞比HEK293T细胞的迁移能力强,是HEK293T细胞的2.9倍;2种细胞内α-Tubulin/β-Actin的比率存在较大差异,CHO是HEK293T的1.2倍。【结论】细胞中微管微丝的差异性分布及结构基因Tubulin和Actin的选择性表达是细胞迁移特性不同的关键因素。CHO细胞适用于涉及细胞骨架形态和外源基因对细胞迁移影响的研究,HEK293T细胞不适用于此类研究。

鹿茸对小鼠脑组织抗氧化指标和凋亡相关蛋白表达的影响

【目的】研究鹿茸对小鼠脑组织抗氧化指标和凋亡相关蛋白表达的影响,为鹿茸的抗氧化和抗凋亡作用研究提供资料。【方法】选用48只6周龄雌性昆明小鼠,随机分为正常组(灌胃生理盐水,n=12)和高、中、低剂量鹿茸冻干粉组(分别灌胃鹿茸冻干粉1,3和5g/kg,n=12)。各组分别灌胃63d,第64天处死小鼠并取材。用试剂盒检测小鼠脑组织匀浆液中单胺氧化酶(Monoamine oxidase,MAO)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)的活性和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的含量,并采用免疫组化观察小鼠大脑皮层促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达情况。【结果】鹿茸冻干粉高剂量组MAO活性极显著低于对照组和中、低剂量组(P<0.01),鹿茸冻干粉中剂量组MAO活性极显著低于对照组和低剂量组(P<0.01);鹿茸冻干粉高剂量组GSH-Px活性极显著高于对照组和中、低剂量组(P<0.01);鹿茸冻干粉高剂量组Bcl-2蛋白表达量极显著高于对照组和中、低剂量组(P<0.01),鹿茸冻干粉低剂量组Bcl-2与Bax表达量的比值显著低于对照组和高、中剂量组(P<0.05)。【结论】高剂量(5g/kg)鹿茸能提高机体抗氧化酶SOD和GSH-Px活性,降低MAO活性和脂质过氧化物MDA含量,增加抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,具有增强机体抵抗生化损伤、清除体内脂质过氧化物、抗凋亡的作用。

丙烯酰胺对小鼠成体神经发生及GSK3β表达的影响

目的:探讨和研究丙烯酰胺对成年小鼠海马成体神经发生及GSK3β表达的影响。方法:雄性成年昆明小鼠分为丙烯酰胺处理组和生理盐水对照组,通过腹腔注射(i.p.)进行丙烯酰胺染毒,用Brd U标记和免疫组织化学方法研究齿状回神经干细胞的增殖,Brd U/Neu N/GFAP三标的方法研究齿状回神经干细胞的存活和分化,Neuro-2a细胞中观察GSK3β表达与分布,用Western blot方法检测小鼠海马中GSK3β的表达。结果:丙烯酰胺处理组小鼠齿状回亚颗粒细胞层(SGZ)中的Brd U阳性细胞数量显著低于对照组,并且新生细胞向神经元分化的数量显著降低。丙烯酰胺处理小鼠SGZ区新生干细胞的存活率显著低于对照小鼠,另外,丙烯酰胺组新生干细胞向胶质细胞分化的比例显著升高。在Neuro-2a细胞中磷酸化的GSK3β表达量极显著升高,但在丙烯酰胺处理组小鼠的海马中磷酸化的GSK3β显著降低。结论:结果表明,丙烯酰胺能显著抑制小鼠齿状回成体神经干细胞增殖,降低新生干细胞的存活率并影响其分化,丙烯酰胺抑制小鼠成体神经发生可能与GSK3β有一定的关系。

丙烯酰胺对小鼠成体神经发生及增殖相关基因的影响

【目的】探讨丙烯酰胺对成年小鼠海马成体神经发生及增殖相关基因的影响,为了解丙烯酰胺的毒性机理提供参考。【方法】将20只10周龄雄性成年昆白小鼠(体质量(30±2)g/只),随机均分为丙烯酰胺染毒组和生理盐水对照组,丙烯酰胺染毒组通过腹腔注射丙烯酰胺进行染毒,注射剂量为50mg/kg,连续注射14d,第15天注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU,50mg/kg,2次/d,共3d),观察2组小鼠体质量及行为活动的变化。用BrdU标记和免疫组织化学染色方法分析丙烯酰胺染毒对小鼠齿状回神经干细胞数量的影响,用RT-PCR法研究丙烯酰胺对小鼠海马增殖相关基因JNK3、Akt1、Gsk-3β、RhoA和Rac1mRNA表达的影响。【结果】丙烯酰胺染毒组小鼠体质量极显著低于对照组,精神萎靡、后肢无力,走路时后肢偶成劈叉姿势;与对照组相比,丙烯酰胺染毒组小鼠齿状回亚颗粒细胞层中的BrdU阳性细胞数量极显著降低(P<0.01),海马组织中JNK3和Rac1的mRNA表达量显著升高(P<0.05),Akt1、Gsk-3β和RhoA的mRNA表达量极显著升高(P<0.01)。【结论】丙烯酰胺中毒能显著抑制小鼠齿状回中成体神经干细胞增殖,可使海马组织中增殖相关基因JNK3、Akt1、Gsk-3β、Rac1和RhoA的表达量发生明显变化。

国内石英砂支撑剂评价及砂源本地化研究进展与前景展望

为了实现中国非常规油气开采成本的进一步降低,系统地梳理了近年来北美地区压裂支撑剂发展变化趋势,明确了国内外储层改造支撑剂的新进展,总结了国内外储层改造支撑剂使用理念的差距。在此基础上,结合中国非常规储层开发特点及当前形势,评价了中国六大主要砂源地石英砂品质,开展了石英砂应用可行性基础理论研究,挖掘了中国石英砂砂源本地化的潜能,最后论证了重点油气区块石英砂推广生产效果及经济性。研究表明:国内石英砂破碎等级可达4K、5K(对应压力为28MPa、35MPa),品质与北美地区通用黄砂相当,修订中国石英砂破碎率测试标准,拓展了石英砂应用范围;提出以经济导流能力为目标的压裂支撑剂优选原则,通过开展支撑剂有效受力分析,揭示了水平井体积压裂下支撑剂受力仅为传统的50%~60%;推广石英砂现场试验应用,石英砂用量由2015年的65×10^(4)t提高到2019年的275×10^(4)t,年节约成本达到20亿元以上;同时开展了中国准噶尔、鄂尔多斯和四川三大盆地石英砂本地化砂源评价及自主砂厂建设,目前产能已达150×10^(4)t/a,为非常规油气进一步大幅度降本增效奠定资源基础;结合未来7年内中国石油天然气集团有限公司(简称中国石油)改造井次与支撑剂用量,以页岩气为例,若采用石英砂替代陶粒,投资有望降到60亿元以内,降幅超40%。

北美后页岩革命时代带来的启示

2014年国际油价暴跌并持续低位运行,2016年开始北美迎来了主要从事页岩油气开发能源公司的倒闭潮。2020年6月28日美国页岩油气开发先导者Chesapeake能源公司宣布破产保护,引起了全球能源行业的高度关注。业界议论更多的是页岩油气开发能否可持续发展,甚至有人认为北美页岩油气开发可能是新的旁氏骗局。通过总结美国页岩革命的兴起、发展、成果、社会效益及其成功的原因,从多个维度对低油价导致的美国页岩油气危机进行分析,对比Chesapeake能源公司和EOG能源公司两家典型的主要从事页岩油气开发公司截然不同的发展路径和结果,总结得出当前低油价环境下页岩油气得以持续开发的基本条件为:拥有良好的油气资产,具备自身成本控制和盈利能力,保证现金流为正,控制投资风险,力图对国内非常规油气发展有一定的启示。

亚硝酸盐中毒抑制小鼠成体神经发生

雄性成年昆明小鼠分为亚硝酸盐染毒组和生理盐水对照组,通过灌胃进行亚硝酸盐染毒,用BrdU腹腔注射和免疫组织化学方法研究齿状回神经干细胞的增殖和新生细胞的存活状况,用多重免疫荧光标记研究神经干细胞的分化和迁移方向。结果显示,染毒组小鼠齿状回颗粒层中的BrdU阳性细胞数量、存活率均极显著低于对照组(P<0.01),表明亚硝酸盐中毒对小鼠新生神经干细胞的增殖和存活产生了影响。染毒组BrdU/NeuN双阳性细胞的数量极显著低于对照组(P<0.01)。与对照组相比,染毒组中神经干细胞的迁移方向无显著性差异(P>0.05)。结果表明,亚硝酸盐中毒能显著抑制小鼠神经干细胞增殖,降低新生细胞的存活率。

矮壮素对小鼠一般生殖毒性的研究

目的观察矮壮素(chlormequat chloride,CQ)对小鼠生殖功能的毒性作用。方法将144只成年无生育史清洁级ICR小鼠按体重随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组和低(20 mg/kg)、中(60 mg/kg)、高(180 mg/kg)剂量矮壮素染毒组,每组36只,雌∶雄为2∶1。采用灌胃方式进行染毒,染毒容量为0.02 ml/g,每天1次;雄鼠从交配前28 d连续染毒至交配结束,雌鼠从交配前14 d连续染毒至仔鼠断乳,仔鼠观察至断乳。测定亲代小鼠体重、相关脏器重量及其脏器系数和精子运动参数,测定断乳后子代小鼠体重、相关脏器重量及其脏器系数和出生数。结果在亲代小鼠中,与对照组比较,各剂量矮壮素染毒组雄性小鼠的体重下降(P<0.05),而雌性小鼠的体重无变化(P>0.05);高剂量矮壮素染毒组雄性小鼠的睾丸系数较高(P<0.05),各剂量矮壮素染毒组雄性小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、胃、肾脏、附睾的脏器系数无变化(P>0.05),各剂量矮壮素染毒组雌性小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、胃、肾脏、子宫、卵巢的脏器系数也无变化(P>0.05);中、高剂量矮壮素染毒组精子计数和高剂量矮壮素染毒组精子活动率较低(P<0.05)。在子代小鼠中,与对照组比较,高剂量矮壮素染毒组小鼠的出生数较低(P<0.05),中、高剂量矮壮素染毒组断乳后小鼠体重下降(P<0.05);各矮壮素染毒组小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃的脏器系数无变化(P>0.05)。结论矮壮素可能具有生殖毒性和胚胎毒性。