rhKGF、CBLB502和WR2721对放射性口腔黏膜炎的防治效果观察

目的比较r h KG F、CB L B 5 0 2、W R 2 7 2 1对放射性口腔黏膜炎(R O M)的防治作用。方法健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、照射对照组、rh KGF组、CBLB502组及WR2721组。其中24只小鼠观察17Gy头颈部照射小鼠的30d存活率及体重变化,另外20只小鼠利用1%甲苯胺蓝染色法观察照射小鼠舌组织溃疡情况,HE染色观察舌组织病理学改变,Ki-67免疫组化检测黏膜角化上皮细胞增殖情况。结果与照射对照组相比,rh KGF和WR2721给药组小鼠30d存活率显著提高,体重恢复较快,角化上皮细胞增殖显著,未发生明显的口腔黏膜炎;CBLB502组小鼠的存活率、体重变化及组织病理学指标与照射对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 rh KGF和WR2721对放射性口腔黏膜炎有较好的防治作用,而CBLB502并不能减轻放射性口腔黏膜炎的发生。

小鼠小肠干细胞谱系追踪方法的建立及其在放射损伤中的应用

目的利用Lgr5-EGFP-Cre ERT2/ROSA26-stop-EYFP小鼠建立谱系追踪方法,用于观察Lgr5+小肠干细胞在小肠组织更新中的作用,并研究辐射对小肠干细胞组织重建的影响。方法通过基因型分析鉴定Lgr5-EGFP-Cre ERT2/ROSA26-stop-EYFP小鼠。他莫西芬诱导小鼠体内的荧光蛋白表达,激光共聚焦显微镜观察诱导后小肠干细胞的分化。采用60Coγ射线(15Gy)照射Lgr5-EGFP-Cre ERT2/ROSA26-stop-EYFP小鼠,观察辐射对小肠干细胞组织重建的影响。结果提取鼠尾DNA通过PCR方法鉴定Lgr5基因(174bp),获得双阳性小鼠。他莫西芬(100mg/kg)单次诱导后,激光共聚焦观察到Lgr5+小肠干细胞在诱导后5d开始分裂,7d已到达绒毛顶端,14d少量绒毛全部带有荧光,45d更多的小肠绒毛中存在荧光细胞,而且更加稠密。但在15Gy照射后小鼠小肠绒毛脱落严重,隐窝处没有荧光出现。结论成功建立了小肠干细胞谱系追踪模型,并初步观察了辐射对小肠干细胞损伤的影响。

rhG-CSF大剂量单次给药对非清髓骨髓移植小鼠造血功能重建的影响

目的 观察重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）大剂量单次给药对非清髓骨髓移植小鼠造血恢复的影响,为rhG-CSF的临床应用提供新的实验依据.方法 雄性C57BL/6J小鼠,经60Co γ射线6 Gy全身照射.于受照后0.5h给予rhG-CSF处理,通过检测接受不同骨髓移植时间（未移植组和照后0.5、6、24和48 h移植组）和rhG-CSF不同给药剂量（0、0.25、0.5和l mg/kg组）照射小鼠外周血象变化,摸索最佳接受骨髓移植时间和rhG-CSF最佳给药剂量.建立绿色荧光蛋白（GFP）小鼠非清髓骨髓移植小鼠模型,通过流式细胞仪检测受体小鼠外周血中GFP＋白细胞占有核细胞总数的百分数,探究rhG-CSF大剂量单次给药对外源性干祖细胞植入的影响.结果 rhG-CSF大剂量单次给药对照后0.5～48 h内接受非清髓骨髓移植小鼠的造血恢复均有不同程度的促进作用,其中对照后24 h移植组小鼠的白细胞、红细胞和血小板的恢复最佳（F=17.76、14.75、8.66,P ＜0.05）;0.25～1.0 mg/kg rhG-CSF单次给药可不同程度地促进非清髓骨髓移植小鼠的多系造血恢复,尤以大剂量rhG-CSF（1.0 mg/kg）给药时效果更为显著（F=5.34、8.92、16.54,P＜0.05）;此外,照射小鼠接受GFP小鼠骨髓细胞移植后,在照后9～21 d,rhG-CSF组小鼠外周血白细胞数均明显高于移植对照组（F =35.61,P＜0.05）,但GFP＋细胞比例在给药组与移植对照组之间差异无统计学意义.结论 rhG-CSF大剂量单次给药可显著促进非清髓骨髓移植小鼠多系造血功能恢复,但对输入的外源造血干细胞植入率没有明显影响.