大鼠肝缺血再灌注损伤模型心内过氧化物酶Ⅲ、过氧化氢酶及超氧化物歧化酶的表达变化

目的观察大鼠肝缺血再灌注损伤模型心肌组织的氧化应激状态以及抗氧化酶过氧化物酶Ⅲ(PrxⅢ)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)的表达变化。方法 Wistar雄性大鼠12只,随机分为两组。参照Kohli等的方法制造大鼠70%肝缺血再灌注损伤模型,对照组只分离肝蒂,损伤再灌注6h后取血、肝和心。速率法测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和乳酸脱氢酶(LDH)活性。光学显微镜观察肝和心的形态学改变。硫代巴比妥酸比色法测定心肌组织丙二醛(MDA)含量,RT-PCR法测定抗氧化酶PrxⅢ、CAT、SOD的mRNA表达水平,Western blotting法测定蛋白水平的表达变化。结果与对照组相比,肝缺血再灌注损伤组大鼠血清ALT活性、LDH活性和心肌MDA的含量均明显升高;HE染色结果显示,肝结构受损明显,但心结构未发现明显改变;心肌组织抗氧化酶PrxⅢ、CAT、SOD的mRNA水平和蛋白水平均明显升高。结论肝缺血再灌注损伤虽未引起心结构的改变,但心肌组织已遭受过氧化损伤;抗氧化酶PrxⅢ、CAT、SOD在此过程中可能发挥了抗氧化应激作用,对心脏具有保护功能。

大鼠肾缺血再灌注损伤肝内过氧化酶I、过氧化氢酶、细胞外超氧化物歧化酶的表达变化

摘要目的：观察大鼠。肾缺血再灌注损伤模型肝的功能、形态、氧化应激水平以及抗氧化酶过氧化酶I（PrxI）、过氧化氢酶（CAT）、细胞外超氧化物歧化酶（EC-SOD）的表达变化，探讨肾缺血再灌注损伤对肝的影响及PrxI、CAT、EC-SOD的抗氧化作用。方法：通过无损伤动脉夹钳夹。肾动脉法建立肾缺血再灌注损伤模型。再灌注24h后取血、肝和肾。血清ALT活性采用速率法测定，血清SCr含量采用苦味酸法测定；血清BUN含量采用酶耦联速率法测定。采用H—E染色观察肝、肾的形态学改变。肝组织MDA含量采用硫代巴比妥酸比色法测定；肝组织H2O2含量采用分光光度法测定。抗氧化酶PrxI、CAT、EC-SODmRNA表达水平采用RT-PCR的方法测定，其蛋白水平的表达变化采用免疫印迹测定。结果：肾缺血再灌注损伤组大鼠血清SCr含量、BUN含量和ALT活性均高于对照组；H—E染色结果显示模型组大鼠肾组织、肝组织形态结构均明显受损。肝组织内的MDA含量和Hzoz含量明显高于对照组，PrxI、CAT、EC-SOD的mRNA和蛋白表达水平与对照组相比也明显升高。结论：肾缺血再灌注损伤可导致肝遭受过氧化损伤，形态结构和功能受损，PrxI、CAT、EC-SOD在此过程中可能发挥了抗氧化应激作用，对肝具有保护功能。

大鼠肝缺血再灌注损伤肾内过氧化物酶V、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶的表达变化

目的:观察大鼠肝缺血再灌注损伤模型肾的功能、形态以及过氧化物酶V(PrxV)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)的表达变化,探讨肝缺血再灌注损伤对肾的影响及PrxV、CAT、SOD的抗氧化作用.方法:首先采用无损伤血管夹夹闭通往大鼠肝左叶、肝中叶的血管和胆管蒂30 min,然后松开血管夹恢复肝血液供应,制造大鼠70％肝缺血再灌注损伤模型;损伤再灌注6h后取血、肝和肾.血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性采用速率法测定,血清肌酐(SCr)含量采用苦味酸法测定;血清尿素氮(BUN)含量采用酶耦联速率法测定.采用H-E染色观察肝、肾的形态学改变.肾组织MDA含量采用硫代巴比妥酸比色法测定,抗氧化酶PrxV、CAT、SOD mRNA表达水平采用RT-PCR的方法测定,其蛋白水平的表达变化采用免疫印迹测定.结果:肝缺血再灌注损伤组大鼠血清ALT活性、SCr和BUN含量明显高于对照组;H-E染色结果显示模型组大鼠肝组织、肾组织均明显受损.肾组织内的MDA含量明显高于对照组,PrxV、CAT、SOD的mRNA和蛋白表达水平与对照组相比也明显升高.结论:肝缺血再灌注损伤可导致肾的形态和功能受损,抗氧化酶PrxV、CAT、SOD在此过程中可能发挥了抗氧化应激作用,对肾具有保护功能.

Peroxiredoxin Ⅲ在大鼠超负荷心肌肥厚过程中的表达变化

目的：探讨Peroxiredoxin Ⅲ（PrxⅢ）在大鼠超负荷心肌肥厚过程中的表达变化。方法：雄性SD大鼠随机分为假手术对照组和模型组，模型组大鼠实施腹主动脉缩窄术，制备压力超负荷心肌肥厚模型。分别于术后24h，2、4、6周，测定血液动力学变化；称量心体质量；光镜和电子显微镜观察左心室的组织变化；提取左心室RNA，RT-PCR分析PrxⅢ的表达变化。结果：术后24h两组大鼠的血液动力学和心肌形态无明显变化。术后2、4、6周时，模型组大鼠的SBP、DBP、LVSP、LVED及左心室体质量指数逐渐增加，心肌纤维逐渐增粗，线粒体逐渐增多，肌节增长。术后24h PrxⅢ的表达稍有降低，但无统计学意义，2周时则明显降低，4周有所上升但仍低于对照，6周时明显上升且高于对照组。结论：PrxⅢ mRNA表达呈现先降低后增高的趋势，即在心肌肥厚中早期表达降低，而在心肌肥厚形成后表达明显升高，表明PrxⅢ参与了超负荷心肌肥厚的发生。

虾青素对红细胞氧化应激及胞膜过氧化损伤的影响

目的:探讨抗氧化剂虾青素(Astaxanthin,ASTA)对储存悬浮红细胞内外氧化应激水平的影响和对胞膜的保护作用。方法:采集志愿者血液,制备去白悬浮红细胞,将其随机分为4组:A组、B组、C组、D组。在B、C、D3组悬浮红细胞的MAP保存液内加入抗氧化剂ASTA,使其终浓度分别为5、10和20μmol/L,A组作为对照组只加入ASTA的溶解液DMSO。悬浮红细胞于2℃-6℃冰箱内保存。于保存第7、14、28、42天,采用荧光酶标仪测定红细胞内活性氧族(ROS)含量;硫代巴比妥酸比色法测定红细胞内丙二醛(MDA)含量;分光光度法测定细胞外过氧化氢(H2O2)含量,全自动血细胞分析仪测定平均红细胞体积(MCV);化学比色法测定细胞外游离血红蛋白含量(FHb)。结果:在红细胞储存期间B、C、D组悬浮红细胞内ROS、MDA含量、细胞外FHb和H2O2含量均低于对照组;保存第7天和14天时B、C、D组的MCV与对照组无统计学差异;保存第28天和42天时B、C、D组的MCV低于对照组。结论:ASTA可以降低储存悬浮红细胞内外的氧化应激水平,减轻细胞膜的过氧化损伤。

2004—2014年石家庄地区献血人群年龄和文化程度分布以及变化趋势

目的探讨2004—2014年石家庄地区无偿献血人群年龄和文化程度分布特点以及变化趋势,为有针对性地加强献血宣传教育及献血员招募措施的制定提供依据和指导。方法收集2004—2014年石家庄地区无偿献血人群资料,对献血人群年龄和文化程度分布以及变化趋势进行分析。结果 2004—2014年石家庄地区无偿献血者共计1 355 476人,献血人数呈逐年增加趋势。年龄分布方面,18~25岁献血者比例最高,达43.81%,〉45岁年龄段献血者比例最低,仅为9.57%;文化程度方面,高中、初中及以下献血者比例较高,分别为25.13%和24.14%,中专文化程度献血者比例最低,仅为11.61%。在2004—2014年,18~25岁年龄段献血者比例呈逐渐降低趋势（P〈0.01）,而〉25~35岁、〉35~45岁、〉45岁3个年龄段献血者比例均逐渐升高（P〈0.01）;初中及以下文化程度献血者比例呈升高趋势（P〈0.01）,而本科及以上文化程度献血者比例却呈下降趋势（P〈0.01）。高中、中专和大专文化程度献血者比例具有明显的波动性（P〈0.01）。结论 2004—2014年石家庄地区无偿献血人群年龄和文化程度分布不均匀,其献血者比例呈现明显的波动性。应有针对性地加强不同年龄和文化程度献血人群的宣传教育,制定合理的献血员招募措施,以保证充足的献血员资源。

过氧化物酶Ⅰ、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶在大鼠肝缺血再灌注损伤小肠内的表达变化

目的:观察过氧化物酶Ⅰ(PrxI)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)在大鼠肝缺血再灌注损伤模型小肠内的表达变化以及小肠内氧化应激的水平,探讨肝缺血再灌注损伤对小肠的影响及PrxI、CAT、SOD的抗氧化作用。方法:制备大鼠70%肝缺血再灌注损伤模型。肝缺血再灌注6h后取血、肝和小肠。采用全自动生化分析仪测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性;钼酸比色法和硫代巴比妥酸比色法测定血清、小肠中H_2O_2和丙二醛(MDA)的含量;H-E染色法观察肝、小肠的形态学改变;RT-PCR测定小肠组织PrxI、CAT、SOD mRNA水平的表达,免疫印迹测定其蛋白水平的表达。结果:与对照组相比,肝缺血再灌注损伤组大鼠血清ALT活性、MDA和H_2O_2的含量明显升高;H-E染色结果显示模型组大鼠肝组织形态结构受损明显;小肠组织内MDA和H_2O_2的含量明显高于对照组,PrxI、CAT、SOD的mRNA和蛋白表达水平与对照组相比也升高明显。结论:PrxI、CAT和SOD在小肠组织处于高度氧化应激状态过程中可能发挥了抗氧化应激作用。

去白悬浮红细胞储存过程中ATP、2,3-DPG含量变化与氧化应激的相关性分析

目的探讨去白悬浮红细胞储存过程中三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)、2,3-二磷酸甘油酸(2,3-diphosphoglycerate,2,3-DPG)含量变化与氧化应激的相关性。方法采集志愿者血液,制备去白悬浮红细胞,于2~6℃保存。于保存7 d、14 d、28 d、42 d时,应用荧光酶标仪测定去白悬浮红细胞内活性氧族(reactive oxygen species,ROS)含量,采用分光光度法测定细胞外过氧化氢(hydrogen peroxide,H_2O_2)含量,采用化学比色法测定ATP含量,采用紫外测试法测定2,3-DPG含量。对去白悬浮红细胞内ROS、ATP、2,3-DPG和细胞外H_2O_2含量与储存时间进行相关性分析;对去白悬浮红细胞内ATP、2,3-DPG含量与ROS、H_2O_2含量进行相关性分析。结果随着储存时间的延长,去白悬浮红细胞内ROS含量和细胞外H_2O_2含量均明显升高,保存42 d的ROS和H_2O_2含量明显高于保存7 d、14 d和28 d红细胞的ROS和H_2O_2含量,且ROS和H_2O_2含量与储存时间均呈正相关。去白悬浮红细胞内ATP、2,3-DPG含量却明显降低,保存42 d的ATP、2,3-DPG含量明显低于保存7 d、14 d和28 d红细胞的ATP、2,3-DPG含量,并且ATP、2,3-DPG含量与储存时间均呈负相关。去白悬浮红细胞内ATP、2,3-DPG含量与ROS、H_2O_2含量也呈负相关。结论随储存时间延长,去白悬浮红细胞内ATP和2,3-DPG含量逐渐降低,与红细胞内氧化应激反应逐渐增强密切相关。

Prx Ⅴ和CAT在大鼠肾缺血再灌注损伤模型的表达变化

目的观察过氧化物氧化还原酶(peroxiredoxinⅤ,PrxⅤ)和过氧化氢酶(catalases,CAT)在大鼠肾缺血再灌注损伤模型的表达变化,探讨其在抗氧化应激反应中的作用。方法通过无损伤动脉夹钳夹肾动脉法建立肾缺血再灌注损伤模型。再灌注24h后取血和肾脏。苦味酸法和酶偶联速率法分别检测血清肌酐(serumcreatinine,SCr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)浓度;HE法观察大鼠肾脏形态学改变,反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)方法观察PrxⅤ和CAT在肾脏缺血再灌注损伤中mRNA水平的表达变化。结果与对照组相比,肾缺血再灌注损伤组大鼠血清中SCr和BUN的含量明显升高。HE结果提示肾脏缺血再灌注损伤组大鼠的肾组织明显受损。PrxⅤ和CAT mRNA水平也明显升高。结论 PrxⅤ和CAT在肾脏缺血再灌注损伤中均发挥了抗氧化应激作用。

石家庄地区无偿献血者HIV感染趋势变化分析

目的分析2011—2017年不同献血人群人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染率的变化趋势,为有针对性地进行献血宣传和制定献血招募政策提供数据依据。方法收集河北省血液中心2011—2017年酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)初筛HIV抗原抗体联合检测呈反应性并经免疫印迹确认试验呈HIV阳性的献血者,以及ELISA检测呈非反应性但核酸检测HIV-RNA呈反应性并经追溯确认呈HIV阳性的献血者。观察HIV阳性献血者的性别、年龄、职业分布特征,分析不同性别、年龄、职业无偿献血者HIV感染率的变化趋势。结果2011—2017年共检测血液标本1 178 295例,其中免疫印迹确认HIV阳性标本149例,核酸检测且追溯确认HIV阳性标本2例,献血者HIV感染率呈逐渐上升趋势(P<0.05);HIV阳性献血者以男性(96.03%)为主,其HIV感染率呈增高趋势(P<0.05);HIV阳性献血者以18～25岁(33.11%)和26～35岁(28.48%)为主,18～25岁献血者的HIV感染率呈增高趋势(P<0.05),26～35岁献血者的HIV感染率未见明显变化(P>0.05);HIV阳性献血者以自由职业者(33.11%)和职员(25.83%)为主,职员HIV感染率呈逐渐升高趋势(P<0.05),而自由职业者HIV感染率未见明显变化(P>0.05)。结论石家庄地区无偿献血者HIV感染率具有性别、年龄、职业的分布特征,且主要献血人群HIV感染率呈逐渐升高趋势。采供血机构应有针对性地加强献血者HIV防治知识的宣传教育,降低HIV感染率,提高血液安全。

虾青素对悬浮红细胞储存质量的影响

目的观察抗氧化剂虾青素(ASTA)对悬浮红细胞储存质量的影响。方法将所采集的6名无偿献血者血液(400 m L/袋),制备成去白细胞悬浮红细胞(简称悬浮红细胞)400 m L×6袋,每袋随机均分为4组,含3个实验组:分别在去白悬浮红细胞的MAP保存液内加入ASTA使其终浓度(μmol/L)分别为5(A组)、10(B组)和20(C组);1个对照组:只加入作为ASTA溶解液的DMSO(D组)。4组悬浮红细胞于2-6℃保存至d7、d14和d35时,采用倒置荧光显微镜观察悬浮红细胞内活性氧族ROS的表达状况,以荧光酶标仪测定红细胞内ROS含量,以硫代巴比妥酸比色法测定红细胞内MDA含量,以化学比色法测定ATP含量。结果悬浮红细胞保存至d7、d14和d35时,B组ROS含量(荧光强度/mg Hb)分别为148.13±5.49、156.02±13.79、196.98±23.53,与D组相同时间点的204.26±28.69、245.17±15.81、287.52±29.02相比明显降低(P<0.05);B组MDA含量(μmol/mg Hb)分别为7.32±2.56、15.53±3.24、29.48±4.71,与D组相同时间点的23.55±5.08、33.01±4.42、50.76±7.59相比明显降低(P<0.05);B组ATP含量(μmol/g Hb)分别为7.37±1.36、5.72±0.77、4.05±0.66,与D组相同时间点的3.81±0.40、3.14±0.45、2.36±0.47相比明显升高(P<0.05)。A组和C组的ROS含量、MDA含量、ATP含量与相同时间点的D组相比,也均获得了与B组相同的结果,但其效果要逊于B组。结论 ASTA可通过抑制储存悬浮红细胞内的氧化应激水平,延缓ATP含量的降低,来改善保存质量。ASTA终浓度10μmol/L可能是保存红细胞的最适浓度。

2004—2014年石家庄地区HIV阳性献血者的分布特征

目的分析2004—2014年石家庄地区人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus,HIV）阳性献血人群的分布特点,为采供血机构制定合理的献血者招募措施降低输血风险提供数据依据。方法采用2种不同厂家的ELISA试剂对2004—2014年石家庄地区无偿献血者血液标本进行HIV检测,初筛阳性者送河北省疾病预防控制中心采用免疫印迹法进行确认实验。结果 2004—2014年共采集石家庄地区血液标本1 355 476份,经确认的HIV阳性标本共计89例,总阳性率为6.57/10万,年HIV阳性率从2004年的1.29/10万上升到2014年的12.95/10万,呈现增长趋势（P〈0.01）。89例HIV阳性献血者中,男性献血者HIV阳性率明显高于女性（P〈0.01）,年龄〉25~35岁献血者HIV阳性率高于其他年龄段（P〈0.05）;职员献血者HIV阳性率明显高于其他行业（P〈0.05）,不同文化程度献血者HIV阳性率差异无统计学意义（P〉0.05）。结论石家庄地区无偿献血HIV感染者具有性别、年龄、职业的分布特点。针对此特点采供血机构应制定更加合理有效的献血者招募措施,加强不同人群的健康教育,以保障血液安全。

尼古丁处理对大鼠脑内多巴胺转运体和酪氨酸羟化酶的影响

目的观察尼古丁处理大鼠脑内多巴胺转运体(DAT)和酪氨酸羟化酶(TH)的表达变化,探讨尼古丁处理对大鼠脑内多巴胺(DA)能神经体系的影响。方法选用雄性Wistar大鼠按每日0.4mg/kg腹腔注射尼古丁7d;利用免疫组织化学和免疫印迹法,检测尼古丁处理大鼠有关脑区DAT和TH的表达改变。结果与对照组相比:1.免疫组织化学显示,尼古丁处理组大鼠伏核(NACC)和腹则被盖区(VTA)的DAT灰度值降低了12.43%和12.85%;TH的灰度值则降低了11.87%和10.09%。2.免疫印迹法显示,尼古丁处理组大鼠尾壳核(CPu)-NACC、黑质(SN)-VTA的DAT与β-肌动蛋白(β-actin)条带相对吸光度比值增加了75.68%和117.14%;而TH的比值则分别增加了66.32%和60.31%。结论尼古丁处理增加大鼠脑内DAT和TH的表达,这可能与尼古丁的成瘾机制有关。

匹伐他汀提高心肌过氧化物酶Ⅲ、细胞外超氧化物歧化酶表达减轻心肌肥厚

目的:探讨匹伐他汀对大鼠心肌肥厚模型氧化应激水平、过氧化物酶Ⅲ(PrxⅢ)和细胞外超氧化物歧化酶(EC-SOD)表达的影响。方法:SD大鼠随机分为对照组、心肌肥厚组和匹伐他汀组。心肌肥厚组和匹伐他汀组大鼠背部皮下注射异丙肾上腺素7 d制备心肌肥厚模型,对照组注射等体积生理盐水。匹伐他汀组大鼠于注药前7 d即给予匹伐他汀灌胃共14 d。注药7 d后测定大鼠右颈总动脉收缩压(SBP)、舒张压(DBP),计算平均动脉压(MAP)。取心称量全心质量(HW)和左心室质量(LHW),计算心重指数(HW/BW,LHW/BW);分离并测量室间隔(VST)与游离室壁(LVWT)厚度;光学、电子显微镜观察心肌的形态结构;检测血清乳酸脱氢酶(LDH)活性、心肌内丙二醛(MDA)、过氧化氢(H_2O_2)含量、PrxⅢ和ECSOD的mRNA与蛋白水平表达变化。结果:光镜和电镜观察显示,心肌肥厚组和匹伐他汀组大鼠呈心肌细胞肥大表现,但匹伐他汀组形态改变轻于心肌肥厚组;与对照组相比,心肌肥厚组和匹伐他汀组大鼠MAP、HW/BW、LHW/BW、VST、LVWT、血清LDH活性、MDA和H_2O_2含量均明显增加,但匹伐他汀组却低于心肌肥厚组;心肌肥厚组和匹伐他汀组大鼠心肌组织PrxⅢ和EC-SOD的mRNA和蛋白表达量高于对照组,而匹伐他汀组大鼠PrxⅢ和EC-SOD表达量又高于心肌,肥厚组。结论:匹伐他汀能降低大鼠心肌肥厚模型氧化应激水平,改善心肌形态结构和功能的改变,这可能与抗氧化酶PrxⅢ和EC-SOD的表达增强密切相关。

胆汁酸合成增加与肝D-双功能蛋白表达增强、活性升高的相关性

目的:观察胆汁酸合成增多时,DBP的表达和活性的改变,从整体水平上探讨DBP在胆汁酸合成中的作用.方法:给C57BL/6J小鼠T0901317及给Wistar大鼠饲喂高胆固醇食物,两条途径激活肝X受体(LXR),上调CYP7A1的表达增加胆汁酸的合成后,用全自动生化分析仪测定粪胆汁酸,用RT-PCR的方法测定LXR的下游基因胆汁酸合成限速酶CYP7A1,以及DBP的mRNA水平;用Western Blot测定DBP的蛋白水平;用分光光度法测定DBP活性.结果:LXR被T0901317或高胆固醇食物激活后,CYP7A1的mRNA增加(P<0.05),导致粪中胆汁酸排出增加(P<0.05)的同时,小鼠、大鼠肝DBP的mRNA水平、催化活性以及小鼠的DBP蛋白水平也随之增加(P均小于0.05).结论:DBP在整体水平参与了胆汁酸合成并发挥重要作用.

虾青素对储存去白悬浮红细胞内抗氧化酶活性的影响

目的:观察抗氧化剂虾青素(ASTA)对储存去白悬浮红细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等抗氧化酶系活性的影响。方法:去白悬浮红细胞随机分为A、B、C、D 4组,B、C、D组悬浮红细胞保存液内加入ASTA,其终浓度分别为5、10和20μmol/L,A组只加入ASTA的溶解液DMSO。去白悬浮红细胞储存至d 7、14、28和42时,荧光酶标仪测定红细胞内活性氧族(ROS)含量,硫代巴比妥酸比色法测定细胞内丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性,可见光法测定CAT活性,比色法测定GSHPx活性。结果:储存至d 7、14、28和42时,B、C、D组悬浮红细胞内ROS和MDA含量均明显低于A组(P <0.05),SOD活性、GSH-Px活性均明显高于A组(P <0.05);储存至d 28和42时,CAT活性均明显高于A组(P <0.05)。A、B、C、D 4组去白悬浮红细胞内ROS含量、MDA含量与储存时间均呈正相关关系(P <0.01),SOD活性、CAT活性、GSH-Px活性与储存时间均呈负相关关系(P <0.01)。结论:ASTA通过提高去白悬浮红细胞内抗氧化酶系活性来降低细胞内氧化应激水平和过氧化损伤程度。

EC-SOD在肾缺血再灌注损伤大鼠脑内的表达变化

目的观察细胞外超氧化物歧化酶(extracellular superoxide dismutases,EC-SOD)在肾缺血再灌注损伤(renal ischemia reperfusion injury,RIRI)大鼠脑内的表达变化,探讨EC-SOD在脑抗氧化应激反应中的作用。方法选用健康雄性Wistar大鼠12只,随机分为对照组和RIRI组各6只,RIRI组切除大鼠右肾后,用无损伤动脉夹夹闭大鼠左肾动脉,45min后移去动脉夹,恢复大鼠左肾血液供应,建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型。待左肾动脉再灌注24h后麻醉大鼠取材(血、肾、脑)。对照组大鼠只分离左肾动脉并不夹闭。选用苦味酸和酶偶联速率法,检测2组大鼠血清中血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血清肌酐(serum creatinine,SCr)浓度;苏木精-伊红染色光镜观察实验大鼠肾组织形态变化;采用硫代巴比妥酸比色法检测2组大鼠脑内丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;应用逆转录聚合酶链反应和western blot法,测定大鼠脑内EC-SOD mRNA与蛋白的表达水平。结果RIRI组大鼠血清中BUN和SCr浓度明显高于对照组,RIRI组大鼠脑内MDA含量、H2O2浓度、EC-SOD mRNA水平相对表达量以及EC-SOD蛋白水平相对表达量均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。RIRI组脑组织MDA、H2O2含量与EC-SOD mRNA水平以及EC-SOD蛋白水平表达呈正相关。结论大鼠RIRI后,脑内出现过氧化损伤;EC-SOD在RIRI大鼠脑内的表达升高,可能发挥了抗氧化应激的作用。

低浓度吸氧对福尔马林暴露大鼠气管及肺组织的保护作用

目的给予福尔马林暴露大鼠吸入低浓度氧气后,观察其气管及肺组织的光、电镜形态学改变,为预防及治疗福尔马林对呼吸系统的损伤提供理论基础。方法 18只雄性SD大鼠随机分成对照组、福尔马林暴露组、福尔马林暴露+吸氧组,每组6只。对照组大鼠呼吸自然空气,福尔马林暴露组大鼠及福尔马林暴露+吸氧组大鼠每天吸入福尔马林12h,福尔马林暴露+吸氧组大鼠福尔马林暴露完毕后立即吸入浓度为29%的氧气,1次/d,lh/次。对照组和福尔马林暴露组大鼠此时呼吸自然空气。连续吸入25d后处死大鼠取气管、肺组织,通过光学显微镜和透射电镜观察其形态学改变。结果与福尔马林暴露组相比,福尔马林暴露+吸氧组大鼠光学显微镜下可见气管及肺组织的水肿及炎性改变均有所减轻,透射电镜下虽然板层小体结构仍显紊乱,但Ⅱ型肺泡上皮细胞胞浆内未见空泡;肺泡腔内虽仍可见红细胞及少量坏死细胞碎片,但也未见空泡。结论低浓度吸氧可改善福尔马林暴露所导致的大鼠气管及肺组织的病理损伤。

过氧化物还原酶I-硫氧还蛋白、超氧化物歧化酶及过氧化氢酶在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中的表达变化

目的观察过氧化物还原酶I-硫氧还蛋白(PrxI-Trx)、超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化氢酶(CAT)抗氧化体系在大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型中的表达变化,探讨其在抗氧化应激反应中的作用。方法通过无损伤血管夹钳夹通往大鼠肝左叶、肝中叶的血管和胆管蒂,30 min后松开血管夹,制造大鼠70%肝脏缺血再灌注损伤模型。损伤再灌注6h后取血和肝脏。全自动生化分析仪测丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量。HE法观察大鼠肝脏形态学改变。采用RT-PCR的方法观察在肝脏缺血再灌注损伤中PrxI-Trx、SOD、CAT氧化还原体系mRNA水平的表达变化。采用Western blotting测定PrxI、SOD和CAT的蛋白表达水平。结果与对照组相比,血清中ALT水平和HE结果均显示肝脏缺血再灌注损伤组大鼠肝细胞明显受损。PrxI-Trx、SOD和CAT的mRNA水平明显升高。同时,PrxI、SOD和CAT的蛋白表达水平也明显升高。结论 PrxI-Trx、SOD和CAT在肝脏缺血再灌注损伤中均发挥了抗氧化应激作用,对肝细胞具有保护作用。