头颈鳞状细胞癌自噬相关基因预后风险评分模型构建及验证

目的构建并验证一种头颈鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)自噬相关基因预后风险评分模型。方法从癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库下载全部HNSCC转录组表达数据(RNA sequencing,RNA-seq)及临床信息,筛选出差异表达基因,与GeneCards数据库检索的自噬相关基因(autophagy related genes,ARGs)取交集,得到差异表达的ARGs,整合临床信息后经预后分析获得预后相关的ARGs,再对其富集分析。应用套索(the least absolute shrinkage and selection operator,LASSO)回归和Cox回归模型构建一种用于预测HNSCC预后及生存情况的风险评分模型;绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,计算曲线下面积(area under the curve,AUC)及最佳截断(cut-off)值,并以最佳cut-off值将患者分为高、低风险评分组;绘制Kaplan-Meier生存曲线评价该模型的预测性能;将临床信息与风险评分对应整合,再次利用Cox回归分析评价风险评分的独立预后价值。结果通过对差异表达的ARGs进行预后分析初筛出20个与预后相关的ARGs,再应用LASSO回归和Cox回归分析获得9个与预后显著相关的ARGs,以此构建HNSCC的预后风险评分模型。ROC曲线及Kaplan-Meier生存曲线分析显示,低风险评分组生存时间优于高风险评分组,两组生存时间差异有统计学意义(P<0.001),且该模型在训练集(AUC最大值为0.69)与外部验证集(AUC最大值为0.822)中均展现出良好的预测性能。纳入临床信息后,对风险评分进行Cox回归分析,提示其与HNSCC患者预后显著相关(P<0.001),表明风险评分对HNSCC具有独立预后价值。结论由9个ARGs组成的HNSCC风险评分模型,可有效预测HNSCC患者的预后情况。

40例喉气管狭窄的外科治疗效果分析

喉气管狭窄是耳鼻咽喉头颈外科较常见疾病,有逐年增多的趋势,而喉气管狭窄的治疗一直是耳鼻咽喉头颈外科的一道难题。自2003年以来,我们对喉气管狭窄的治疗不断改进,现将治疗方法及体会介绍如下。

乏氧诱导因子-1α基因多态性分析与难治性鼻咽癌复发、转移的研究进展

鼻咽癌为耳鼻咽喉科最常见恶性肿瘤，多表现为鼻塞、涕中带血、听力减退、头痛等症状，男性发病率高于女性，比例为2：1～3：1，且以50～60岁人群为主要发病对象。相关报道称，鼻咽癌治疗失败率约为30％。

耳鼻咽喉科临床实习医师的规范化管理探讨

目的探讨如何提高耳鼻咽喉科实习生临床实习的质量及有效性。方法根据其复杂的自身特点及目前学生临床实习面临的问题,建立耳鼻咽喉科临床实习医师针对性的实习管理模式,包括实习前培训、带教老师的选择、专科知识讲座和出科考试的规范化管理。结果所有实习医生均圆满完成实习任务,实习医生对我科带教医生综合满意度明显增加。结论通过教学管理的规范化和带教目标性,从而有效地提高了耳鼻咽喉科实习生临床实习的质量。

长链非编码RNA MEG3对鼻咽癌细胞增殖和侵袭的影响

目的探究长链非编码RNA母系表达基因3(MEG3)对鼻咽癌细胞增殖和侵袭的影响。方法体外培养鼻咽癌细胞系5-8F、CNE-2,转染MEG3分为空白对照组(转染试剂转染)、阴性转染组(MEG3阴性对照质粒转染)、MEG3转染组(MEG3 mimis质粒转染)。实时定量PCR(qRT-PCR)检测MEG3 mRNA表达;MTT法检测细胞增殖情况;平板细胞克隆实验检测菌落形成情况;流式细胞仪检测细胞凋亡以及周期分布情况;裸鼠模型肿瘤形成实验评估体内肿瘤生长情况;蛋白免疫印迹法(WB)检测细胞中Snail、N-钙黏着蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏着蛋白(E-cadherin)蛋白表达情况。结果与正常鼻咽上皮细胞系NP69相比,5-8F、CNE-2细胞中MEG3 mRNA表达均降低(P<0.05)。在5-8F、CNE-2细胞中,与空白对照组、阴性转染组相比,MEG3转染组细胞中MEG3mRNA表达升高(P<0.05)。在5-8F、CNE-2细胞中,随着细胞培养时间延长,MEG3转染组细胞抑制率逐渐升高;同一时间点,与空白对照组、阴性转染组相比,MEG3转染组细胞抑制率均升高(P<0.05)。与空白对照组、阴性转染组相比,MEG3转染组细胞菌落数量、细胞迁移、侵袭数量均降低(P<0.05)。与空白组、阴性转染组对比,MEG3转染组细胞凋亡率、G1期DNA含量均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白组、阴性转染组对比,在1、2周MEG3转染组肿瘤体积均变小(P<0.05)。与空白组、阴性转染组相比,MEG3转染组Snail、N-cadherin、Vimentin蛋白表达均降低,E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。结论 MEG3在鼻咽癌中表达降低,MEG3表达升高后可抑制鼻咽癌细胞的增殖、侵袭、迁移,使细胞周期停留在G1期,促进细胞凋亡,其机制可能与抑制上皮细胞-间充质转化有关。

下调TPX2抑制喉癌细胞生长的体外实验研究

目的:研究TPX2对喉癌细胞增殖、克隆形成能力及细胞周期的影响。方法:Hep-2细胞中转染TPX2 siRNA、siRNA control记为TPX2 siRNA、siRNA-NC组,以不做转染的细胞为Con组。荧光定量PCR和Western blot分别测定细胞中TPX2 mRNA和蛋白水平,MTT测定各组细胞增殖,平板克隆实验测定各组细胞克隆形成能力,流式细胞术测定各组细胞周期情况,Western blot测定各组细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞核增殖抗原(Ki-67)、细胞周期依赖性蛋白激酶4(CDK4)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)蛋白水平。结果:siRNA control中TPX2 mRNA和蛋白水平、细胞存活率、克隆形成数目、细胞周期以及细胞中PCNA、Ki-67、CDK4、Cyclin D1蛋白水平与Con相比均没有明显变化(P>0.05)。TPX2 siRNA细胞中TPX2 mRNA和蛋白水平均明显低于Con(P<0.05)。TPX2 siRNA细胞存活率、克隆形成数目均明显低于Con,细胞G_0/G_1期比例明显高于Con,细胞中PCNA、Ki-67、CDK4、Cyclin D1蛋白水平明显低于Con(P<0.05)。结论:TPX2敲低可以降低喉癌细胞增殖、克隆形成能力,将细胞周期阻滞在G_0/G_1期,降低细胞中PCNA、Ki-67、CDK4、Cyclin D1蛋白表达。

辛伐他汀联合放射线照射对鼻咽癌CNE-1细胞生长的影响

目的探讨辛伐他汀联合放射线照射对鼻咽癌CNE-1细胞生长的影响。方法将鼻咽癌CNE-1细胞分为对照组、辛伐他汀(2μmol/L)组、2 Gy放射线照射组、辛伐他汀(2μmol/L)联合2 Gy放射线照射组,比较各组细胞增殖抑制率和克隆形成抑制率。结果对照组、辛伐他汀组(2μmol/L)、2 Gy放射线照射组、辛伐他汀(2μmol/L)联合2 Gy放射线照射组细胞增殖抑制率分别为(3.7±0.9)%、(52.3±4.7)%、(56.7±2.3)%、(89.3±2.6)%,克隆形成抑制率分别为(5.3±2.0)%、(55.0±2.6)%、(62.3±3.2)%、(93.3±2.6)%。辛伐他汀(2μmol/L)联合2 Gy放射线照射组细胞增殖抑制率和克隆形成抑制率均明显高于辛伐他汀(2μmol/L)组和2 Gy放射线照射组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论辛伐他汀联合放射线照射能够有效抑制鼻咽癌CNE-1细胞的生长。

鼻咽癌放疗后的挽救性治疗研究进展

鼻咽癌是来源于鼻咽黏膜被覆上皮的恶性肿瘤，与其他癌症类型相比，鼻咽癌有非常独特的地理分布模式，在我国较为常见，以南方尤其是广东和广西地区发病率最高，占全部恶性肿瘤的1．5％-26．0％。鼻咽癌的治疗首选放疗，随着先进检查及放疗技术的应用，鼻咽癌的治疗效果得到明显提高。但由于乏氧、基因组学、蛋白组学和microRNA组学等多方面因素共同作用，导致目前治疗后复发率及转移率仍可达10％-30％，治疗后局部残存、局部复发和远处转移是鼻咽癌治疗失败的主要原因。本文将无远处转移鼻咽癌经足量放疗后局部残存，5年内复发、转移的称为难治性鼻咽癌。对于难治『生鼻咽癌选择适当的挽救治疗至关重要，而目前在治疗上尚无统一定论，再程放疗、挽救性手术是目前运用最广的治疗方案，但也存在疗效不确切、严重并发症发生率较高等问题。故本文就难治性鼻咽癌目前国内外的治疗研究进展做一综述。

二甲双胍联合放射线照射对鼻咽癌细胞CNE-1增殖的影响

目的:探讨二甲双胍联合放射线照射对鼻咽癌细胞CNE-1增殖的影响。方法:分别给予鼻咽癌细胞CNE-1二甲双胍(5m M)、2Gy放射线照射、二甲双胍(5 m M)联合2Gy放射线照射处理后,采用MTT实验、克隆形成实验检测和比较其细胞增殖抑制率和克隆形成抑制率。结果:MTT实验结果显示:与二甲双胍组或2Gy放射线照射组相比,二甲双胍联合放射线照射组细胞增殖抑制率显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);克隆形成实验结果显示,与二甲双胍组或2Gy放射线照射组相比,二甲双胍联合放射线照射组细胞克隆形成抑制率显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:二甲双胍联合放射线照射能够有效的抑制鼻咽癌细胞CNE-1的增殖。

肿瘤相关巨噬细胞在头颈鳞状细胞癌中的作用及治疗策略研究进展

肿瘤相关巨噬细胞(TAM)是肿瘤微环境中最重要的免疫细胞之一。已有研究证实,TAM具有高度可塑性,可随肿瘤微环境的变化而极化为免疫抑制的M2表型,在恶性肿瘤的发生、发展、侵袭和转移等阶段中发挥促进作用。大量文献表明TAM与头颈鳞状细胞癌(HNSCC)的不良预后相关,近年来关于靶向TAM治疗HNSCC的研究也逐渐深入,现就TAM在肿瘤发生、发展中的作用及靶向治疗策略做一综述。