聚乙二醇诱导鸡血细胞融合的研究进展

细胞融合是细胞生物学的一项核心技术,也是细胞生物学实验课程的重要内容。聚乙二醇(PEG)诱导的细胞融合法是目前最经济、简单的细胞融合技术。因影响细胞融合效果的因素很多,难以把握,导致细胞融合效果不理想,不利于学生对实验结果的观察、判断和描述,因而无法更好地达成培养学生实验技能和探究能力的培养目标。本文综述了以鸡血细胞为实验材料时,不同条件下聚乙二醇诱导的鸡血细胞融合效果,期望找到适合的探索方向,以达到优化细胞融合的条件,从而提高PEG诱导细胞的融合率。

优化PEG诱导鸡血细胞融合条件的研究

为了解决聚乙二醇(PEG)诱导细胞融合效果较低的问题,试验以鸡血细胞为材料,通过优化PEG诱导鸡血细胞融合的条件来提高细胞融合率,即在融合温度为38℃和融合时间为10 min的条件下,采用双因素设计研究PEG相对分子质量(2 000,4 000,6 000)和浓度(25%、50%、65%、80%)及其互作对血细胞融合率的影响;确定最佳PEG相对分子质量和浓度后,采用相同试验设计研究融合温度(35℃、38℃、41℃)和时间(5,10,20 min)对血细胞融合率的影响。结果表明:PEG相对分子质量(F=5.36,P=0.009 2)和浓度(F=28.46,P<0.000 1)对血细胞融合率均有显著影响,且相对分子质量为4 000、浓度为50%时血细胞融合率最高;PEG相对分子质量与浓度的互作对血细胞融合率的影响不显著(F=2.42,P=0.054 7)。融合温度对血细胞融合率有显著影响(F=6.56,P=0.004 8),38℃时血细胞细胞融合率最高;但融合时间(F=0.34,P=0.720 0)及其与温度的互作(F=0.58,P=0.680 0)对血细胞融合率均无显著影响。说明PEG分子质量、浓度和融合温度是影响鸡血细胞融合率的关键因素。