基于虚拟仿真实验的临床检验基础线上教学实践与效果分析

医学检验技术专业“临床检验基础”课程开展基于线上教学平台和虚拟仿真实验教学平台的线上教学,实践表明,目前虚拟临床基础检验实验室提供的示教视频、可交互实验操作及形态学图库可以基本满足大部分学生对实验操作和形态学的学习需求,能有效弥补“临床检验基础”课程线上教学的不足,可拓展应用于更多教学环节。

疫情背景下实验诊断学线上课程教学成效调查研究

目的对疫情期间临床医学生实验诊断学线上课程进行教学成效的调查与分析,为实验诊断学在线课程的优化和实现线上教学与线下教学同质等效目标提供理论依据。方法选择上海交通大学医学院2020级临床医学专业学生79名作为研究对象,其中临床医学五年制(儿科班)学生54名,4+4(硕博班)学生25名。另选择接受线下教学的2019级临床医学五年制(儿科班)学生56名和4+4(硕博班)学生25名作为对照。通过客观成绩对比分析、主观感受调查问卷两方面对学情、学习质量和教学满意度进行评估和反馈。结果2020级儿科班学生实验诊断学成绩高于2019级,但差异无统计学意义(P>0.05);2020级硕博班学生实验诊断学成绩较2019级有所下降,差异有统计学意义(P<0.05)。44.4%的学生对实验诊断学线上教学表示非常满意,30.2%的学生表示比较满意。与线下教学比较,线上教学最重要的优势是能反复回放观看,有利于巩固知识点,但线上课程最大的缺点为缺少学习氛围,学生的学习积极性不高。结论疫情期间实验诊断学线上课程取得了较好的效果。如何优化课程体系、提高学生线上学习积极性、促进线上线下教学的深度融合、提升线上教学质量是今后努力的方向。

SYSMEX XN-1000全自动血液分析仪计数有核红细胞的准确性评价

目的探讨SYSMEX XN-1000全自动血液分析仪(简称XN-1000)计数有核红细胞(NRBC)的准确性。方法应用XN-1000对66例外周血标本进行NRBC检测,同时用流式细胞仪(FCM)和显微镜(镜检法)对同一份外周血的NRBC百分率进行计数。以镜检法为金标准,比较不同方法的计数结果。结果 XN-1000与镜检法检测NRBC有较好的相关性(r=0.927),但低于FCM与镜检法NRBC的相关性(r=0.956),XN-1000与FCM检测NRBC的相关性较高(r=0.994)。XN-1000、FCM计数结果与镜检法的结果间差异均无统计学意义(P>0.05)。XN-1000检测NRBC%较FCM法有更高的诊断特异性(95.7%)。结论 XN-1000能快速、准确、有效地自动计数外周血NRBC。

PBL教学在临床血液学检验理论教学中的应用与思考

临床血液学检验是以疾病为研究对象,基础理论与临床实践紧密结合的综合性临床学科,主要内容涉及血细胞生成（包括以红细胞、白细胞为主的形态学、生理学和病理生理学）以及来源于造血组织、出血倾向和血栓栓塞等的致病原因、发病机制、临床表现、实验室检查、其他各科所引起的血液学异常等。实验部分包含了用于临床血液学评价常用的基本技术和操作。

G6PD缺陷症基因型分析:一种新的错义突变

目的对葡萄糖-6磷-酸脱氢酶（G6PD）缺陷症患者进行G6PD基因型分析,分析基因突变类型。方法选取经G6PD活性测定确诊为G6PD缺陷症的49例患者和100名G6PD活性正常的体检者的全血标本,PCR和DNA测序法对G6PD基因外显子2~13进行序列分析。结果 49例G6PD缺陷症患者中,共发现12种错义突变,其中常见的三种为G6PD G1388A（26.5%）、G1376T（28.6%）和A95G（14.3%）,此三类基因型患者G6PD活性仅为正常人群的5%~18%。临床主要表现为新生儿黄疸、进食蚕豆后发生急性溶血性贫血等。其余突变类型包括C1024T（4.1%）、C1225T（2.0%）、C1159T（2.0%）、G487A（4.1%）、G392T（4.1%）、G1160A（6.1%）、G871A/C1311T（4.1%）和C406T/C1311T（2.0%）;在外显子7上发现了一种新的错义突变即G691C,该突变造成G6PD第231位丙氨酸（A la）被脯氨酸（Pro）替代。正常对照标本未发现相同的基因改变。结论 G6PD基因G1388A、G1376T和A95G是G6PD缺陷症患者最常见的三种突变类型。新发现的G691C突变导致A la231Pro,是引起红细胞G6PD活性降低,患者临床出现溶血症状的主要原因。

异常血红蛋白病患者血液学表型和基因型分析

目的:探讨14例异常血红蛋白(Hb)病患者的血液学和分子生物学特征,为异常Hb病的筛查提供参考数据。方法:应用高效液相色谱技术检测1 029例样本,采用缺口聚合酶链式反应技术和反向点杂交法检测中国人常见的α和β珠蛋白基因突变类型,对筛查出异常谱峰且常见地中海贫血基因阴性者的样本进行α和β珠蛋白基因DNA测序。结果:检测出14例(1.36%)共10种Hb变异体,分别为1例Hb E复合β-地中海贫血、1例Hb E复合α-地中海贫血、2例Hb G-Taipei、2例Hb Q-Thailand、2例Hb Youngstown、1例Hb Guangzhou-Hangzhou、1例Hb M-Boston、1例Hb G-Siriraj、1例Hb J-Baltimore、1例Hb J-Sicilia、1例Hb Tamano。结论:上海地区异常Hb病的发生存在一定独特性,基因种类较多。除Hb E、Hb Youngstown和Hb M-Boston外,其他类型单纯杂合子血液学表型正常,往往是在合并其他疾病时出现了溶血、贫血等症状。

网织红细胞血红蛋白含量测定对小细胞贫血分类的意义

目的:研究网织红细胞血红蛋白含量(Ret-He)在缺铁性贫血(IDA)、慢性病贫血(ACD)、ACD伴缺铁(CDID)和地中海贫血等几种小细胞低色素性贫血鉴别诊断中的意义。方法:用Sysmex XT-4000i全自动血细胞分析仪对43例IDA患者、31例ACD患者、66例CDID患者、19例地中海贫血患者及50例正常体检者的抗凝静脉血标本测定Ret-He值。结果:Ret-He均数在IDA组与其他4组间差异均有统计学意义(P<0.05),ACD组、CDID组和地中海贫血组间Ret-He差异无统计学意义(P>0.05),所有小细胞低色素性贫血组与正常对照组间Ret-He差异均有统计学意义(P<0.05)。当临界值为20.9pg时,Ret-He诊断IDA的特异度为83.7%,灵敏度为57.1%;Ret-He和血清铁蛋白(SF)的受试者操作特征曲线(ROC)下面积(AUC)分别为0.759和0.641。结论:在诊断IDA时,Ret-He可辅助可溶性转铁蛋白受体(sTfR)指标作为其诊断依据。在鉴别IDA与ACD、地中海贫血、CDID时,Ret-He可作为较重要的鉴别依据。

“临床血液学和血液学检验”教学改革的实践探究

目的:探讨四年制医学检验技术专业“临床血液学和血液学检验”教学中存在的问题并进行改革,以促进专业学科的教学与发展。方法:根据教学大纲及临床实际需求,进行教学内容、教学方式与教学手段改革和考核环节的改革,并设计调查问卷,在62名2017级医学检验技术专业学生中进行教学改革问卷调查。结果:教学内容中存在的问题包括,课程中存在陈旧检验项目、学生数量日益增多与临床标本检测供不应求的矛盾及实验课程内容不易重复;教学方式及教学手段中,存在学生学习兴趣不足的问题。根据临床需求,实验教学内容中新增新型检验项目,去除陈旧检验项目,教学方式中采用并建立仿真实验室,教学手段纳入多媒体。问卷调查显示,73.21%的学生认为课程与教学内容改革中增加的虚拟仿真实验教学延伸了传统教学的内容,提升了学生的学习兴趣、学习的积极性和能动性;69.64%的学生认为,多种教学方式联合及合理利用多媒体的教学手段能更好地提高学生对本课程的学习兴趣,并能促进学生间的交流合作;考核环节中,非卷面考核占35%,64.3%的学生认为该考核设计合理。结论:本研究针对教学中存的问题,综合4个角度进行改革,在提升学习兴趣、促进学生交流合作方面获得了较高的学生满意度评价,值得推广。

CD-_(10)的B-ALL和NHL以及CLL免疫表型检测结果分析

目的 比较急性B淋巴细胞性白血病 (B ALL) ,非霍奇金淋巴瘤 (NHL)和慢性淋巴细胞性白血病(CLL)免疫表型表达的区别。方法 采用ABC AP法结合多种B淋巴细胞相关单克隆抗体 ,对 78例初发B ALL(均为CD-10 的病例 )、2 1例初发NHL和 2 5例初发CLL患者进行免疫表型检测。结果 CD-10 的B ALL患者的白血病细胞以CD19和HLA DR呈高阳性率表达 ;NHL患者的肿瘤细胞以CD2 0 和HLA DR呈高阳性率表达 ;CLL患者的白血病细胞除CD+ 19、CD+ 2 0 、CD+ 2 2 和HLA DR+ 等B淋巴细胞相关抗体表达外 ,主要还对CD5有很高的阳性率表达。结论 利用细胞免疫表型检测 ,对于临床上症状相似而仅以细胞形态学检查无法明确诊断的急性淋巴细胞性白血病、恶性淋巴瘤或慢性淋巴细胞性白血病 ,可能起到区别细胞类型 。

红细胞膜蛋白异常与膜骨架相关溶血性贫血的发生

红细胞膜为双层磷脂结构，其间镶嵌着多种膜蛋白。这些膜蛋白包括包埋在脂质双分子层中的整合蛋白及存在于膜内侧的细胞膜骨架蛋白，而后者与红细胞膜缺陷所致的溶血关系密切。细胞膜骨架蛋白在细胞膜上形成网络结构，维持红细胞的正常形态和变形性，

高效液相色谱技术联合红细胞参数在血红蛋白病筛查中的应用

目的:探讨高效液相色谱(high performance liquid chromatography, HPLC)技术和红细胞参数在血红蛋白(hemoglobin, Hb)病筛查中的实际应用价值。方法:应用HPLC技术对1 029例临床疑似Hb病患者及进行溶血性贫血筛查者的血样本进行Hb分析,同时采用缺口聚合酶链反应、反向斑点杂交和珠蛋白基因DNA测序对样本进行基因分析;记录并分析患者的血常规红细胞参数。结果:1 029例血样本中,有591例(57.43%)确诊为珠蛋白生成障碍性贫血,14例(1.36%)确诊为异常Hb病。以基因分析结果为诊断金标准,应用HPLC检测β-珠蛋白生成障碍性贫血,以血红蛋白A_(2)(hemoglobin A_(2), HbA_(2))3.9%为临界值,HbA_(2)>3.9%诊断β-珠蛋白生成障碍性贫血的灵敏度为95.84%,特异度为96.87%,阳性预测值为95.40%,阴性预测值为97.20%,受试者操作特征曲线下面积(area under curve, AUC)为0.962;以HbA_(2)2.1%为临界值,HbA_(2)≤2.1%结合出现快速区带来诊断中间型α-珠蛋白生成障碍性贫血[又称血红蛋白H(hemoglobin H, HbH)病]的灵敏度为100.00%,特异度为96.32%,阳性预测值为52.60%,阴性预测值为100.00%,AUC为0.990;以HbA_(2)3.2%为临界值,HbA_(2)≤3.2%诊断静止型和标准型α-珠蛋白生成障碍性贫血的灵敏度为97.76%,特异度为53.11%,阳性预测值为24.0%,阴性预测值为99.4%,AUC为0.753。分别以平均红细胞体积(mean corpuscular volume, MCV)≤73.3 fl,平均红细胞血红蛋白量(mean corpuscular hemoglobin, MCH)≤23.5 pg,平均红细胞血红蛋白浓度(mean corpuscular hemoglobin contentration, MCHC)≤324 g/L诊断珠蛋白生成障碍性贫血,其灵敏度和特异度分别为87.98%和77.51%,93.73%和69.86%,89.20%和47.61%。结论:在红细胞参数测定的基础上,应用HPLC检测筛查β-珠蛋白生成障碍性贫血、HbH病和异常Hb病的灵敏度、特异度高,与基因分析结果间有较高的一致性,且操作简便、快速,适用于临床快速筛查;但对于静止型和标准型α-珠蛋白生成障碍性贫血,HPLC检测的筛查特异度和阳性预测值均较低,易造成漏诊。

1例血红蛋白M病Boston型报道及文献回顾

发绀患者,男,29岁,因血氧饱和度低(SaO289.3%)而超声心动图和胸片正常就诊。取患者的外周血进行血液学一般检查和溶血相关筛查,高效液相色谱技术(high performance liquid chromatography,HPLC)进行血红蛋白(Hb)分析;采用聚合酶链反应和反向点杂交技术检测17种中国人群常见的β-珠蛋白生成障碍性贫血基因突变和非缺失型α-珠蛋白生成障碍性贫血基因突变;采用跨越断裂点聚合酶链反应(gap-polymerase chain reaction,Gap-PCR)法结合琼脂糖凝胶电泳技术检测缺失型α-珠蛋白生成障碍性贫血基因;采用PCR和DNA测序法对α、β珠蛋白基因(HBA1、HBA2与HBB)进行序列分析。患者的血液学一般检查和其他溶血相关检查均无异常发现;HPLC结果显示存在异常Hb 8.1%(位于4.53 min处,S窗),基因分析显示α2-珠蛋白(hemoglobin A2,HBA2)基因c.175C>T,导致α珠蛋白肽链第58位的组氨酸(His)被酪氨酸(Tyr)替换,为杂合型血红蛋白M病(Hb M病)Boston型。Hb M为结构异常的Hb变异体,该异常使血红素铁稳定在氧化状态(Fe^(3+)),从而影响Hb的正常释氧功能。该病可能会与引起高铁血红蛋白血症的其他原因混淆,如红细胞高铁血红蛋白还原酶系统的遗传性改变等。该例为中国人群中罕见的Hb M病Boston型,临床呈典型终身发绀表现,预后较好,不需要治疗。

XT-4000i血液分析仪检测异型淋巴细胞的实验研究

目的通过XT-4000i血液分析仪白细胞分类检测通道(DIFF通道)检测高荧光淋巴细胞(highfluorescence lymphocytes,HFL)区域即HFL计数与人工镜检、EB病毒壳抗原(EBV-VCA)检测结果比较,探讨XT-4000i血液分析仪对异型淋巴细胞检出意义。方法 XT-4000i血液分析仪对230份标本采用DIFF通道检测HFL,与显微镜下计数异型淋巴细胞比较,并用血清作免疫酶标法检测EBV-VCA。结果 XT-4000i血液分析仪对异型淋巴细胞检出的假阳性率为13.6%,假阴性率为2%。结论 XT-4000i血液分析仪对异型淋巴细胞的检出有一定的有效性,对临床诊断效率的提高有一定帮助。

11-去氢-血栓烷B_2和11-β-前列腺素F_(2α)在糖尿病病人中变化的初探

目的:观察糖尿病（DM）病人血小板活化状态及血管内皮细胞损伤的情况。方法:采用酶免疫（EIA）竞争法分别对21名正常健康人和50例2型糖尿病（non-insulin dependent diabetes mellitus,NIDDM）病人的血浆11-去氢-血栓烷B（11-dehydro-thromboxane B2,11-DH-TXB2）及11-β-前列腺素F2α（11-β-prostaglandin F2α）的浓度进行检测,分组进行对照分析。结果:DM病人与正常对照组比较,其血浆11-DH-TXB2浓度显著增高（P<0.01）,按临床表现将病人分组后,各组间也有不同程度的差异,其中有胰岛素抵抗病人的11-DH-TXB2浓度较无胰岛素抵抗病人有明显升高（P<0.01）。而测得的11-β-PGD2α血浆浓度在正常对照组与病人各组间无统计学差异。结论:DM病人体内血小板高度活化,且与DM合并胰岛素抵抗及血管病变的发生有关;11-DH-TXB2可作为检测DM病人体内血小板活化状态的可靠指标;11-β-PGF2α血浆浓度在DM病人体内受多方面因素影响无明显改变。

血红蛋白Lepore病——附1例报告及文献复习

目的 探讨血红蛋白Lepore病 (HbLepore)的诊断、治疗及发病机理。方法 用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(PH8.7、PH6 .2 )及Hb肽链分析法检测此病 ,用皮质激素等治疗 ,同时给予切脾。结果 病人获得缓解。结论 HbLepore是一种在亚太地区罕见、临床表现较重的特殊珠蛋白生成障碍性血红蛋白病。

先天性因子Ⅶ缺乏的血液凝固调节改变

目的 研究先天性因子Ⅶ缺陷的血液凝固变化对临床出血的影响。方法 一个先天性因子Ⅶ缺乏家系23名成员的因子Ⅶ和其他凝血因子促凝活性检测,用PCR及DNA序列检测因子Ⅶ基因缺陷,并分析各自临床出血状况。结果 家系中,因子Ⅶ缺乏伴有FⅫ:C下降或FⅩ:C增高的,无明显出血现象;而FⅫ:C正常或FⅩ:C正常的则有程度不同的出血。结论 先天性因子Ⅶ缺乏发生临床出血除与因子Ⅶ:C水平有关外,还可能与FⅫ:C和FⅩ:C变化引起的凝血和纤溶活性改变有关。

遗传性凝血因子XIII缺陷症基因突变的检测

目的研究一例遗传性凝血因子XIII(FXIII)缺陷症家系的基因缺陷。方法采用PCR、核苷酸测序的方法对该家系先证者及其家属外周血白细胞基因组DNA的FXIIIA基因进行检测。结果先证者第72045位缺失两个核苷酸A,位于外显子5;先证者的父母及先证者的姐姐分别在DNA水平相同位点呈杂合缺失。结论这例遗传性凝血因子FXIII缺陷症是由于FXIIIA基因缺陷造成。