补肾健脾化瘀法延缓衰老机理的实验研究回顾

根据中医理论、中西医衰老学说、临床流行病学调查及实验研究,我们认为正气虚衰是导致衰老的主要矛盾方面。但虚久必瘀,瘀又进一步促进虚衰,为此我们提出了“正虚夹瘀是衰老的主要机制,扶正化瘀法是延缓衰老的理想途径”观点,其中正虚的特点为脾胃虚衰、肾阴阳两虚偏于阳虚,肾虚是正虚的主要矛盾;瘀则包括痰浊、血瘀。正虚为因,因虚致瘀。

补肾化瘀法延缓衰老机理研究─—六味丹坤方对老年小鼠自由基代谢的影响

选用自由基代谢为指标，对比观察了补肾六味地黄汤、化瘀丹坤方及补肾化瘀六味丹坤方的延缓衰老作用。实验结果表明：（１）六味地黄汤及丹坤方均能明显增加老年小鼠红细胞ＣＡＴ的活性，增加ＮＰＳＨ的含量，减少肝脑ＭＤＡ含量，即明显改善老年小鼠的自由基代谢紊乱；丹坤方尚能明显增强老年小鼠ＳＯＤ及ＧＳＨ－Ｐｘ的活性；（２）补肾化瘀六味丹坤方的作用明显优于单纯补肾的六味地黄汤或单纯化瘀的丹坤方；（３）补肾化瘀是更为有效的延缓衰老手段，并为衰老的“正虚挟瘀”观点提供了实验证据。

八味地黄汤、丹坤方、八味丹坤方对老年小鼠自由基代谢调整作用的对比研究

目的：对比观察补肾方剂八味地黄汤、化瘀方剂丹坤方及补肾化瘀方剂八味丹坤方的延缓衰老作用。方法：老年小鼠灌胃给药，选用自由基代谢为指标。结果：八味地黄汤及丹坤方均能明显改善老年小鼠的自由基代谢。补肾化瘀八味丹坤方的作用明显优于单纯补肾的八味地黄汤或单纯化瘀的丹坤方。结论：补肾化瘀法是更为有效的延缓衰手段，并为衰老的“正虚挟瘀”观点提供了实验证据。

健脾化瘀法对老年小鼠心肝脑LPO及红细胞SOD活性的影响

为了探讨脾虚及血瘀与衰老的关系，本实验对比观察了健脾益气方、化瘀方及健脾化瘀方对老年小鼠红细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性及心肝脑过氧化脂质（ＬＰＯ）含量的影响。结果表明：（１）老年小鼠重要组织器官的过氧化脂质明显增多，清除超氧离子自由基的能力显著下降。（２）健脾益气方及化瘀方均可明显改善老年小鼠自由基代谢，增强其清除自由基能力，减少对机体的损伤，其中健脾方的作用优于化瘀方。（３）健脾化瘀方可明显改善老年小鼠的自由基代谢，其作用明显优于单纯健脾方和化瘀方。

马齿苋的食养食疗应用

马齿苋俗称马蜂菜，也叫长命菜、长寿菜，是夏秋季节长在田间地头的、在我国许多地区被人们广泛食用的野菜，唐朝孟诜的《食疗本草》中就有马齿苋“煮粥，止痢及疳痢，治腹痛”的食疗应用记载。马齿苋还是一味比较常用的中药材，最早记载于《本草经集注》（约公元480—498年前成书，是南北朝梁代陶弘景所编著），至少已使用了1500年。中医认为，马齿苋性寒、味甘酸，人心、肝、

补虚抗老方药的免疫调节途径

衰老是一个复杂的生物学过程。祖国医学认为正气虚衰是衰老的基本原因。大量研究亦表明,补益肾气和调补脾胃(或气血)对延缓和恢复免疫衰老具有显著作用。有关补虚抗老方药对免疫功能作用已有大量报道,并从免疫系统的不同水平,不同环节进行了探讨。到目前为止。

脂蟾毒配基通过线粒体途径诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡的研究

目的:探讨中药蟾酥主要成份之一脂蟾毒配基(Resibufogenin,RG)诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡的作用机制。方法:体外培养Bel-7402细胞,采用酸性磷酸酶法检测RG对细胞增殖抑制作用;吖啶橙荧光染色观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率及线粒体膜电位(△ψm)变化;WesternBlot检测与细胞凋亡相关蛋白表达的变化。结果:RG显著抑制细胞增殖,其作用24、48、72h的IC50分别为3.8、1.8、1.2"mol/L;经10"mol/LRG处理24h后,癌细胞出现凋亡的形态变化,其凋亡率明显高于对照组细胞;RG引起△ψm下降,释放入胞质中的细胞色素c(cytochromec,CytC)增多,促进Caspase-3蛋白活化,抑制Bcl-2蛋白表达,诱导细胞凋亡。结论:RG诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡,其诱导凋亡作用可能通过线粒体通路实现。

补肾化瘀方药调整免疫衰老的机理研究

本实验从三方面研究八味丹坤汤调整免疫衰老与改善自由基代谢的关系。结果表明老年小鼠白细胞介素２（ＩＬ－２）产生降低，过氧化脂质（ＬＰＯ）含量增加、过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性下降。给药后上述指标均得到调整。臭氧吸入小鼠的上述指标出现类似衰老的变化。给药后，ＬＰＯ含量降低，同时ＣＡＴ和ＩＬ－２活性得到增强，且两者呈线性相关。在脾淋巴细胞培养液中加入过氧化氢（Ｈ２Ｏ２），发现可使淋巴细胞ＩＬ－２产生明显减少，同时加入该方提取物，ＩＬ－２产生又恢复到未加Ｈ２Ｏ２的对照组水平。研究提示补肾化瘀方药调整免疫衰老与改善自由基代谢密切相关，且为“正虚夹瘀是衰老的主要机制”的观点提供了部分依据。

正虚挟瘀是衰老的主要机制

中医认为脏腑虚损是衰老的主要原因,脾肾两虚是正气亏损的主要方面,由虚致瘀,瘀进一步促进虚损,相互影响,加速衰老过程,因此瘀是加速衰老的重要因素。本文从中西医衰老学说、临床实践、实验研究及流行病学调查论证了“正虚挟瘀是衰老主要机制”的观点,并从免疫衰老、自由基代谢、DNA损伤修复等方面对补肾、补肾化瘀、补肾健脾化瘀各复方进行了比较研究,初步验证了正虚挟瘀可能是衰老的主要机制。

肉苁蓉类润肠通便药效比较

对市场上常见的三种肉苁蓉类生药进行了润肠通便的药效比较,结果表明:三种肉众蓉水煎剂均有明显的促进肠蠕动、抑制大肠水份吸收和缩短排便时间的作用,作用强度相似.

脂蟾毒配基对人胃癌BGC-823细胞系细胞生长的干预效应

目的:观察中药蟾酥主要成分之一——脂蟾毒配基对体外培养人胃癌BGC-823细胞系细胞生长的干预及其与细胞色素C和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活化的关系。方法:实验于2004-09/2005-12在北京大学医学部细胞生物学系实验室完成。体外培养人胃癌BGC-823细胞系,脂蟾毒配基各组加入不同浓度的脂蟾毒配基(先用二甲基亚砜溶解,再经RPMI-1640培养液稀释至终浓度。细胞增殖及增殖抑制实验、细胞核形态观察及核DNA含量测定实验中脂蟾毒配基浓度分别为0.1,1,10μmol/L;细胞周期分布实验、细胞凋亡率实验、线粒体膜电位实验中脂蟾毒配基浓度分别为0,1,2.5,5μmol/L)。空白对照组加入RPMI-1640培养液。盐酸阿克拉霉素组加入5μmol/L盐酸阿克拉霉素。采用酸性磷酸酶法检测细胞增殖抑制作用;细胞荧光分光光度仪观察细胞核形态及核DNA含量测定;流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率及其线粒体膜电位变化;Westernblot检测与细胞凋亡相关基因蛋白表达的变化。结果:①经0.1,1,10μmol/L脂蟾毒配基分别作用24,48,72h后,细胞生长显著抑制,脂蟾毒配基对癌细胞的生长抑制百分率与剂量、时间呈正相关,其IC50分别为3.9,2.0,1.5μmol/L。②随脂蟾毒配基作用浓度和时间的延长,癌细胞核荧光强度减弱,细胞核DNA含量明显降低。③0.1,1μmol/L脂蟾毒配基作用24～48h后癌细胞阻滞在S期,5μmol/L脂蟾毒配基作用72h时,细胞阻滞在G2+M期;盐酸阿克拉霉素与癌细胞作用24～48h,细胞阻滞在S期,作用72h时细胞阻滞在G2+M期。④脂蟾毒配基作用后,细胞凋亡率明显高于对照组。⑤脂蟾毒配基引起细胞线粒体膜电位下降,释放入胞质中的细胞色素C增多,促进半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白活化,抑制Bcl-2蛋白表达,诱导细胞凋亡。结论:体外实验条件下,脂蟾毒配基抑制人胃癌BGC-823细胞生长并诱导细胞发生凋亡,其诱导凋亡作用机制与线粒体通路有关。

苁蓉总苷对氢化可的松致肾阳虚小鼠学习记忆功能的影响

目的观察苁蓉总苷对氢化可的松所致肾阳虚模型小鼠学习记忆障碍的影响。方法连续灌胃给予苁蓉总苷30d,于实验的第11～18天灌胃氢化可的松(正常对照组除外)复制肾阳虚模型,观察记录小鼠的一般状态及死亡情况,使用跳台法观察小鼠的学习记忆功能。结果(1)苁蓉总苷各剂量组少动、竖毛、少食、少饮、颤抖等阳虚症状均有明显改善,动物死亡数明显减少。(2)苁蓉总苷各剂量组在给予氢化可的松后,各动物的跳台潜伏期明显延长,5min内的错误次数明显减少。结论苁蓉总苷能明显改善氢化可的松致阳虚小鼠的一般状况及学习记忆功能障碍,并能明显降低小鼠的死亡率。

扶正化瘀复方康寿饮延缓衰老的研究回顾

扶正化瘀复方康寿饮延缓衰老的研究回顾李顺成，蒋文跃，王传社，李志新，王玉明，李燕燕历代医家及近年来研究均认为脏腑虚损尤其是脾肾两虚与衰老密切相关。但我们认为虚久必瘀，瘀又进一步促进虚损，虚与瘀相互影响加速衰老进程。为此我们提出了“正虚挟瘀是衰老的主要...

苁蓉总苷对小鼠学习记忆障碍的影响

目的观察苁蓉总苷对东莨菪碱所致的小鼠学习记忆获得障碍及亚硝酸钠所致小鼠学习记忆巩固障碍的影响。方法使用跳台法观察小鼠的学习记忆功能。连续灌胃给予苁蓉总苷30d,于实验的第29天训练,第30天测试,记录各动物的首次跳台潜伏期及5min内的错误次数。东莨菪碱模型于训练前15min腹腔注射东莨菪碱,而亚硝酸钠模型于训练后立即皮下注射亚硝酸钠。结果与东莨菪碱模型组比较,苁蓉总苷400、200mg/kg组及脑复康组潜伏期均明显延长,错误次数明显减少;苁蓉总苷100mg/kg组潜伏期亦明显延长,但错误次数只有一定程度的减少。与亚硝酸钠模型组比较,苁蓉总苷400、200mg/kg组潜伏期均明显延长,错误次数有一定程度的减少,但无统计学意义;苁蓉总苷100mg/kg组潜伏期及错误次数只有一定程度的改善;脑复康组潜伏期明显延长,错误次数显著减少。结论苁蓉总苷对东莨菪碱所致的小鼠学习记忆获得障碍及亚硝酸钠所致小鼠学习记忆巩固障碍均有明显的改善作用。

六味丹坤方改善老年小鼠DNA损伤及其修复能力的观察

本文应用ＦＡＤＵ法从ＤＮＡ的自然损伤、抗损伤能力及损伤后的修复能力方面观察了补肾化瘀方药六味丹坤对老年小鼠脾淋巴细胞ＤＮＡ结构完整性的影响。实验表明：（１）老年小鼠ＤＮＡ损伤较青年组严重，用药后改善。（２）１０Ｇｙ６０Ｃｏ 射线照射后，老年小鼠辐射抗性较青年组低，用药后可以增强其对辐射的抗性。（３）照射后温育６０分钟结果显示，老年小鼠修复ＤＮＡ损伤能力有所下降，给药后有一定程度的提高。