慢性病毒性肝炎药物治疗新方案研究

目的全国多中心对照临床研究,观察博尔泰力(苦参素)注射液治疗慢乙肝的疗效及安全性,联合Ara-amp治疗能否提高疗效,并与干扰素及一般保肝药对照,探讨治疗慢乙肝的安全有效药物及治疗方案。方法:对196例慢乙肝病人分苦参素治疗组,和Ara-amp联合治疗组,干扰素组及保肝药组,观察治疗三个月的疗效及停药后随访半年及一年的远期疗效,并观察其毒副作用。结果:治疗三个月时,苦参素治疗组ALT复常率,HBeAg及HBV DNA阴转率分别为36.5％、36.5及42.3％,停药后半年及一年ALT复常率HbeAg及HBVDNA阴转率分别为36.7％、40.8％、41.7％及44.7％、42.6％、31.9％。与干扰素组疗效无差异,联合Ara-amp似可提高疗效但无统计学差异。苦参素治疗组无明显副作用。结论:苦参素注射液治疗慢乙肝安全有效、疗效和干扰素相近。

慢性病毒性肝炎病人Tac蛋白变化及其意义探讨

用间接免疫荧光法检测28例慢性病毒性肝炎病人外周血单个核细胞Tac蛋白之表达,发现各型慢肝病人Tac蛋白之表达均明显低于正常人,且与其LAK细胞活性之低下呈正相关,而认为,Tac表达不良可能是其LAK细胞活性低下之主要原因。提示慢肝病人存在免疫缺损,如提高其Tac蛋白之表达则可能提高其免疫治疗之疗效。

慢性病毒性肝炎的抗病毒治疗

在目前所确定的A～E 5种肝炎病毒中,可发展为慢性肝炎的是HBV、HCV及其与其他型病毒的共同感染.HBV及HCV感染所致的慢性乙型肝炎(以下简称慢乙肝)及慢性丙型肝炎(以下简称慢丙肝)可发展为肝硬化及肝癌,预后更差,甚至危及生命.因而慢性肝炎的治疗非常重要.慢性肝炎的治疗应包括抗病毒、调节免疫、改善肝功能及防治肝纤维化,其中抗病毒是最关键的治疗,可阻断病情的发展,减少及延缓肝硬化及肝癌的发生,提高生活质量,延长患者生命.

乙型肝炎病毒基因组准种与变异特点的研究

探讨乙型肝炎病毒(HBV)基因组异质性及其生物学意义。以已知HBV基因序列为依据 ,设计特异性多聚酶链反应 (PCR)引物 ,自 2例慢性HBV感染患者外周血血清中扩增HBV基因组序列 ,克隆入pGEMTeasy质粒 ,随机挑选克隆进行DNA测序并加以比较。测序结果发现 ,来源不同的 5株HBV全基因组核苷酸序列的一致率为 93 6 % ,不同克隆的 4个开放读码框架长度有明显区别 ,氨基酸序列中存有移框、缺失、替换等多种变异类型。说明来源于同一患者的HBV基因组序列之间存在有较明显的变异现象 ,在患者体内构成了准种群。

慢性乙型肝炎患者体内乙型肝炎病毒准种特点的初步研究

探讨乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）在慢性患者中存在状态． 以 ＨＢＶ基因序列为依据，设计特异性多聚酶链反应（ＰＣＲ）引物．自２例慢性患者体内扩增ＨＢＶ全Ｓ基因片段，克隆入Ｔ载体．限制片段长度多态性（ＲＦＬＰ）法确定ＨＢＶ的变异现象，ＤＮＡ测序确定病毒的变异程度。质粒ＥｃｏＲＩ酶切ＲＦＬＰ结果提示自２例患者血清中克隆出的２９和２８个阳性克隆中各有５种不同的长度带型，ＰＣＲ产物ＸｈｏＩ酶切ＲＦＬＰ结果则表现为高度保守，测序结果发现ＨＢＶ体内毒株碱基序高度一致，同一患者两株全Ｓ区序列测序结果表明ＤＮＡ序列的同源性大于９７％。本结果提示ＨＢＶ慢性患者体内有ＨＢＶ准种共存，且呈现出一定的优势克隆现象。

乙型肝炎病毒逆转录酶区基因序列准种与变异特点

To investigate the HBV quasispecies population in the patients with chronic HBV infection,a set of specific primers was synthesized according to DNA sequence of HBV found in China The reverse transcriptase(RT) region in polymerase gene was amplified by PCR method from the sera of 3 patients with chronic HBV infection,and then the PCR products were subcloned into pGEM Teasy vectors 13 clones were sequenced Sequence comparison of the selected clones was made to find out the differences After being compared,11 sequences of RT were found different The different rates of RT coding nucletide sequences, RT and HBsAg amino acid sequences of the 11 clones were 5 1%,4 9% and 7 5% respectively Many mutation types,including point substitution and deletion mutation,were found in this region There are quasispecies population and defective HBV genome in patients with chronic HBV infection.

HBsAg与抗-HBs同时阳性者体内S基因序列分析

目的 报告乙型肝炎病毒 (HBV)表面抗原 (HBsAg) /表面抗体 (抗 -HBs)同时阳性患者血清中S区编码碱基序列及其氨基酸序列的变异特点。方法 以adr亚型的HBV基因序列为依据 ,设计特异性多聚酶链反应 (PCR)引物 ,自 2例HBsAg/抗 -HBs均阳性的患者体内扩增HBV全S基因片段 ,克隆入pGEMTasy质粒 ,DNA测序确定病毒的变异特点。结果 测序结果发现双阳患者与HBsAg阳性患者血清中的HBV全S基因比较 ,核苷酸序列有 4个核苷酸位点 (0 3% )的替换突变 ,表面抗原氨基酸序列无特异性替换突变 ,但HBV多聚酶的间隔区氨基酸序列有 3个位点的特异性替换突变。结论 HBV长期携带者体内有HBV准种共存 :HBsAg与抗 -HBs同时阳性的原因不能归因于病毒的变异 。

乙型肝炎病毒前C/C基因准种与变异特点的研究

以乙型肝炎病毒 (HBV)前C/C基因异质性来探讨在慢性感染者体内是否存在HBV准种。以中国株HBV基因序列为依据 ,设计特异性多聚酶链反应 (PCR)引物 ,自 4例慢性HBV感染患者血清中扩增HBV前C/C基因序列 ,克隆入pGEMTeasy载体 ,每例患者挑选 5个克隆测序以比较病毒的变异程度。测序结果发现同一患者前C/C基因碱基序列之间的同源性大于 98% ,但存有G83→A替换、C抗原内部缺失、移框突变等多种变异类型。结果提示 ,HBV长期携带者体内有HBV准种共存 ,推测前C/C区的多种变异可能与感染慢性化有关。

硕大利什曼原虫无鞭毛体蛋白的基因克隆与序列分析

[目的 ]克隆硕大利什曼原虫无鞭毛体蛋白 (amastin)的编码基因序列。 [方法 ]应用核苷酸序列数据库 (GenBank)和表达序列末端片段数据库 (dbEST)的计算机检索与DNA文库的杂交筛选方法。 [结果 ]从dbEST数据库中获得一段 30 9nt的来源于硕大利什曼原虫的基因片段 ,据此设计探针 ,筛选硕大利什曼原虫的DNA文库 ,获得硕大利什曼原虫无鞭毛体蛋白的编码基因。其开放读码框架由 5 5 2个核苷酸组成 ,编码产物由183个氨基酸残基组成。序列分析表明 ,硕大利什曼原虫与锥虫无鞭毛体蛋白一级结构的同源性为 2 3 5 %。 [结论 ]克隆的基因系硕大利什曼原虫表面蛋白编码基因 ,即无鞭毛体蛋白的编码基因。

乙型肝炎病毒C基因启动子区异质性检测初步研究

目的 以乙型肝炎病毒 (HBV)C基因启动子 (CP)变异来探讨HBV准种的存在意义。方法 设计特异性多聚酶链反应 (PCR)引物 ,自 9例慢性HBV感染患者外周血血清中扩增HBVCP序列 ,克隆入pGEMTeasy质粒 ,随机挑选 37个克隆进行DNA测序以确定病毒的变异程度。结果 测序发现HBVCP序列是变异的高发区 ,在直接重复序列 (DR)I上游存有一缺失突变高发 (48 7% ,18/37)区 ,缺失突变与替换突变在TATA样盒TA2、TA3区发生率较高 ,而TA4极为保守。结论 CP区内有一缺失高变区 ,TA2、TA3的变异影响前C蛋白的表达 ,但该区的变异不影响前基因组RNA的转录。结果提示 。

乙肝病毒基因型与患者临床预后关系的研究

研究不同HBV基因型感染者临床特征的异同。选取慢性HBV感染者297例,用特异性引物PCR法测定其HBV基因型,并比较不同基因型者在临床各方面表现有何异同。297例样本中B型占12．8％,C型占87.2％, 未发现其他基因型。B型者与C型者相比,年龄≤35岁者较多,血清ALT、AST水平较低,两组的血清HBVDNA水平无明显差异。B型在慢性HBsAg携带者、慢性肝炎、肝硬化及肝癌患者中所占比例逐步下降,而C型所占比例则逐步上升。B型者HBeAg阳性率低,HBeAg血清学转换率高。B型、年龄小者及女性者容易呈慢性HBsAg携带者状态。在17例死于肝病者中,B型者死亡时感染HBV时间较长。B型者对抗病毒治疗应答比C型者好。C型HBV 感染与严重肝脏疾病的发生有关,感染B型HBV者临床预后较好,对抗病毒治疗的应答较好。

大鼠肝再生增强因子基因组DNA的克隆化与序列分析

根据大鼠肝再生增强因子 (Augmenterofliverregeneration ,ALR)cDNA序列设计特异性引物 ,采用多聚酶链反应 (PCR)法自Wistar大鼠基因组DNA中扩增出大鼠ALR基因组DNA ,全长为 15 0 8nbp ,结构为 3个外显子和 2个内含子 ,外显子长度分别为 18bp、197bp和 16 3bp ,各编码 6个、6 4个和 5 5个氨基酸残基 ,长度与小鼠、人类ALR的外显子一致。

小鼠白细胞介素-18的cDNA克隆及在真核细胞中初步表达的研究

克隆小鼠白细胞介素 18(IL 18)编码区的cDNA ,并实现在真核细胞中的表达。方法 :用小鼠白细胞介素 18(mIL 18)的cDNA核苷酸序列 ,设计、合成基因序列特异性引物 ,应用逆转录多聚酶链反应RT PCR ,以植物血凝 (PHA)和细菌脂多糖 (LPS)刺激的小鼠非粘附性脾细胞的mRNA为模板 ,扩增获得全长mIL 18,转染小鼠成纤维细胞系SVT2 ,并进行IL 18生物学活性的检测。结果 :经测序证实获得的小鼠IL 18的cDNA序列与文献报道的mIL 18的cDNA序列完全一致。构建的小鼠IL 18的重组表达载体在转染小鼠成纤维细胞SVT2后 ,获得具有生物学活性mIL 18的分泌表达。结论 :克隆了小鼠IL 18的cDNA ,并实现了在真核细胞中的表达。

单磷酸阿糖腺苷联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎疗效观察

研究单磷酸阿糖腺鞋联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎的临床疗效。选择62例慢性乙型肝炎患者,分为两组,A组用单磷酸阿糖腺苷联合胸腺肽,B组用干扰素α-2a,评估两组肝功能及乙肝病毒复制近、远期疗效。两组ALT复常率、HBeAg及HBVDNA阴转率均无明显差异(P>0.05)。初步肯定了单磷酸阿糖腺苷联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎抗乙肝病毒的效果。

乙型肝炎病毒X基因准种特点的研究

以乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）Ｘ基因序列的异质性表现来探讨ＨＢＶ准种在 慢性感染者中的存在状态。以中国株ＨＢＶ基因序列为依据，设计特异性多聚酶链反应引物， 自９例慢性ＨＢＶ感染患者血清中扩增ＨＢＶ Ｘ基因，克隆入ｐＧＥＭ Ｔｅａｓｙ质粒，随机挑选克隆进行Ｄ ＮＡ测序以确定病毒的变异程度。３７例测序结果提示来源于不同患者ＨＢＶ Ｘ基因序列高度保守 ，但每个序列均不一致。Ｘ区除了存在广泛的碱基点替换突变外，序列的缺失突变占测序克 隆总数的５１．４％（１９／３７）；氨基酸缺失及移框突变多发生于１２３位氨基酸残基之后，可导致Ｘ蛋 白多种羧基端形式。结果提示ＨＢＶ长期携带者体内有ＨＢＶ准种共存，Ｘ区内存在热点缺失突变区，该区突变结果可能影响Ｘ蛋白反式激活功能。

杜氏利什曼原虫热休克蛋白70的DNA疫苗表达载体构建及体内应答研究

以多聚酶链反应技术扩增获得了杜氏利什曼原虫（Ｌ．ｄｏｎｏｖａｎｉ）热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）全长基因序列，构建ＤＮＡ疫苗表达载体ｐＶＲ１０２０－ＨＳＰ７０。以脂质体法体外转染小鼠成纤维细胞系ＳＶＴ２，应用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法证实构建的表达载体具有表达ＨＳＰ７０的能力。以１０μｇ的ＤＮＡ疫苗表达载体质粒经肌肉、皮下注射进行免疫，２周后即可出现抗－ＨＳＰ７０的抗体应答。建立了ＤＮＡ疫苗免疫应答的模型。

核苷类抗乙肝病毒药勿轻易停

乙肝患者都希望尽快治愈或者停药，但很遗憾，目前乙肝没有治愈的标准。治疗只能抑制病毒，病毒DNA没有消失，表面抗原没有消失，随时可能病毒复发，所以乙肝没有治愈的标准。

自身免疫性肝炎的诊断——附一例报告

为加强对自身免疫性肝炎的认识 ,报道一例除外其它肝损害病因 ,经血清生化学 (肝功能、免疫球蛋白 ,等 )、自身抗体和肝组织病理学证实的儿童自身免疫性肝炎。不明原因的肝脏损害 ,自身免疫性肝炎应作为鉴别诊断之一。及时检测血清生化学、自身抗体、肝组织病理并除外其它肝损害病因将有助于诊断。

注射用谷胱甘肽对慢性病毒性肝炎和中毒性肝炎病人疗效及安全性的临床研究

目的评价注射用谷胱甘肽对慢性病毒性肝炎和中毒性肝炎病人的临床疗效及安全性。方法122例病毒性肝炎和中毒性肝炎患者随机分为两组,治疗组61例,iv谷胱甘肽1200mg,qd,对照组61例,iv门冬氨酸钾镁3支(每支10ml),qd,开放组42例,iv谷胱甘肽1200mg,qd,疗程4周。结果4周后,治疗组食欲不振、乏力、肝区疼痛、腹胀及黄疸显著减轻(P<0.01)。ALT由(485.91±442.65)U·L-1降到(54.30±39.72)U·L-1(P<0.01);AST由(262.95±288.71)U·L-1下降到(39.68±28.68)U·L-1(P<0.01);总有效率为86.89%。对照组与治疗组类似,总有效率为81.97%(P>0.05)。2组均未发现明显的不良反应。注射用谷胱甘肽治疗的103例,总有效率为92.23%。结论注射用谷胱甘肽治疗病毒性肝炎和中毒性肝炎是安全、有效的。