荧光定量PCR技术在猪病防治中的应用

生猪感染疾病时会直接对养殖场或养殖户的经济造成巨大损失,因此,做好生猪疾病预防工作显得尤其重要。利用实时荧光定量PCR技术(FQ-PCR技术)能有效利用微量的DNA进行扩增,提高检测精度,对猪病诊治和防治具有重要作用。一、猪病的诊断和防治现状猪病预防成效能直接影响养殖效益,在我国农村有大量的个体户进行生猪养殖,但个体农户往往缺乏足够的养殖经验,文化水平普遍偏低.

遗传性肥胖对肺组织炎症和纤维化的影响

目的:通过研究瘦素基因敲除肥胖小鼠,探讨肥胖对肺组织炎症和纤维化的影响。方法:ob/ob基因敲除C57小鼠为肥胖组(8只),野生型C57小鼠为正常组(8只),喂养至5个月。分别采用苏木精伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察肺组织炎症细胞的浸润,masson染色及人α平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)免疫组化观察支气管周围胶原纤维沉积及Western blot检测肺组织MMP-9的表达。结果:(1)肥胖组小鼠支气管周围有明显的炎症细胞浸润,较正常组明显增加(P=0.015),而肺泡周围则增加并不明显(P=0.266)。(2)肥胖组小鼠肺组织masson染色及α-SMA免疫组化支气管周围胶原纤维沉积较正常组均明显升高(α-SMA:P=0.003;masson:P=0.002)。(3)肥胖组小鼠肺组织中基质金属蛋白酶9(Matrix metalloproteinases 9,MMP-9)蛋白表达与正常组相比明显升高(P=0.006)。结论:通过对ob/ob基因敲除肥胖小鼠研究,推测肥胖可增加肺组织炎症及肺组织纤维化程度。

重庆部分地区苯丙氨酸羟化酶缺乏症患儿基因突变分析

目的探讨重庆部分区域苯丙氨酸羟化酶(phenylalanine hydroxylase,PAH)缺乏症基因突变频率和特征,为PAH缺乏症的诊断及治疗提供依据。方法回顾性分析2014年1月1日至2020年10月25日在重庆医科大学附属儿童医院确诊的45例PAH缺乏症患儿,将苯丙氨酸羟化酶缺乏症分型为经典型苯丙酮尿症(phenylketonuria,PKU)、轻度PKU及轻度高苯丙氨酸血症(hyperphenylalaninemia,HPA),分析其二代高通量测序及多重连接依赖探针扩增技术检测的PAH基因突变情况以及Sanger测序技术对其父母相应变异位点的验证结果。结果①45例高苯丙氨酸血症患者中43例均检出2个变异位点(40例为复合杂合突变,3例为纯合突变),且所检测突变位点均来自父母;另外2例为杂合突变,仅检测到1个变异位点。②45例PAH缺乏症患者共检出34种突变,主要以错义突变(52.9%)为主,c.728G>A突变频率最高(15.9%,14/88),其次为c.158G>A(11.4%,10/88)、c.1197A>T(9.1%,8/88)及c.721C>T(9.1%,8/88)。高频突变的区域在第7外显子,包含4种突变,26个变异位点(29.5%)。③13例经典型PKU患者检测到11种PAH基因突变,其中突变频率最高的为c.728G>A(8/25,32%);8例轻度PKU患者检测到9种PAH基因突变,c.728G>A(3/15,20%)突变频率最高;24例轻度HPA患者共检出24种PAH基因突变,其中c.158G>A(10/48,20.8%)突变频率最高。结论重庆市PAH缺乏症患者PAH基因突变以复合杂合为主,主要变异类型为错义突变,具有明显的热点突变(c.728G>A、c.158G>A、c.721C>T及c.1197A>T)。

14例单纯型与合并型甲基丙二酸血症的临床资料分析

目的 :总结2017年至今重庆医科大学附属儿童医院筛查确诊及随访的单纯型及合并型甲基丙二酸血症患儿的临床特点、实验室检查及基因等。方法:分析甲基丙二酸血症(methylmalonic acidemia,MMA)患儿临床表现及发病特点,分析首次串联质谱中丙酰基肉碱、丙酰基肉碱/乙酰基肉碱、尿甲基丙二酸、血同型半胱氨酸、血氨乳酸、血液分析及基因核苷酸结果等。结果:MMA主要表现有喂养困难、反应弱、惊厥及发育迟缓等,发病到治疗及确诊间隔越长,预后较差。实验室检测主要表现高氨血症6例(42.9%)、贫血5例(35.7%)、粒细胞减低7例(50%)、血小板减少5例(35.7%),63.6%的伴同型半胱氨酸血症增高;单纯型全部存在高氨血症;单纯型较合并型MMA患儿丙酰基肉碱及尿甲基丙二酸水平升高而丙酰基肉碱/乙酰基肉碱稍低,均无明显统计学意义;基因核苷酸改变以错义突变为主,其次为插入/缺失及重复。12例头颅MRI/CT结果提示7例脑萎缩、4例脑水肿及1例髓鞘化延迟,2例头颅彩超显示脑室稍增宽。结论:MMA患儿临床表现及实验室检查均缺乏特异性,串联质谱及尿有机酸可进行初步确诊,尽快治疗的同时尽早完善基因确诊。

新型冠状病毒肺炎疫情期间新生儿遗传代谢性疾病筛查专家共识

2019年底出现的新型冠状病毒(2019-nCoV)感染在全国多地及世界各国陆续发生,至今尚未完全控制,已有儿童甚至新生儿感染的报道,中国每年约1 500万新生儿出生,需要进行遗传代谢性疾病新生儿筛查,存在潜在风险。结合现状,重庆医科大学附属儿童医院新生儿疾病筛查中心联合国家卫生健康委员会临床检验中心新生儿疾病筛查室间质评专业委员会的部分专家,经过讨论,提出新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情期间新生儿遗传代谢性疾病的筛查、诊治及随访的系统建议。

早期营养过剩加重哮喘小鼠肺组织炎症和气道反应性

目的通过早期营养过剩建立肥胖小鼠模型,探讨肥胖对哮喘小鼠肺部炎症及气道反应性的影响。方法采用小窝喂养的方法建立早期营养过剩肥胖小鼠模型,实验组采用鸡卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏及雾化吸入激发的方法建立哮喘模型,对照组采用等量生理盐水腹腔注射及雾化吸入,分组为肥胖哮喘组、单纯哮喘组、单纯肥胖组和正常对照组。最后一次激发后行肺功能测定检测肥胖对哮喘气道反应性的影响,行肺泡灌洗术分析灌洗液中炎症细胞总数和分类、肺组织HE染色检测肥胖对哮喘炎症的影响。结果 1)哮喘小鼠气道反应性明显高于对照组,肥胖哮喘小鼠较单纯肥胖组和哮喘组小鼠气道反应性明显升高(P均<0.05)。2)与哮喘组和肥胖组相比,肥胖哮喘组灌洗液炎症细胞总数和分类炎症细胞明显升高(P均<0.05),与对照组相比,单纯肥胖组炎症细胞总数和巨噬细胞增多(P均<0.05),其他炎症细胞无差异(P均>0.05)。3)与肥胖组相比,肥胖哮喘组支气管周围和肺泡间隙炎症细胞明显增多(P均<0.05),与哮喘组相比,仅表现为支气管周围炎症细胞增多(P<0.05)。结论早期营养过剩诱导的肥胖小鼠可明显增加哮喘小鼠气道反应性及肺组织炎症。

中小衔接:一个基于生命成长的教育命题

近年来，我校一直高度重视中小衔接工作。每年4月份进入总复习之前，我们都邀请常州外国语学校的教师来校指导：有进行命题指导的，有进行试卷分析的，等等。初中校也常举办一些学生主题联谊活动（如圣诞联欢主题活动等），邀请部分毕业班学生参加。

双螺旋发展机制:团队成长的绿色生境——学校转型期领导团队发展机制的思考与实践

一、问题：机遇与挑战并存的转折考验2005年，已经走过六年“新基础教育”实验研究并成为基地，学校正处在从发展性研究走向成型性研究的关键时刻。就在新校长上任之时，

高三毕业班英语教学的一些想法和做法

高三毕业班的教师更多的时间用于备学生、备教材,他们在自己的教学中形成很多实际的教学方法。笔者结合实际教学,谈谈对高三毕业班英语教学的一些想法和做法。

提升自觉:跨越教师发展“高原期”

“高原现象”是教育心理学中的一个概念，指的是在学习或技能的形成过程中，出现的暂时停顿或下降的现象。在曲线上表现为保持一定的水平而不上升，或者有所下降，在“高原现象”之后，曲线又继续上升。当今，教师发展也出现程度不同的“高原现象”，表现为教师的专业德性和专业能力的发展处于相对停顿、甚至稍有退步的状态。

以基于问题的跟进研究“搬”走发展中的问题

江苏常州市第二实验小学教育集团用研究解决办学中不断出现的新问题。通过三则"跟进日志",展示了学校管理者"走进教室做研究",从"学生立场"和"教育常识"出发,反观日常教学的症结所在,以对问题的敏感重构管理变革实践的过程。在这种基于问题的持续性的跟进研究中,学校管理者发现了真问题,发出了自己的声音,使学校的课程领导真正拥有了专业的气质。

在管理现场中提升领导团队的“现场学习力”

江苏常州市第二实验小学将提升领导团队的"现场学习力"作为学校管理变革与领导团队自身发展的重要使命。在个体与团队共生中激活领导团队的现场学习动力,在自觉坚守中磨砺领导团队的现场学习毅力,在实践创新中提升领导团队的现场学习能力。

常规保证与研究创新:学校发展的动力机制

江苏常州市第二实验小学在"新基础教育"有关学校发展的动力机制的研究中,认为常规的价值在于变成自然的力量,创新的意义在于提升秩序的品质,常规与创新相互制衡、螺旋上升。学校始终坚守"在变革中立序、以立序促变革"的原则,在"立序"与"变革"的螺旋交替中建立了层次与系统之间积极、双向、有效互动的创生式运行机制。

创新:让教师徜徉在职业美丽中

走进二实小，耳濡目染的是两句话：让每个孩子尽情享受童年的多彩与欢乐，让每个教师充分享受职业的内在尊严与自豪。在职业倦怠日趋明显的今天，如何在传承中创新，使教师永葆职业之美呢？

管理重建:在变革中提升价值

江苏常州市第二实验小学在进行“新基础教育”成型性研究时，努力提升学校管理变革在成事威人中的核心价值。他们将管理者的“自我发展”（成人）与“管理变革”（成事）统一于积极的研究性变革实践中，在组织变革中提升管理价值，在岗位研修中磨砺管理能力，在共同创造中优化管理关系，在整合融通中重建管理时空，在机制研究中拓展管理功能。

追梦:那一段华美的旅程

本文记述了一位新校长及其团队从由责任心而走进“新基础教育”，从全情参与学习“新基础教育”到逐步浸入亲身体悟“新基础教育”并最终融入“新基础教育”的心路历程。展示出因参与新基础教育而在价值取向、思维方式和生活态度等方面的变化过程。

退休:教师职业生活中一个美丽的驿站

“王校长：杨老师的退休证已经办好了，何时给她？”办公室主任提醒我。 “哦。我们学校的常规做法怎样？”新到一个单位，在没有经验的情况下．继承传统是可行之举。

“正反比例图像”课堂实录及评析

师：（课前发给每个同学一张印有正反比例实例的纸）准能很快判断表巾两种相关联的量是否成比例，成什么比例？说说你是怎样判断的？

反复喘息婴幼儿潮气呼吸肺功能及其与生长的相关性

目的了解反复喘息婴幼儿潮气呼吸肺功能及其与生长的相关性。方法选择118例反复喘息婴幼儿为研究对象,测定其身长、体质量等生长指标及潮气呼吸肺功能参数。将反复喘息婴幼儿的生长水平与世界卫生组织(WHO)儿童生长标准进行对比,评估罹患反复喘息疾病患儿的生长情况;将纳入患儿分为非超重组75例、超重组43例,比较两组患儿潮气呼吸肺功能特点。结果无论男性还是女性反复喘息患儿体质量水平均高于WHO儿童生长标准的均值,差异有统计学意义(t=3.91、3.25,P均<0.05);而身长水平与WHO儿童生长标准均值差异无统计学意义(t=1.76、1.24,P均>0.05)。超重组患儿的潮气量(VT)低于非超重组,吸呼比(tI/tE)高于非超重组,差异有统计学意义(t=2.68、3.15,P均<0.01);反映气道阻塞指数的达峰时间比(tPF/tE)、达峰容积比(VPF/VE)在两组之间的差异无统计学意义(Z=0.73、1.31,P均>0.05)。结论反复喘息患儿的体质量水平高于WHO标准均值。超重的反复喘息患儿潮气量较非超重患儿下降,大小气道阻塞两组间无明显差异。