梅花鹿茸药材及其饮片中激素的含量测定研究

目的测定梅花鹿茸药材及其饮片中3种激素的含量,为其质量评价提供参考依据。方法采用放射免疫法测定31批梅花鹿茸药材及其饮片中3种激素的含量。结果药材中3种激素总含量由高到低的顺序为梅花鹿托盘>驯鹿药材>梅花鹿茸二杠药材>梅花鹿茸三岔、等外药材>鹿角。梅花鹿茸饮片中,蜡片的3种激素的含量最高。结论梅花鹿托盘中激素的含量最高,可以作为研究鹿茸激素产品的原材料,成本低、稳定性好,也为鹿角盘的产品开发提供了新的方向。总激素含量可作为考察鹿茸药材质量的指标之一。

梅花鹿鹿茸多糖的提取工艺优化及抗衰老的作用

目的优化提取梅花鹿鹿茸多糖的工艺,探讨鹿茸多糖的抗衰老作用及机制。方法采用正交实验法考察料液比、提取时间、提取次数对鹿茸多糖提取工艺的影响,确定最优的鹿茸多糖提取工艺,按最佳提取工艺提取鹿茸多糖。将实验动物随机分为正常对照组、衰老模型组、鹿茸多糖低(125 mg/kg)、中(250 mg/kg)、高(500 mg/kg)剂量组。给药30 d后,测定衰老小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力、过氧化氢酶(CAT)活力、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和丙二醛(MDA)含量,同时苏木素-伊红染色观察肝组织结构变化。结果优化后的梅花鹿鹿茸多糖提取率为1.6%,与正常对照组相比,衰老模型组SOD、GSH-Px、CAT活力均明显降低,MDA含量明显升高(P<0.01)。与衰老模型组相比,鹿茸多糖各剂量组SOD、CAT、GSH-Px、活力均明显升高,MDA含量均明显下降;与模型组组相比,鹿茸多糖低、中、高剂量组对衰老小鼠肝组织具有保护作用。结论鹿茸多糖的最佳提取工艺为料液比1∶15的缓冲溶液,100℃提取2 h,提取2次。鹿茸多糖对D-半乳糖诱导的衰老小鼠具有延缓衰老作用,其机制可能与清除体内自由基有关。

基于DART-MS技术的人参皂苷结构分析

目的建立一种可以对人参皂苷结构进行定性检测的方法。方法采用实时直接分析(DART)离子源结合四极杆串联飞行时间质谱(Q-TOF-MS)技术对人参皂苷结构进行分析研究。结果确定了DART离子源以氦气为载气,氦气流速2.0 L/min,氦气温度为400℃,毛细管电压为3 500 V,锥孔电压为65 V,碎裂电压150 V,对人参皂苷结构进行分析研究。结论该技术具有通用性强、耐用性好、检测灵敏度高、操作简单等特点,可以对不同的人参皂苷及人参皂苷同分异构体之间进行区分,还可以检测含有人参皂苷的样品,对该领域的进一步研究有一定的重要意义。

西洋红参炮制工艺优化的研究

目的优选出西洋红参最佳的炮制方法。方法用高效液相色谱法测定西洋红参中人参皂苷的含量,然后分别比较不同炮制工艺下西洋红参中人参皂苷Rb1、Re和Rg1的含量。结果蒸制时间、烘干温度和烘干时间三种因素对西洋红参炮制的影响大小顺序为烘干温度>蒸制时间>烘干时间。结论西洋红参炮制的最佳工艺为蒸制时间3 h,烘干温度70℃,烘干时间10 h。

HPLC法测定20批不同产地西洋参花中8种人参皂苷的含量

目的测定20批西洋参花样品中8种人参皂苷的含量。方法利用高效液相色谱法,使用C18(250 μm×4.6 μm,5 μm)分析柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速1 mL·min^-1,柱温35 ℃,检测波长203 nm。结果人参皂苷Rb1、Re、Rg1、Rg2、Rb3、Rd、Rc、Rb2质量浓度分别在0.33~2.00 μg·mL^-1 (r=0.999 5)、0.33~2.00 μg·mL^-1 (r=0.999 5)、0.30~1.80 μg·mL^-1(r=0.999 6)、0.34~1.70 μg·mL^-1 (r=0.999 6)、0.83~4.14 μg·mL^-1(r=0.999 8)、0.63~ 3.75 μg·mL^-1(r=0.999 9)、0.33~1.67 μg·mL^-1(r=0.999 8)、0.62~2.50 μg·mL^-1(r=0.999 8)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率在97.52%~101.53%,RSD≤3.0%。结果显示20批西洋参花8种皂苷含量之和大于8.673%,d=5时,20批人参样品可分为2类:吉林省产西洋参花和河北与山东省产西洋参花。结论本实验方法简单,可高效稳定的测出西洋参花中皂苷并进行比较。

人参蛋白的提取和体外免疫调节活性研究

目的提取人参蛋白,并研究其对小鼠巨噬细胞的免疫调节活性。方法采用中性盐缓冲溶液提取人参蛋白,用lowry法测定蛋白含量并利用SDS-PAGE电泳法测定人参蛋白的亚基分子量分布。以小鼠巨噬细胞RAW 264.7为模型研究人参蛋白对细胞吞噬能力的影响,刺激产生NO含量,释放PGE2、TNF-α来考察其对巨噬细胞免疫活性的影响。结果用lowry法测定人参蛋白的蛋白含量为1.95 mg/m L,人参蛋白的亚基分子量从8 kD到66 kD。结论人参蛋白可通过增强巨噬细胞吞噬能力,释放免疫因子等方面增强巨噬细胞免疫活性。

人参、鹿茸水提物配伍前后对D-半乳糖致衰老小鼠的影响

目的研究人参、鹿茸水提物(GA、PA)配伍前后对D-半乳糖致衰老小鼠的影响。方法通过腹腔注射150 mg/(kg·d)D-半乳糖建立衰老小鼠模型,同时以100 mg/(kg·d)的GA、PA、人参和鹿茸水提物配伍(GPA)灌胃。42 d后,采用试剂盒测定小鼠血清、肝、脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、还原性谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的水平;同时苏木素-伊红染色观察肝、脑组织。结果GPA能极显著提高衰老模型小鼠血清、肝、脑组织中SOD、CAT和GSH的含量(P<0.01),极显著降低MDA的含量(P<0.01)。组织切片显示,与模型组组相比,GA、PA、GPA对衰老小鼠肝、脑组织具有保护作用,且GPA效果最佳。结论GPA具有明显的抗衰老作用,且要优于GA、PA。

基于指纹图谱和多指标定量测定的鹿茸饮片质量控制研究

目的采用HPLC法建立鹿茸饮片指纹图谱,并测定核苷类成分含量,进行聚类分析与主成分分析(PCA),比较鹿茸饮片中6种核苷成分(尿嘧啶、腺嘌呤、次黄嘌呤、尿苷、肌苷和鸟苷)的差异。方法采用HPLC法对16批不同批次鹿茸饮片6种核苷类成分进行测定,运用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012版)”进行评价,并结合PCA和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)等化学计量学方法对4种饮片(蜡片、粉片、纱片和骨片)进行区分与比较。结果建立了鹿茸核苷类成分HPLC指纹图谱,相似度均达0.960以上,确定了6个共有峰(尿嘧啶、腺嘌呤、次黄嘌呤、尿苷、肌苷和鸟苷)构成鹿茸饮片的特征峰,尿嘧啶、次黄嘌呤和肌苷是差异性化合物,可作为鉴别和区分鹿茸饮片质量控制指标。结论该法所建立的鹿茸核苷类成分指纹图谱特征性强、方法简便,结合6种核苷类成分含量测定可更好控制其质量,对鹿茸饮片的鉴定及质量控制具有指导意义和参考价值。

基于微波消解-电感耦合等离子体发射光谱法对鹿茸无机元素的聚类分析

目的:建立鹿茸中无机元素的电感耦合等离子体发射光谱(ICP-OES)分析方法,比较不同产地不同品种鹿茸无机元素含量的差异,为鹿茸等级划分提供依据。方法:采用微波消解样品,利用ICP-OES测定鹿茸粉中Ca、P、Na、K、Mg、Fe、Mn、Zn、Co、Cr、Mo共11个元素的含量。结果:不同产地不同品种鹿茸无机元素种类组成无差异,但含量差异较大,其中Ca、P、Na、K、Mg为常量元素,Ca含量最高。不同产地的马鹿茸的总常量元素含量均高于梅花鹿茸的总常量元素含量。Fe、Mn、Zn、Co、Cr、Mo为必需微量元素,其中Fe含量最高,其次是Zn。结论:鹿茸无机元素的含量高低与鹿茸的品质、功能密切相关,无机元素的含量越高,说明鹿茸的骨化程度越高,Ca含量可作为考察鹿茸质量的指标之一,为鹿茸的进一步开发、应用、质量研究提供了重要的依据。

西洋参蛋白酶解工艺优化及酶解物体外抗氧化活性研究

目的研究西洋参蛋白酶解工艺及酶解物氧化活性。方法以相对分子质量分布为指标,通过正交试验确定西洋参蛋白酶解的最优工艺。采用DPPH法、水杨酸法和邻苯三酚法研究不同浓度西洋参蛋白酶解物的体外抗氧化活性。结果西洋参蛋白酶解的最优工艺为碱性蛋白酶与西洋参蛋白比(g/g)为1∶50,酶解温度为55℃,酶解p H为9.5,酶解时间为6h。酶解物对二苯基-2-苦肼自由基(DPPH)自由基清除的IC50为1.30mg/ml,对羟基自由基清除的IC_(50)为0.98 mg/ml,对超氧阴离子清除的IC50为1.43mg/ml。结论表明西洋参蛋白酶解物具有很好的体外抗氧化活性。

基于多元统计分析的梅花鹿茸饮片无机元素含量的差异性研究

目的建立梅花鹿茸饮片中无机元素的电感耦合等离子体发射光谱(ICP-OES)分析方法,比较不同产地不同品级梅花鹿茸饮片无机元素含量的差异。方法采用微波消解样品,利用ICP-OES测定梅花鹿茸饮片中Ca等共11种元素的含量。结果不同产地不同品级梅花鹿茸饮片无机元素种类组成无差异,但含量差异较大。通过元素含量测定,梅花鹿茸饮片中骨片的无机元素含量最高。通过聚类分析,将蜡片分为一类,其余饮片被聚为一类。通过主成分分析,不同产地不同品级的梅花鹿茸饮片中的粉片、沙片、骨片均有部分重叠。结论无机元素的含量越高,说明鹿茸的骨化程度越高,其质量越差,Ca元素含量可作为考察鹿茸质量的指标之一,为鹿茸的进一步开发、应用、质量研究提供了重要的依据。