我国病理技术学的发展

病理技术学实际上是将医学或生命科学领域的多学科技术融合发展后与传统病理技术相结合,或者将其他学科的理论和技术应用于病理学,从而产生了病理技术学,是一个集传统病理技术和现代病理技术大成的学科。随着我国科学技术的进展,可以预见病理技术学也将有一个更快、更好的发展。

新技术、新方法在病理学中的应用

随着科学技术的发展，新技术、新方法层出不穷，许多新的技术和方法已广泛应用于医学各领域，如用于肿瘤基因表达谱分析的基因芯片技术、分层表达扫描（layeredexpressionscanning，LES）分析技术等。本文简要介绍显色原位杂交和荧光原位杂交技术、基因芯片技术、生物信息学技术、多光谱成像技术以及分子成像技术在病理学领域的应用。

固定对IgG抗原活性的影响

免疫组织化学染色（ＩＣＳ）以其突出的优点，已广泛用于病理学诊断、鉴别诊断及相关学科的研究之中〔１，２〕，其染色成功与否和抗原性的妥善保存极为重要。影响石蜡切片中抗原性的主要因素有固定、制片、ＩＣＳ中的封闭内源酶、抗原修复或暴露、组织存档时间等〔３～５...

人肝癌细胞内HBV DNA和HB_sAg的分布及意义

用原位分子杂交和免疫组化技术双标记方法,在31例人肝细胞癌(HCC)的石蜡切片中检测HBV DNA和HBsAg。在31例HCC中,20例(64.5％)HBV DNA阳性,14例(45.2％)HBsAg阳性,8例(25.8％)HBV DNA和HBsAg两者同时阳性。HBV DNA主要分布于癌细胞的胞浆内(20例),也见于胞核内(16例)及核浆内(16例)。此结果表明,HCC的发生与HBV感染有密切关系。

激光捕获显微切割技术新进展

激光捕获显微切割是一种先进的分离特定同质细胞群进行进一步研究的技术,尤其是在需要研究的细胞占样本细胞数很少时,以及需研究的细胞呈散在分布时,激光捕获显微切割的重要性尤为明显。与免疫组织化学、原位杂交技术、高通量基因分析、蛋白分析技术结合,显微切割技术显示出良好的发展前景。本文简述激光捕获显微切割的基本原理、应用以及可能的发展趋势。

同位素标记探针原位杂交与免疫组化法结合——在肝石蜡切片上同时检测HBV-DNA和HBsAg

原位分子杂交法是近年来发展较快的又一新技术,已被广泛地应用于检测细胞或组织切片中病毒基因和肿瘤基因.1984年Blum等首次报道了把原位杂交技术与免疫组织化学方法相结合应用~3H标记探针在肝石蜡切片上同时检测乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)和乙型肝炎核心抗原(NBcAg).从而使在同一组织切片上观察病毒及其表达产物的定位和分布关系成为可能.目前尚未见到其它类似的报道.

DPX封片胶在牙组织免疫组化染色防脱片中的作用

目的:研究DPX封片胶在牙组织免疫组化染色中的防脱片效果。方法:狗上前牙EDTA脱钙、常规石蜡包埋、切片、脱蜡、水洗、干燥后,用DPX封片胶在组织边缘和玻片上涂抹一圈,37℃烤干DPX封片胶,EnVision技术观察IL-1、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、MMP-9的表达。结果:DPX封片胶处理后的切片,经微波抗原修复后,切片上的组织完整没有边缘脱落破损现象。免疫组化染色后,组织形态基本完整,相应分子表达定位准确,染色结果清晰。结论:DPX封片胶在牙齿等含钙组织免疫组化染色中有良好的防脱片作用。

人巨细胞病毒感染的霍奇金淋巴瘤中p53基因突变分析

目的 :检测人巨细胞病毒 (HCMV)感染的霍奇金淋巴瘤 (HL)中是否存在 p5 3基因突变热点区的基因突变。 方法 :从经原位杂交、免疫组化、显微切割等方法证实存在人巨细胞病毒感染的霍奇金淋巴瘤石蜡标本中提取DNA ,采用PCR SSCP和核酸测序方法对p5 3基因突变热点区的外显子进行基因突变检测。结果 :应用p5 3外显子 5、6、7、8的相应引物 ,对 10例HCMV阳性的HL组织中DNA进行PCR扩增 ,产物经电泳检测 ,分别扩增出特异的条带 ,SSCP分析未见异常的迁移带 ,ex on 8外显子核酸测序未见有碱基突变。结论 :p5

牙龈中基膜联接蛋白、Ⅶ型胶原的分布和意义

应用免疫组化方法检测了6例正常人才龈,青春期龈炎8例,成人牙周炎8例,青少年牙周炎7例,龈组织中基膜联接蛋白和Ⅶ型胶原的存在、分布和变化情况,并进行了定量分析。结果发现炎症龈中基膜联接蛋白和Ⅶ型胶原在基底膜的厚度较正常组有显著增加。首次证明了Ⅶ型胶原在口腔中的分布;同时发现基膜联接蛋白可作为良好的血管标记物用以观察血管形态、结构等方面的变化。

应用Photoshop软件合成FISH HER-2多色荧光图像

人类表皮生长因子受体-2（HER-2/neu,erbB-2）是一种相对分子质量185 kDa的跨膜受体,在25%～30%的原发性乳腺癌中HER-2/neu基因过表达。赫塞丁（Herceptin）是一种重组DNA衍生的人源化抗p185HER2嵌合抗体,可特异性结合p185HER2。由于赫塞丁治疗是以HER-2为靶点的靶向性治疗,因此只有HER-2过表达的患者应用该药才可能有效[1-3]。

肝硬变组织内HBV DNA和HBsAg的分布及意义

作者用原位杂交和免疫组织化学PAP法双标记,在51例人肝硬变石蜡组织切片中检测HBV DNA和HBsAg.共检出HBV DNA 21例(41.2％),HBsAg 43例(84.3％),二者同时检出共19例(37.3％).HBVDNA阳性颗粒主要分布于肝细胞的胞浆或同时分布于胞核及胞浆内,少数仅位于核内或沿胞膜内侧分布.51例肝硬变患者中,活动性肝硬变与静止性肝硬变组织中HBV DNA的阳性检出率分别为52.8％和13.3％,HBV DNA和HBsAg二者均阳性的检出率分别为47.2％和13.3％,均以活动性肝硬变为高(P<0.05).结果说明,HBV的感染以及HBV DNA在肝组织中的存在和持续活动是肝硬变发生发展的重要因素之一.

原癌基因c-erbB-1和c-erbB-2在人脑胶质瘤中的表达

目的：探讨原癌基因c－erbB－1和c－erbB－2表达与人脑胶质瘤发生发展的关系．方法：采用免疫组化SABC法检测52例人脑胶质瘤，2株人脑胶质瘤细胞系及8例正常人脑组织中c－erbB－1和c－erbB－2蛋白的表达．结果：c－erbB－1蛋白在Ⅰ～Ⅳ级胶质瘤组织中阳性率分别为50．0％，68．8％，81．8％和92．3％，低恶性度（Ⅰ～Ⅱ级）胶质瘤（60．7％）和高恶性度（Ⅲ～Ⅳ级）胶质瘤（87．5％）间阳性率差异显著（P＜0．05）；c－erbB－2蛋白在Ⅰ～Ⅳ级胶质瘤组织中阳性率分别为75．0％，87．5％，90．9％和92．3％，低恶性度胶质瘤（82．1％）和高恶性度胶质瘤（91．7％）间阳性率无显著差别（P＞0．05）；c－erbB－1和c－erbB－2表达强度均随胶质瘤恶性程度增高而增强，在高恶性度和低恶性度胶质瘤间差异均极显著（P＜0．01）；c－erbB－1和c－erbB－2在2株人脑胶质瘤细胞系中均有表达，在8例正常人脑组织中均无表达；c－erbB－1和c－erbB－2二者表达密切相关（P＜0．05）．结论：c－erbB－1和c－erbB－2在人脑胶质瘤中普遍表达，并随胶质瘤恶性程度增高而表达增强，c－erbB－1和c－erbB－2共表达可能是人脑胶质瘤发生发展过程中的重要事件．

常规石蜡切片免疫组织化学双标记染色

作者用铁蛋白抗体和α_1-抗胰糜蛋白酶抗体,S-100蛋白抗体和α_1-抗胰糜蛋白酶抗体,对恶性组织细胞增生症瘤组织常规石蜡切片的免疫组化双标记染色进行了探讨。实验步骤简单,结果明确,是一种较为理想的免疫酶双标记染色。

免疫金银法常见问题和对策探讨

免疫金银组织化学方法建立已有10年,实践证明此法具有敏感性高,试剂价廉,无毒等优点,适用于光镜和电镜的免疫组化检测。彩色免疫金银法更具有鲜明色彩,

慢性乙型肝炎肝内HBV DNA和HBsAg的双标记定位研究

应用原位杂交和免疫组化PAP法双标记技术,结合病人乙型肝炎(乙肝)病毒血清学标志物检测结果,研究了31例慢性乙肝病人肝穿刺组织中乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)和HBsAg的分布及意义。结果显示,肝组织内检出HBV DNA 23例,HBsAg 26例,二者同时检出者21例。从同组病人肝组织内HBV DNA和HBsAg双标检测结果与其乙肝病毒血清学标志物检测结果的比较来看,肝组织内HBV DNA和HBsAg同时阳性很可能表明HBV正处于复制及表达的活动状态。

微量免疫法制备兔抗PHA-L抗血清及PHA-L顺行追踪给药条件的探讨

将PHA-L(Phaseolus Vulgaris-Leucoagglutinin,植物血凝素L)导入中枢神经系统特定部位,在可能投射区作免疫组化染色,可取得理想的顺行标记结果。我们用Vector实验室产PHA-抗原,根据微量免疫法免疫家兔,获得了效价较好的兔抗PHA-L抗血清。成年雄性新西兰纯种兔三只,脚掌皮下注入Freund完全佐剂,待触及鼠膝部或腘窝淋巴结肿大成黄豆至蚕豆大小时,将与Freund不完全佐剂混匀成油色水状态的PHA-L抗原0.1ml注入每例动物肿大之淋巴结。一个月后于每例动物背部皮下多点注入抗原。又一个月重复注射。注射后12天耳缘静脉采血,用琼脂双扩法测抗血清效价,三例动物中,有一例动物效价为1∶32—1∶64。第14天颈动脉放血,分离血清。

自身免疫性甲状腺病巨噬细胞、NK细胞的免疫组化研究

本文采用APAAP法对自身免疫性甲状腺疾病及某些甲状腺其他疾病作免疫组化研究。发现除桥本甲状腺炎(HT)与非毒性甲状腺肿(NTG)在浸润单个核细胞中Ki-M8^+细胞的比例相差显著外,其余均无显著性差异。HT 的甲状腺中NK 细胞可能并不减少。Ki-M8^+细胞浸润程度与滤泡细胞HLA-DR 抗原的表达成正相关。Ki-M8^+细胞和NKH-1^+细胞多呈散在分布。在有破坏的HT甲状腺滤泡中常见NKH-1^+细胞,提示NK 细胞攻击甲状腺滤泡。

豚鼠正常皮肤和创伤皮肤修复组织中Ⅲ型胶原免疫组织化学定位

对豚鼠正常皮肤及其烧伤、切割伤、冻伤皮肤修复组织中Ⅲ型胶原进行免疫组化定位研究发现,有少量Ⅲ型胶原散在分布于正常豚鼠皮肤真皮全层;在创伤皮肤修复组织真皮全层有大量增生的Ⅲ型胶原均匀分布,且部分毛囊皮质细胞胞浆亦呈Ⅲ型胶原强阳性反应。结果提示,Ⅲ型胶原在创伤修复过程中可能起填补支架作用,促进创伤皮肤愈合;创伤时毛囊皮质细胞分泌的Ⅲ型胶原,组成皮质纤维重要成分,对创伤时健存的毛根可能有重要的填充固定和支持作用。

微量免疫法制备兔抗PHA-L抗血清及PHA-L顺行追踪给药条件的探讨

用菜豆凝集素免疫纯种New Zealand家兔,得到兔抗PHA-L多克隆抗血清。琼脂双扩法测效价为1:32-1:64。将PHA-L用正电电泳方法导入大鼠尾壳核及终纹床核吻侧部,用上述自备的抗PHA-L抗血清作免疫细胞化学染色,清楚地显示了黑质及下丘脑室周部的PHA-L阳性标记终支及注射部位的阳性反应细胞,抗血清稀释度以1:3000～1:4000为佳。本文比较了间断正电、间断负电、连续负正交替、间断负电后间断正电电泳及静置不通电五种给药条件,结果表明,唯有通以正电时,才见阳性反应细胞及终支。本文讨论了正电流的作用。