树木叶片叶绿素含量三种测定方法的比较

丙酮浸提法测定油松和杨树叶片叶绿素含量比丙酮研磨提取法和二甲基亚砜-丙酮两步快速提取法偏低10%-30%;叶绿素a/b比也存在一定差异。而对于小麦和油菜三种方法测定结果基本一致。树木叶片叶绿素含量结果偏低的主要原因是丙酮浸提后的叶片材料中仍有少量褐色（杨树）或浅黄色物质（油松）。上述残余材料中的色素在65℃下用二甲基亚砜再次浸提,或者常温下用二甲基亚砜进行研磨提取,测定吸光度发现上述残余材料中的色素对叶绿素a和b的吸光度具有显著干扰,导致吸光度增大,测定结果偏高。丙酮浸提法不会将干扰物质溶出,或者溶出较少,叶绿素含量测定最为准确,适合含有次生有色物质的树木叶片的叶绿素含量测定。

叶绿素家族概述

叶绿素是自然界中最重要的化合物之一,是植物进行光合作用的主要色素,在光合作用光能的吸收、传递和转化过程中起核心作用。本文概述了叶绿素的分类和结构,并对叶绿素家族中各成员的性质、功能和分布分别做了介绍,为叶绿素相关研究提供参考。

叶绿素快相荧光动力学曲线参数平均值与平均曲线参数值的差异

对杨树叶片低温处理前后的荧光数据进行研究的结果表明,绝大部分荧光参数的平均值与平均曲线荧光值非常接近,相差不超过2%;少数参数虽然相差可达10%,但统计结果显示二者差异均不显著。因此用平均曲线的荧光值直接绘制雷达图,可大大简化叶绿素快相荧光动力学实验数据的处理运算过程,并能降低异常数据对实验结果的干扰。

叶绿素的快速提取与精密测定

Arnon法是叶绿素提取和测定最经典、最常用的方法,此法虽经多次改进,但仍存在着检测波长误差大、计算公式有误、提取速度慢、测定结果不够准确以及操作步骤繁琐等缺陷。该文提出了二甲基亚砜(DMSO)高温提取、80%丙酮稀释的两步快速浸提法,使叶绿素提取和测定过程缩短至3小时以内。通过对提取温度、提取时间、稀释比例及吸收光谱等进行系统分析,筛选出了叶绿素的最佳提取条件和叶绿素含量的准确计算公式,并用多种类型的植物材料验证了改进后的提取方法,证明该方法具优越性和可靠性。具体测定方法是将植物材料切成1 mm宽的细丝或细段,取50-100 mg材料于10 m L具塞试管中;加入2 m L DMSO,使植物材料浸没其中,65°C高温避光提取至植物材料变白或透明;冷却后加入8 m L 80%丙酮,混匀,测定663.6和646.6 nm处的吸光度。用公式计算叶绿素浓度:Ca(mg·L^(-1))=12.27A663.6-2.52A646.6;Cb(mg·L^(-1))=20.10A646.6-4.92A663.6;CT(mg·L^(-1))=Ca+Cb=7.35A663.6+17.58A646.6。