耳穴压豆预防脑卒中急性期便秘的护理

[目的]探讨耳穴压豆对脑卒中急性期便秘的预防作用。[方法]将120例急性期脑卒中病人随机分为实验组和对照组,对照组实施常规治疗护理,实验组在常规治疗护理的同时予耳穴压豆,每日按压3次～5次,每次3min～5min;施压后耳郭有酸麻、胀、痛、灼热感;3d换1次,两耳交替,连续治疗12d,记录病人每天排便情况。根据罗马标准判断有无便秘,对两组病人便秘发生率进行比较。[结果]实验组和对照组便秘发生率比较差异有统计学意义(P<0.01)。[结论]耳穴压豆有很好地预防便秘作用。

河北省磁县食管癌高发区食管鳞状细胞癌组织HPV检测及FHIT表达的研究

背景与目的:河北省磁县是食管癌高发区,有关人乳头状瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)感染和当地食管癌发生的关系尚无研究报道。本研究旨在探讨HPV感染在当地食管癌发生中的病因学意义,同时分析与环境致癌物密切相关的脆性组氨酸三联体基因(fragilehistidinetriad,FHIT)表达与HPV感染的关系。方法:收集河北省磁县食管癌高发区128例和非高发区24例食管鳞状细胞癌石蜡包埋组织,用PCR进行HPV检测,用免疫组化方法分析FHIT在蛋白水平上的表达情况,同时分析HPV感染和FHIT异常表达的关系。结果:PCR检测结果表明,河北省食管癌高发区食管鳞状细胞癌组织中HPV检出率为20.3%,略高于非高发区(8.3%),但两者差别无显著性(P>0.05)。免疫组化结果显示,食管癌高发区食管鳞癌组织中FHIT基因异常表达率(75.6%)明显高于非高发区食管鳞癌组织(54.2%,P<0.05)。食管癌组织中HPV感染和FHIT的异常表达之间无明显相关性。结论:河北省食管癌高发区食管癌组织FHIT的异常表达率明显高于非高发区病例。

真菌及其毒素诱发肺癌的动物实验研究

目前 ,国内外关于肺癌病因的研究多侧重于空气污染、吸烟、辐射等方面。我们实验室过去几十年的研究中发现 ,饮食中的真菌及其毒素可能在肺癌的发生过程中发挥重要作用 ,从而进行了一系列的研究工作。早期研究结果表明 ,河北省太行山区居民食用的酸菜和接种黄曲霉菌和杂色曲霉菌的玉米面 (其中可检出AFG1和ST)可诱发昆明、LACA和NIH小鼠及Wistar大鼠肺癌。近期研究进一步证实 。

脱氧雪腐镰刀菌烯醇、黄曲霉毒素G_1对体外培养人外周血淋巴细胞凋亡影响的研究

以细胞培养、流式细胞仪ＤＮＡ含量分析及ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳方法研究了我国食管癌高发区磁县居民粮食中优势污染霉菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇（ＤＯＮ）和黄曲霉毒素Ｇ１（ＡＦＧ１）对人淋巴细胞凋亡的影响。流式细胞术（ＦＣＭ）检测结果显示，ＤＯＮ、ＡＦＧ１处理组淋巴细胞出现了典型的亚二倍体凋亡细胞峰，凋亡百分率与毒素作用时间（ＤＯＮ：２～７２小时；ＡＦＧ１：２～２４小时）及剂量（ＤＯＮ：５０～２０００μｇ／Ｌ；ＡＦＧ１：３．１２～２０００μｇ／Ｌ）呈正相关关系。ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳结果表明，ＤＯＮ（１０００μｇ／Ｌ）、ＡＦＧ１（１０００μｇ／Ｌ）处理２４小时淋巴细胞出现特征性的ＤＮＡ＂Ｌａｄｄｅｒ＂条带。因此表明，ＤＯＮ、ＡＦＧ１可诱导和促进体外培养的人外周血淋巴细胞发生凋亡。

脱氧雪腐镰刀菌烯醇对小鼠胸腺细胞凋亡和增殖的影响

目的 :探讨脱氧雪腐镰刀菌烯醇 (DON)对小鼠胸腺细胞凋亡和增殖的影响。方法 :以动物实验、形态学观察、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术方法研究了不同剂量DON对小鼠胸腺细胞凋亡和增殖的影响及其量效关系。结果 :FCM检测结果表明 ,不同浓度DON均能诱导并促进体内小鼠胸腺细胞凋亡 ,DON 0 5mg/kg、1mg/kg、2mg/kg、4mg/kg、8mg/kg组胸腺细胞的平均凋亡百分率分别为 6 35 %± 1 30 %、8 30 %± 1 33%、8 89%± 2 15 %、10 70 %± 0 6 2 %和 12 5 4 %± 2 0 8% ,在 0 5mg/kg到 8mg/kg的浓度范围内 ,随DON浓度的增高 ,胸腺细胞的凋亡率也相应增高 ,两者呈显著正相关 (r=0 788,P <0 0 1)。DNA琼脂糖凝胶电泳结果显示 ,大剂量 (8mg/kg和 4mg/kg)DON处理组小鼠胸腺细胞出现了凋亡特有的梯状条带。超微结构观察可见DON处理组小鼠胸腺部分细胞出现核染色质固缩凝聚、胞芽等细胞凋亡的超微结构特征表现。大剂量 (8mg/kg和 4mg/kg)DON可明显降低小鼠胸腺细胞增殖活性 (用PI表示 ,P <0 0 1)。结论 :脱氧雪腐镰刀菌烯醇可剂量依赖地诱导并促进小鼠胸腺细胞的凋亡和抑制其增殖。

RhoA信号转导通路对乳腺癌细胞Ezrin表达的影响

背景与目的:目前研究证实,RhoA在肿瘤发生发展和浸润转移过程中起重要作用,但其具体作用机制尚不完全清楚。Ezrin已经被证实参与了乳腺癌等多种恶性肿瘤的浸润转移过程。本研究初步探讨RhoA信号转导通路对Ezrin表达的调节作用。方法:给予表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)作用MDA-MB-231细胞不同时间后,应用Western blot方法检测细胞内RhoA、RhoA磷酸化形式及Ezrin蛋白表达的变化情况;给予RhoA激酶特异性抑制剂fasudil预处理后,应用Western blot方法在RhoA磷酸化和Ezrin蛋白的表达高峰时间检测二者的表达情况。结果:给予EGF刺激后,p-RhoA水平逐渐升高,于30min时达高峰;RhoA蛋白的表达无明显变化;Ezrin蛋白水平逐渐升高,于24h时达高峰。用fasudil预处理细胞后,EGF诱导的RhoA磷酸化水平受到明显抑制,抑制率为72.73%;同时Ezrin蛋白的表达水平亦受到明显抑制,抑制率为51.28%。结论:RhoA可能作为Ezrin的上游信号转导途径参与调控乳腺癌细胞的浸润转移。

经口给予黄芪提取物对H22肝癌荷瘤小鼠影响的实验研究

目的:综合分析黄芪提取物对H22肝癌荷瘤小鼠肿瘤细胞增殖、凋亡及机体免疫功能的影响。方法:采用病理形态学观察、免疫组化、流式细胞术和免疫学方法研究灌胃不同剂量黄芪提取物(ASA)对H22荷瘤小鼠肿瘤细胞增殖与凋亡、脾脏CD4+/CD8+T淋巴细胞比例及腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响,综合评价ASA对H22荷瘤小鼠的影响。结果:ASA对H22荷瘤小鼠肿瘤重量、肿瘤细胞增殖均无明显影响。除ASA0.031mg/g组外,ASA0.125mg/g、0.500mg/g和2.000mg/g组肿瘤细胞凋亡率和Bax的表达均明显高于对照组(P<0.01),而实验组Bcl-2表达则明显低于对照组(P<0.01)。ASA可增加荷瘤小鼠脾脏CD4+/CD8+比例,提高腹腔巨噬细胞吞噬能力。结论:ASA对H22肝癌荷瘤小鼠肿瘤细胞增殖无明显影响,但可在一定程度上促进肿瘤细胞凋亡,提高机体免疫功能。

胃癌高发区农村居民血清胃蛋白酶原和胃泌素分析

目的 为探讨我国胃癌高发区农村成年居民血清胃蛋白酶原Ⅰ (PepsinogenⅠ ,PGⅠ )、胃蛋白酶原Ⅱ (PGⅡ )和胃泌素 (Gastrin ,GAS)水平和分布规律。方法 以放射免疫学方法对赞皇县 15 0 4名 30岁以上居民血清PGⅠ、PGⅡ和GAS水平进行了定量分析。结果 赞皇县居民血清PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ /PGⅡ比值和GAS值变异范围非常大 ,明显偏离正态分布 ,其中位值分别为 5 6 30 μg/L、12 5 0 μg/L、4 6和 72 0 0pg/ml。男性居民血清PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ /PGⅡ比值 (6 4 90 μg/L、13 80 μg/L、4 85 )均明显高于女性居民 (49 95 μg/L、11 5 5 μg/L、4 4 0 ;P均 <0 0 0 0 1) ,而男女居民血清GAS水平无明显差异。不同年龄组居民血清PGⅠ、PGⅡ水平有一定差异 ,但PGⅠ /PGⅡ比值差异不明显。结论 赞皇县农村成年居民血清PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ /PGⅡ和GAS值明显偏离正态分布。血清PG水平有显著性别差异。

杂色曲霉素对体外培养人胚肺成纤维细胞rasp21和超微结构的影响

以人胚肺组织体外培养、流式免疫技术和电镜相结合的方法，对河北省肿瘤高发区粮食中污染的常见霉菌毒素－杂色曲霉素作用后人胚肺成纤维细胞癌基因ｒａｓｐ２１蛋白产物的表达及相应超微结构变化进行了研究。结果表明：在杂色曲霉素作用下人胚肺成纤维细胞癌基因ｒａｓｐ２１的蛋白表达明显增强。电镜观察可见杂色曲霉素处理细胞出现细胞核明显增大、异型、核膜内褶、核仁明显等一系列具有恶性肿瘤细胞特征的超微结构变化。

乳腺癌钼靶X线表现与癌组织骨桥蛋白、骨连接蛋白表达的相关性研究

目的检测骨桥蛋白(OPN)、骨连接蛋白(ON)在乳腺癌组织中的表达,探讨二者与乳腺癌钼靶X线征象的关系。资料与方法采用免疫组织化学S-P法检测61例浸润性乳腺癌、8例导管内乳头状瘤和21例乳腺纤维腺瘤组织中OPN、ON的表达,并分析与钼靶X线表现及临床病理的关系。结果61例乳腺癌组织OPN、ON高表达率分别为72.13%和77.05%,明显高于乳腺良性肿瘤(χ2=6.310,χ2=13.126,P<0.05);钙化组乳腺癌OPN、ON高表达率分别为87.50%和91.67%,与无钙化组比较,有显著性差异(χ2=4.649,χ2=4.781,P<0.05);钼靶片中肿块表现、毛刺征和腋下淋巴结转移及其他各项临床病理表现与OPN、ON高表达均无统计学意义(P>0.05)。结论OPN、ON在乳腺癌组织中高表达,钼靶X线表现在一定程度上反映了肿瘤组织中OPN、ON的表达水平,对评估乳腺癌生物学行为和预后具有一定的参考价值。

杂色曲霉素致人胚肺细胞p53及Ki-ras基因突变研究

为探讨中国恶性肿瘤高发区粮食中优势污染霉菌毒素—杂色曲霉素 (Sterigmatocystin,ST)的致癌作用 ,运用银染 PCR- SSCP方法分析了不同浓度的 ST(1μg/ ml和 3μg/ m l)对体外培养的人胚肺细胞恶性转化过程中抑癌基因 p5 3第 5、6、7、8外显子及癌基因 Ki- ras的突变情况。结果显示 ST处理后第 2 2周 ,人胚肺成纤维细胞 p5 3基因的第 8外显子和 Ki- ras癌基因均出现异常泳动带型 ,表明 ST诱发了抑癌基因 p5 3及癌基因 Ki- ras突变 ,进一步证实了 ST对人肺组织的致癌作用。

杂色曲霉素对体外培养人外周血白细胞介素Ⅱ分泌影响的研究

杂色曲霉素是我国肿瘤高发区粮食中的优势污染霉菌毒素。为探讨杂色曲霉素 (ST)对人体免疫机能的影响 ,采用双抗体夹心ELISA方法对ST作用后人外周血单核细胞 (HPBMc)培养上清液中白血细胞介素Ⅱ (IL 2 )的分泌水平进行了检测。结果表明 ,不同浓度 ( 0 0 3 12 5～ 2mg L)ST处理 2 4h后 ,体外培养的HPB Mc的IL 2分泌均受到一定程度的抑制 ,其中以较低浓度ST( 0 0 3 12 5～ 0 12 5mg L)和较高浓度ST( 1～ 2mg L)抑制作用最明显 (P <0 0 5 )。在ST 1mg L作用 1～ 64h的时间范围内 ,ST对HPBMcIL 2的分泌总体表现抑制作用。ST处理后 8～ 64h ,随ST处理时间的延长 ,对IL 2分泌的抑制作用逐渐增强 (r =0 82 2 ,P <0 0 5 )。本研究结果提示 ,ST对HPBMcIL

p-JNK JNK和PPARγ在食管癌变过程中的表达及其意义

目的:探讨p-JNK/JNK和PPARγ蛋白在食管癌变过程中的表达及其意义。方法:采用免疫组织化学方法,研究食管正常鳞状上皮(15例)、食管鳞状上皮内瘤变(85例)和食管鳞状细胞癌(60例)组织中p-JNK/JNK和PPARγ蛋白的表达情况。结果:JNK在食管正常鳞状上皮、食管鳞状上皮内瘤变和食管鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为20.0%、37.6%和55.0%,而p-JNK的阳性表达率分别为33.3%、55.3%和73.3%,JNK和p-JNK在食管鳞状细胞癌中的阳性表达率均明显高于食管正常鳞状上皮和食管鳞状上皮内瘤变(P<0.05)。高级别食管鳞状上皮内瘤变中JNK、p-JNK的阳性表达率显著高于食管正常鳞状上皮和低级别食管鳞状上皮内瘤变(P<0.05)。PPARγ在食管正常鳞状上皮、食管鳞状上皮内瘤变和食管鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为73.3%、45.9%和45.0%,食管鳞状上皮内瘤变和食管鳞状细胞癌中PPARγ的阳性表达率明显低于食管正常鳞状上皮(P<0.05)。食管鳞状细胞癌中JNK、p-JNK和PPARγ的表达与肿瘤分化程度相关,JNK、p-JNK和PPARγ的表达均随肿瘤病理分级的增高而降低(P<0.05)。JNK、p-JNK和PPARγ的表达与临床病理特征不相关(P>0.05)。结论:在食管癌变过程中,JNK、p-JNK的表达呈增高趋势而PPARγ的表达呈下降的趋势。但食管鳞状细胞癌中JNK/p-JNK和PPARγ的表达均随肿瘤分化程度降低而降低。提示JNK、p-JNK和PPARγ在食管鳞状上皮癌变和进展过程中发挥不同作用,其机制比较复杂。

杂色曲霉素对人外周血单个核细胞TAP1及LMP2基因表达的影响

目的:探讨杂色曲霉素(ST)对体外培养的人外周血单个核细胞(HPBMc)抗原加工递呈相关基因TAP1、LMP2表达的影响。方法:采用RT-PCR和FCM方法,分析5种浓度ST处理对体外培养的HPBMcTAP1、LMP2基因在mRNA和蛋白水平表达的影响。结果:RT-PCR检测结果表明,ST处理24h后,低浓度ST组(0.125mg/L、0.25mg/L)HPBMcTAP1mRNA相对表达量明显高于对照组,而较高浓度组(0.5mg/L、1mg/L和2mg/L)TAP1mRNA则明显低于对照组,尤以1mg/L和2mg/L组为著。FCM定量分析表明,低浓度ST组HPBMcTAP1蛋白平均表达量略低于对照组,但无统计学意义,而较高浓度组TAP1表达则明显低于对照组(P<0.05)。在0.125mg/L到1mg/L浓度范围内,各ST处理组HPBMcLMP2蛋白表达量和mRNA的相对表达量均高于对照组。结论:ST对体外培养的HPBMcTAP1mRNA表达和蛋白表达的影响按ST剂量不同而变化,在0.125～1mg/L浓度范围内ST在mRNA及蛋白水平均可剂量依赖地提高体外培养的HPBMcLMP2的表达。

食管鳞癌组织中NK细胞和DC浸润与预后的关系

背景与目的自然杀伤(naturalkiller,NK)细胞和树突细胞(dendriticcell,DC)在抗肿瘤免疫中发挥重要作用。热休克蛋白(heatshockprotein,HSP)也参与抗肿瘤细胞免疫。本研究旨在探讨食管鳞癌组织中NK细胞和DC浸润与预后的关系及其与HSP27、HSP70表达的关系。方法应用免疫组化SP法检测101例食管鳞癌组织中NK细胞和DC的浸润情况。根据临床病理资料和随访结果,对比分析NK细胞和DC在临床病理特征相同、但术后生存时间明显不同的两组病例(长期生存组术后生存5年以上,38例;短期生存组术后1年内死亡,63例)癌组织中的浸润情况。同时,分析NK细胞和DC浸润与HSP27、HSP70表达的关系。结果免疫组织化学染色结果显示101例食管鳞癌组织中每高倍视野(×400)NK细胞平均数为(31.4±19.7)个,其中长期生存组癌组织中每高倍视野NK细胞平均数为(41.9±21.7)个,明显高于短期生存组(25.0±15.4)个(P<0.001)。DC在101例食管鳞癌组织中每高倍视野细胞平均数为(14.8±7.8)个,长期生存组和短期生存组癌组织中每高倍视野DC平均数分别为(15.2±8.6)个和(14.5±7.4)个,t检验显示两组无显著性差异(P>0.05)。NK细胞和DC浸润与肿瘤长度、浸润深度、病理分级、淋巴结转移等临床病理特征均无相关性(P>0.05)。二项分类logistic回归分析显示NK细?

杂色曲霉素对人胚胃粘膜细胞p53基因致突变研究

为探讨杂色曲霉素（ＳＴ）的致癌作用，运用细胞培养、流式细胞术（ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，ＦＣＭ）和银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ等方法研究了不同浓度的ＳＴ（１ｍｇ／Ｌ和３ｍｇ／Ｌ）诱发体外培养的人胚胃粘膜细胞恶性转化情况以及此过程中抑癌基因ｐ５３在蛋白及基因水平上的变化。结果表明，ＳＴ处理４周后处理细胞增殖旺盛，并出现恶性转化灶；ＳＴ处理２４周后处理细胞可在软琼脂上形成细胞集落（ＳＴ１ｍｇ／Ｌ和３ｍｇ／Ｌ组每皿细胞集落数平均分别为１５和１７个）；ＦＣＭ检测结果表明，ＳＴ处理的细胞细胞增殖指数增高，ＤＮＡ含量增高，出现ＤＮＡ异倍体，突变型抑癌基因ｐ５３蛋白表达明显增强。ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析结果显示，ＳＴ处理２２周后，处理细胞ｐ５３第８外显子出现异常泳动带型。

Maspin BCSG1及c-erbB-2表达与乳腺癌预后的关系

目的:探讨Maspin、BCSG1、c-erbB-2蛋白在乳腺癌中的表达及其与预后的关系。方法:选取临床病理资料完整并随访5年以上的137例乳腺癌病例,采用SP免疫组织化学技术检测乳腺癌组织中的Maspin、BCSG1、c-erbB-2蛋白的表达情况,结合临床及病理形态学资料用COX模型分析Maspin、BCSG1、c-erbB-2表达对预后的影响。结果:Maspin、BCSG1、c-erbB-2蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率分别为48.9%,67.2%,27.7%三者与生存时间显著相关(P<0.01)。结论:Maspin、BCSG1、c-erbB-2蛋白在乳腺癌中的表达与患者的生存期密切相关,可作为预测乳腺癌预后的参考指标。

真菌霉素诱发的小鼠肺腺癌组织发生的研究

目的 探讨真菌毒素诱发的NIH小鼠肺腺癌组织学来源及其可能致癌机理。方法 采用34例长期灌胃黄曲霉毒素G1(AFG1)和杂色曲霉素(ST)诱发的NIH小鼠实验性肺腺癌组织作为研究对象,同时以12例正常肺组织作为对照。采用免疫组化染色方法以肺Ⅱ型肺泡上皮细胞特异分化标志物SP C和Clara细胞特定分化标志物CC 10的表达情况确定肺腺癌的组织来源。同时以免疫组化方法分析本组实验性肺腺癌P5 3、Ras和PCNA的表达情况。结果 全部34例肺腺癌癌细胞均可见肺Ⅱ型肺泡上皮细胞特异分化标志物SP C蛋白的阳性表达,阳性表达率为10 .0 % ,而Clara细胞特定分化标志物CC 10均为阴性表达(P <0 .0 1)。肺腺癌细胞PCNA平均阳性标记指数为73 .32 % ,明显高于对照组2 2 . 4 3% (P <0 . 0 1) ,但肺腺癌细胞未见突变型抑癌基因P5 3和癌基因RasP2 1在蛋白水平上的表达。结论 真菌毒素诱发的实验动物肺腺癌组织来源于Ⅱ型肺泡上皮细胞,具有较高的增殖活性,但未见突变型P5 3和RasP2 1在蛋白水平的表达。

河北省食管癌、胃癌高发区居民食用小麦赭曲霉素A污染情况分析

目的探讨河北省食管癌、胃癌高发区居民食用小麦赭曲霉素A污染情况,了解居民的可能暴露量。方法深入高发区现场随机选取当地居民正在食用的小麦样品,利用反相-液相色谱法测定其赭曲霉素A含量。结果河北省胃癌高发区赞皇县居民食用小麦样品中赭曲霉素A的检出率为45.16%,平均含量2.41μg/kg,最高达14.25μg/kg。河北省磁县食管癌高发区居民食用小麦中赭曲霉素A的检出率为33.33%,平均含量0.59μg/kg,最高为1.63μg/kg。结论河北省胃癌食管癌高发区居民食用小麦赭曲霉素A的检出率明显高于国内其它地区的有关文献报道,应引起肿瘤防治工作者的重视。

CAF方案新辅助化疗对乳腺癌组织BCSG1蛋白表达的影响

目的:探讨CAF联合化疗方案的新辅助化疗对乳腺癌组织BCSG1蛋白表达的影响。方法:采用免疫组化SP法分别检测34例行CAF联合方案新辅助化疗患者(新辅助化疗组)和同期110例未行新辅助化疗患者(对照组)手术切除的乳腺癌组织BCSG1蛋白的表达。同时对新辅助化疗组疗效进行病理形态学评价,并分析BCSG1蛋白表达与病理形态学变化的关系。结果:新辅助化疗组化疗总有效率为79.4%。新辅助化疗组BCSG1蛋白高表达率明显低于对照组(29.4%比64.5%,P<0.01),化疗后部分缓解(Ⅱ级)病例BCSG1蛋白高表达水平明显低于无效(Ⅲ级)病例(P=0.002)。结论:采用CAF方案新辅助化疗近期疗效明显,可抑制乳腺癌BCSG1蛋白的表达。