贝母类药材生物碱及生物碱苷含量测定方法学研究

目的 建立酸水解 酸性染料比色法同时测定贝母类药材中生物碱及生物碱苷含量的方法。方法 用氯仿 甲醇 (4∶1 )混合溶剂提取总碱 ,酸性染料比色法测定水解前及水解后提取物中生物碱含量 ,计算出生物碱、生物碱苷及总生物碱的含量。结果 生物碱、生物碱苷及总生物碱的加样回收率分别为 1 0 0 .5 % ,1 0 2 .2 % ,1 0 1 .1 % ,RSD分别为 1 .1 % ,3 .3 % ,1 .7% (n =5) ,并对药典收载的 9种贝母类药材进行了测定。结论 本法不需要复杂仪器 。

不同培养基及外源激素对西洋参毛状根的生长和皂甙含量的影响

分析了 1/2MS、改良White、SJ 1、改良Nisch、B5和B5 I 6种液体培养基、水解乳蛋白 (LH)以及IAA、IBA、NAA、6 BA和ABA 5种激素对西洋参 (PanaxquinquefoliumL .)毛状根生长及皂甙含量的影响。用高效液相色谱法测定部分毛状根样品的 4种单体皂甙含量。结果表明SJ 1和B5培养基较好 ,水解乳蛋白可增加毛状根的鲜重 ,但降低毛状根中总皂甙的含量。IAA、IBA和ABA对毛状根的生长有促进作用 ,6 BA对皂甙积累有显著促进作用 。

Ri质粒转化西洋参的研究Ⅰ.西洋参毛状根培养系统的建立及鉴定

以西洋参（ＰａｎａｘｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍＬ．）的胚为材料，在附加ＧＡ３和ＩＢＡ的培养基上获得无菌苗。分别用含有Ｒｉ质粒的发根农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ）１５８３４菌株及经过胡萝卜提取液处理后的该菌株感染无菌苗切段，在外加萘乙酸６ｍｇ／Ｌ的ＭＳ琼脂培养基培养后获得毛状根。胡萝卜处理组较未处理组转化率提高１倍，出根时间提前１０ｄ。转化根在不含激素的培养基上可快速生长，表现为典型的毛状根性状。ＰＣＲ分析证实内含５７７ｂｐｒｏｌＣ序列的ＴＬ－ＤＮＡ已整合人转化株的染色体组。

金银花nrDNA ITS区聚合酶链反应条件的研究

目的 :金银花nrDNAITS区序列G +C含量为 6 8% ,用常规的PCR方法扩增效果差。本研究通过改变扩增程序及使用改性剂的方法显著提高了金银花nrDNAITS区的扩增效率。方法 :分别从金银花叶及药材中提取总DNA ,通过优化扩增条件 ,对nrDNAITS区进行扩增 ,并比较了两种优化方法的差别及适应性。方法 1:提高变性温度至 97℃ ;方法 2 :添加混合改性剂 (DMSO 4 % 甘油 10 % )。结果 :与方法 1相比 ,方法 2可降低变性温度 5℃ ,升高退火温度 9℃ ,降低镁离子浓度至 0 .5mmol/L ,降低TaqDNA聚合酶用量至 0 .1U(30 μl体系 ) ,PCR产物量显著提高 ,且可消除植物DNA粗提物中杂质的干扰。结论 :通过提高退火温度及添加改性剂可克服高G +C含量金银花nrDNAITS区序列扩增的困难 ,该方法的建立有助于解决植物来源DNA模板的PCR扩增问题。

常用真菌类中药清除自由基的活力测定

目的 :为真菌类生药的抗衰老作用提出理论依据。方法 :采用化学发光法 ,以保险粉 -氢氧化钠 -鲁米诺体系 ,检测灵芝、虫草、香菇等十六种常用真菌类中药对O2 · - 自由基的清除作用。结果和结论 :1 6种真菌类中药均有清除O2 · - 自由基的作用 ,尤以灵芝、虫草、香菇、黑木耳的SOD样活力最高。

离线二维液相色谱串联质谱法检测东北刺人参根中的化学成分

利用离线二维液相色谱串联高分辨质谱的方法分析检测东北刺人参根的化学成分,以CN色谱柱为第一维分离制备组分,ODS(C18)色谱柱为第二维色谱分析,结果表明,构建的二维液相体系峰容量明显提高,共检测得到31个成分,并结合UV及HRMS信息鉴定出其中7个化合物,分别为:松柏苷(1),紫丁香苷(2),(+)-异落叶松脂素-3-α-O-β-D-葡萄糖苷(3),oploxynes A(4),oplopantriol A(5),(3S,8S)-falcarindiol(6)和oplopandiol(7)。

西洋参抗癌研究进展——以结直肠癌为研究范例

癌症是由细胞生长调控机制失控而引起的多种疾病群。目前使用的化疗药物许多来源于植物,因此从中草药及食源植物中筛选新的抗肿瘤药物是一个有效途径,包括先导化合物的发现及相应化疗衍生物的开发。本文主要以人参属药材抗结直肠癌为例,对西洋参抗癌研究进展加以综述。西洋参除具有潜在抗癌作用外,在癌症治疗中常被用作为辅助药物来缓解因化疗药物引起的毒副作用。研究表明,高温炮制西洋参及其人参皂苷的肠道菌群代谢产物可显著增加抗癌活性,揭示化学物质与构效关系。源于中草药成分及临床研究数据将有助于开发新的抗癌药物。

东北刺人参根部的酚苷成分

目的研究东北刺人参Oplopanax elatus的亲水性成分及其抗结直肠癌活性。方法利用大孔树脂,正、反相硅胶柱及制备HPLC色谱方法分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构;并进行HCT-116和HT-29细胞增殖活性测定。结果从东北刺人参干燥根提取物正丁醇部位分离并鉴定了11个酚苷化合物,其中6个苯丙素苷成分:3,5-二甲氧基肉桂酸-4-O-β-D-葡萄糖苷(1)、3-羟基二氢肉桂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷(2)、3-甲氧基肉桂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷(3)、3-甲氧基二氢肉桂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷(4)、3,5-二甲氧基二氢肉桂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷(5)、3,5-二甲氧基肉桂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷(6);5个木脂素苷成分:3,3′-二甲氧基-4,9,9′-三羟基-4′,7-环氧-5′,8-木脂素-4,9-O-β-D-二葡萄糖苷(7)、(+)-5,5′-二甲氧基落叶松脂素-4′-O-β-D-葡萄糖苷(8)、(+)-异落叶松脂素-9′-O-β-D-葡萄糖苷(9)、(+)-异落叶松脂素-4-O-β-D-葡萄糖苷(10)、(+)-5,5′-二甲氧基落叶松脂素-9′-O-β-D-葡萄糖苷(11)。所有酚苷对HCT-116和HT-29细胞增殖均无明显抑制作用(IC50>100μmol/L)。结论化合物4、6、9、11均为首次从该植物中分离得到,化合物1、2和10首次从该属植物中分离得到。

美洲刺人参酚类化学成分研究

利用正向硅胶、反相硅胶、Sephadex LH-20和制备液相色谱等多种分离技术进行分离纯化,依据理化性质和波谱数据鉴定结构,从美洲刺人参Oplopanax horridus的根皮醇提物乙酸乙酯和正丁醇萃取部位分离并鉴定了16个酚类化合物,其中7个苯丙素类成分阿魏酸(1),3-乙酰咖啡酸(2),咖啡酸(3),3-甲氧基二氢肉桂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷(4),3-羟基二氢肉桂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷(5),3,5-二甲氧基肉桂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷(6),3-甲氧基肉桂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷(7);3个香豆素类成分,东莨菪内酯(8),6,7-二羟基香豆素(9),反式-3'-当归酰基-4'-乙酰基角型吡喃香豆素(10);6个木脂素类成分,(+)-异落叶松脂素9'-O-β-D-葡萄糖苷(11),3,3'-二甲氧基-4,9,9'-三羟基-4',7-环氧-5',8-木脂素-4,9-O-β-D-二葡萄糖苷(12),(+)-5,5'-二甲氧基落叶松脂素4'-O-β-D-葡萄糖苷(13),(-)-5,5'-二甲氧基落叶松脂素4'-O-β-D-葡萄糖苷(14),(-)-松脂醇4'-O-β-D-葡萄糖苷(15),(±)-5,5'-二甲氧基落叶松脂素9'-O-β-D-葡萄糖苷(16)。所有化合物均为首次从该植物中分离得到,除化合物4,6,12和13外,其余化合物均为首次从该属植物中报道。