类蛋白反应修饰的牡蛎肽锌结合物的生物利用性

通过类蛋白反应(Plastein)修饰制备具有较高锌离子结合能力的牡蛎源肽(EVPPEEH),其锌结合能力为161 mg/g。以缺锌型SD大鼠为试验模型,以牡蛎酶解肽-锌结合物OPZ、类蛋白反应修饰的牡蛎酶解肽-锌结合物LPZ和ZnSO4(ZS)为对照,研究牡蛎源肽(EVPPEEH)与锌的结合物(MZ)在体内的生物利用率和生物利用途径。结果表明:MZ组大鼠血清锌水平,股骨锌储备量及肝脏锌含量和肾脏锌含量均显著高于各对照组。脾脏锌含量MZ组和LPZ组恢复程度相似,均显著高于OPZ组和ZS组。MZ组和各对照组大鼠体重和摄食量均显著增加,效果相似。大鼠小肠转锌蛋白(ZnT1)的表达量MZ组与无机锌组差异不是很明显,而小肽转运蛋白(PepT1)的表达量MZ组最高,相对于ZS组上调了20%,显著高于各对照组,说明大鼠小肠对MZ的吸收利用一部分是通过传统锌离子途径,另一部分是通过小肽途径。MZ有望成为一种新型高效的补锌制剂。

牡蛎源类蛋白反应修饰肽的分离纯化及肽锌螯合物的结构表征

以牡蛎为原料制备了类蛋白反应修饰肽,利用Sephadex G-15凝胶层析柱和反向高效液相色谱(RP-HPLC)等分离技术得到1条锌离子螯合活性为161 mg/g的多肽(M_w=835),多肽序列为EVPPEEH.以测得的肽序列为模板合成多肽,将纯肽与锌离子进行螯合反应制备肽锌螯合物.螯合物的红外光谱和圆二色光谱表征结果表明,锌离子主要与多肽链上的羰基氧发生相互作用.与多肽的空间结构相比,螯合物的无规则卷曲结构减少,β转角增加而β折叠减少.由肽锌螯合物的分子模拟和二级质谱结果可知,多肽与锌离子螯合后有2种空间构象:一种通过六配位的方式螯合1个锌离子,其中主要的螯合位点为多肽Val-2和Pro-3或者Glu-5和Glu-6之间的羰基氧;另一种是通过四配位的方式螯合1个锌离子,主要的螯合位点为多肽Glu-5和Glu-6之间的羰基氧.