脂肪间充质干细胞外泌体在妇科疾病的应用及进展

随着干细胞研究的发展,脂肪间充质干细胞(adipose derived mesenchymal stem cell,ADSC)和脂肪间充质干细胞外泌体(adipose derived mesenchymal stem cell exosome,ADSC-Exo)成为妇科领域的研究热点。ADSC是一类来源于脂肪组织的间充质干细胞,与其他间充质干细胞一样具有较高的增殖能力和多向分化潜能,ADSC-Exo还可通过释放的细胞外囊泡传递各种生物活性分子,如微小RNA、蛋白质和细胞因子,对目标细胞发挥一定的调节作用。ADSC-Exo在妇科领域的应用日益受到关注。有研究表明,ADSC-Exo可以促进子宫内膜的再生和修复,为宫腔粘连和不孕症的患者带来了希望。此外,一些研究提到ADSC-Exo在慢性子宫内膜炎、卵巢功能不全、多囊卵巢综合征和妇科恶性肿瘤等疾病的治疗中也具有一定的潜力。综述ADSC-Exo在妇科领域的应用及进展。

细胞色素芳香化酶P-450在正常、子宫内膜异位症子宫内膜的表达及意义

目的 :探讨细胞色素芳香化酶P - 45 0在子宫内膜异位症 (内异症 )发病中的作用 ,检测子宫内膜细胞色素芳香化酶P - 45 0的表达用于诊断内异症的可行性。方法 :应用免疫组化方法检测正常子宫内膜和内异症的在位及异位内膜细胞色素芳香化酶P - 45 0的表达。结果 :细胞色素芳香化酶P - 45 0在正常子宫内膜无表达 ,在内异症的在位和异位内膜均有强表达 ,增殖期与分泌期无差别。检测子宫内膜细胞色素芳香化酶P - 45 0的表达 ,用于诊断内异症的敏感度为 91 5 % ,特异度为 10 0 % ,阳性预测值为 10 0 %。内异症子宫内膜细胞色素芳香化酶P - 45 0的表达与AFS分期无相关性。结论 :子宫内膜细胞色素芳香化酶P - 45 0分泌增加促进内异症的发生 ;内异症子宫内膜细胞色素芳香化酶P -45

子宫动脉栓塞术治疗子宫肌瘤临床观察

目的 研究经导管子宫动脉栓塞术治疗子宫肌瘤的临床效果。方法 选择子宫肌瘤患者2 1例 ,采用Seldinger技术行双侧子宫动脉插管 ,造影确认后注入PVA栓塞颗粒 ,阻断肌瘤血液供应。分别于术后 3个月、6个月观察疗效。结果 子宫动脉栓塞术治疗后 ,肌瘤体积缩小 (P <0 .0 1) ,月经恢复正常 ,贫血、压迫症状改善。保留了子宫和卵巢完整的生理功能。

肝细胞生长因子对卵巢癌细胞侵袭的促进作用及信号转导途径

背景与目的:肝细胞生长因子(hepatocytegrowthfactor,HGF)与其受体c-met特异性结合,激活多条信号转导通路,在调节肿瘤侵袭、转移和血管形成中起重要作用。HGF和c-met在卵巢癌组织中异常表达。本研究拟探讨HGF在卵巢癌的侵袭中的作用、可能机制及其信号转导途径。方法:Boyden小室体外侵袭实验检测HGF对卵巢癌SKOV3细胞穿透人工重组基底膜能力的影响;应用荧光实时定量逆转录聚合酶链反应(real-timereversetranscriptionpolymerasechainreaction,realtimeRT-PCR)、Westernblot和流式细胞术检测HGF和核转录因子(nuclearfactorκB,NFκB)抑制剂吡咯醛二硫氨基甲酸(pyrrolidinedithiocarbamate,PDTC)作用前后SKOV3细胞c-met、明胶酶B(gelatinaseB,MMP-9)mRNA和蛋白表达的变化;采用免疫细胞化学方法和Westernblot检测HGF对SKOV3细胞核NF&B蛋白的影响。结果(:1)HGF作用后,SKOV3细胞侵入基底膜的细胞数为343±13,较对照组(167±11)明显升高(P<0.01),而PDTC可以减弱HGF的促进作用(241±10,P<0.01)。(2)HGF作用后,SKOV3细胞MMP-9mRNA水平升高(5.66±0.10)倍(P<0.01),而经PDTC处理后只升高(2.75±0.80)倍(P<0.01),c-metmRNA无变化。(3)HGF作用后,SKOV3细胞c-met、MMP-9蛋白阳性率为(96.6±2.0)%和(74.6±4.4)%,较对照组(73.3±2.4)%和(16.0±2.9)%显著增高(P<0.01),c-met、MMP-9蛋白表达强度分别为2.84±0.18和2.94±0.13,较对照组1.65±0.19和0.54±0.18显著增高(P<0.01)。(4)PDTC可显著抑制HGF对SKOV3细胞蛋白表达的促进作用,MMP-9蛋白阳性率和蛋白表达强度分别为(25.8±3.7)%和0.87±0.14,与对照组和HGF组的差异有显著性(P<0.05);对c-met蛋白表达无影响(P>0.05)。(5)HGF作用后细胞核NF&B蛋白表达随时间延长而增加,于1h达高峰,表达强度为1.16±0.21,较无HGF作用的0.42±0.11明显升高(P<0.01),PDTC可显著抑制HGF对NF&B的活化作用,使NF&B的表达强度降为0.38±0.12(P<0.01)。结论:HGF促进SKOV3细胞的侵袭作用,其机制可能为HGF通过c-met调控NF&B的活化,间接激活MMP-9的基因,促进MMP-9蛋白的合成。

子宫内膜整合素β_3和细胞外基质的变化及与不孕症的关系

对生育组３１例，原因不明不孕组３４例采用免疫组化方法检测整合素β３及细胞外基质纤维粘连蛋白（ＦＮ）、层粘连蛋白（ＬＮ）、Ⅳ型胶原纤维（ＣＬ）在分泌期子宫内膜上的表达，探讨其变化规律及在调控妊娠中的作用。结果显示整合素β３在生育组腺上皮细胞分泌中期出现，持续至分泌晚期，而不孕组分泌期无表达；细胞外基质在生育组分泌中期呈强表达，早期次之，晚期较弱；不孕组在分泌各期表达均高于生育组。结论认为整合素β３ＦＮ、ＬＮ和Ⅳ型ＣＬ在分泌期子宫内膜上呈周期性变化参与子宫内膜的功能变化及胚泡的着床环节，其异常表达可致着床失败而不孕。

反义c-met基因对人卵巢癌SKOV3细胞增殖侵袭的影响

目的:用构建的c-met反义质粒阻断肝细胞生长因子(hepatocytegrowthfactor,HGF)/c-met信号传导,探讨c-met信号传导阻滞对卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响及其机制。方法:将c-met基因反向克隆入真核表达载体pcDNA3·1中,酶切鉴定结果。用脂质体法将c-met反义基因转染人卵巢癌SKOV3细胞,G418筛选获得阳性克隆,RT-PCR检测转染前后SKOV3细胞中c-met、基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)mRNA的表达,流式细胞仪检测转染前后SKOV3细胞中c-met和MMP-9蛋白阳性细胞数,应用细胞生长曲线和Boyden小室观察转染前后细胞的增殖和侵袭作用。结果:获得反向构建的c-met真核表达载体,c-met反义RNA转染卵巢癌细胞后,c-met和MMP-9mRNA分别减少0·24±0·03倍(P=0·001)和0·70±0·03倍(P=0·002);c-met和MMP-9蛋白阳性细胞率分别为(27·17±1·23)%和(17·32±0·46)%,较对照组(98·92±0·62)%和(36·47±2·94)%显著降低(P=0·000、0·007);卵巢癌细胞侵入基底膜的细胞数为4·5±1·5,较对照组(17±2·0)明显减少(P=0·000),细胞的增殖明显减慢。结论:c-met受体基因表达在卵巢癌生长和转移中起重要作用,阻断c-met的信号传导可以明显抑制卵巢癌细胞的增殖,降低肿瘤生长转移的能力,为卵巢癌的基因治疗提供了一定的实验依据。

腹腔镜手术意外发现上皮性卵巢癌不同处理方式的预后分析

目的：回顾性分析腹腔镜手术中意外发现的上皮性卵巢癌患者不同处理方式与预后的关系。方法：回顾2002年1月-2010年12月在大连市妇产医院因卵巢肿瘤行腹腔镜手术经病理证实为上皮性卵巢癌的患者27例（A组）,其中腹腔镜术中中转开腹行分期手术10例（A1组）,腹腔镜单纯附件切除或囊肿剔除手术,术后5~10天后行开腹再分期手术10例（A2组）,腹腔镜下同时完成分期手术7例（A3组）。选取同期早期上皮性卵巢癌开腹手术患者53例（B组）。收集患者的临床资料、术中和术后的治疗情况并随访预后情况。比较不同的手术方式对预后的影响。结果：腹腔镜术中意外发现卵巢非良性肿瘤的发生率为1.91%（72/3773）。A组与B组生存时间无差别（P〉0.05）。A组不同时间和不同途径行分期手术生存时间无差别（P〉0.05）。腹腔镜手术中囊肿破裂对生存时间无影响（P〉0.05）。结论：腹腔镜卵巢良性肿瘤手术中意外发现恶性肿瘤的发生率较低,可疑病灶需进行术中冰冻病理检查,及时发现卵巢恶性肿瘤,术中尽量避免肿瘤破裂,腹腔镜术中发现的上皮性卵巢癌尽早进行规范的分期手术不影响患者的预后,技术允许的条件下可以进行腹腔镜分期手术。

肝细胞生长因子对卵巢癌血管生成因子的影响及信号传导途径

目的研究肝细胞生长因子(HGF)对人卵巢癌SKOV3细胞血管内皮生长因子的影响及其信号传导机制。方法将不同浓度、不同作用时间的HGF和核转录因子(NFkB)抑制剂PDTC刺激培养的SKOV3细胞;应用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测卵巢癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的变化;采用蛋白印迹方法检测卵巢癌细胞VEGF蛋白和核蛋白NFkB的变化。结果HGF促进卵巢癌细胞VEGF mRNA和蛋白的表达,且随时间和浓度增加作用增强,PDTC可以抑制HGF的刺激作用;HGF促进细胞核NFkB蛋白的活化,且随时间延长作用增强,于刺激1 h达高峰,PDTC可以抑制HGF对NFkB的活化作用。结论HGF通过NFkB途径在核酸和蛋白水平调节卵巢癌细胞分泌VEGF。

Bcl-2和Bax在子宫内膜异位症的表达及意义

目的 研究正常人子宫内膜和子宫内膜异位症 (内异症 )的在位内膜和异位内膜Bcl- 2、 Bax的表达和细胞凋亡率 ,探讨细胞凋亡在月经周期变化和内异症发生中的作用。方法 应用免疫组织化学方法和流式细胞学检测技术 ,检测 6 0例正常人子宫内膜和 4 7例内异症患者子宫内膜Bcl - 2、Bax的表达及细胞凋亡率。结果 ①正常子宫内膜Bcl- 2在增生期表达进行性增强 ,在分泌期无表达。Bax在增生期弱表达 ,在分泌期表达增强 ;②Bcl- 2在内异症的在位内膜、异位内膜的表达增生期强于分泌期 ,异位内膜强于在位内膜。Bax在内异症的在位内膜、异位内膜的表达增生期弱于分泌期 ,异位内膜弱于在位内膜 ;③分泌期正常子宫内膜的凋亡率高于内异症的在位内膜和异位内膜。结论 Bcl- 2、Bax参与调控正常子宫内膜形态与功能变化 ,其异常表达导致子宫内膜细胞凋亡失调 ,是内膜异位症发生的分子机制之一。

反义c-met基因对人卵巢癌细胞血管生成因子的影响

目的:用构建的c-met反义质粒阻断肝细胞生长因子(HGF)/c-met信号传导,探讨c-met信号传导阻滞对卵巢癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法:将c-met基因反向克隆入真核表达载体PcDNA3.1中,酶切鉴定结果。用脂质体法将c-met反义基因转染人卵巢癌SKOV3细胞获得阳性克隆,RT-PCR检测转染前后SKOV3细胞中c-met、VEGF mR-NA的表达,蛋白印迹方法检测转染前后SKOV3细胞中VEGF蛋白的变化。结果:获得反向构建的c-met真核表达载体,c-met反义RNA转染卵巢癌细胞后,c-met和VEGF mRNA表达显著降低,VEGF蛋白表达量显著减少。结论:阻断c-met的信号传导可以明显抑制卵巢癌细胞VEGF的分泌,降低肿瘤生长转移的能力,为卵巢癌的基因治疗提供了一定的实验依据。

腹腔镜手术治疗子宫腺肌病45例报告

目的:探讨腹腔镜手术治疗子宫腺肌病的临床效果。方法:回顾分析腹腔镜手术治疗45例子宫腺肌病患者的临床资料,观察手术前后月经周期、经期、经量、痛经情况,血红蛋白的变化,以及妊娠情况。结果:术后月经周期和经期无明显变化(P>0.05),月经量恢复正常,合并贫血的患者血红蛋白显著升高(P<0.05),痛经患者疼痛明显减轻(P<0.05)。结论:腹腔镜手术治疗子宫腺肌病近期疗效确切,操作简单,对要求保留生育功能的患者是很好的选择。

环氧合酶-2与子宫内膜异位症疼痛的相关性研究

目的检测环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在子宫内膜异位症(endometrosis,EMs)患者在位和异位内膜的表达以及血清中的水平,探讨COX-2与EMs疼痛的关系。方法通过免疫组化方法检测60例EMs和29例正常子宫内膜C0X-2蛋白的表达,ELISA方法测定血清COX-2水平,视觉模拟评分法对月经期疼痛进行评分。结果 EMs异位内膜COX-2的表达明显高于在位内膜(P<0.05),在位内膜高于正常子宫内膜(P<0.05);EMs在位子宫内膜COX-2的表达和血清COX-2的水平变化相一致,并与EMs的疼痛程度成正相关性。结论 EMs患者子宫内膜和血清中C0X-2异常高表达,可能参与EMs的发生及疼痛的产生。

肝细胞生长因子及其受体c-met在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及意义

目的:研究肝细胞生长因子(hepatocytegrowthfactor,HGF)和cmet蛋白在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达以及与临床病理特征的关系。方法:应用免疫组织化学SP法对45例卵巢上皮性恶性肿瘤及10例卵巢上皮性良性肿瘤组织中HGF和cmet蛋白的表达进行定位分析;应用蛋白印迹法检测HGF、cmet蛋白在卵巢上皮性肿瘤中的表达。结果:在卵巢癌组织中,HGF在上皮细胞的表达强于间质细胞,cmet在上皮细胞强表达,间质细胞无表达。HGF和cmet蛋白在卵巢癌组织中阳性率分别为60.0%(27/45)和73.0%(33/45),较良性肿瘤组织的阳性率20.0%(2/10)和50.0%(5/10)显著升高,P值分别为0.000和0.000。手术病理分期Ⅲ～Ⅳ期者HGF和cmet蛋白表达的阳性率为70.4%(19/27)和88.9%(24/27),较Ⅰ～Ⅱ期者的38.9%(7/18)和50.0%(9/18)显著升高,P值分别为0.048和0.000。淋巴结转移者阳性率分别为78.6%(11/14)和92.8%(13/14),较无淋巴结转移者阳性率51.6%(16/31)和64.5%(21/31)升高显著,P值分别为0.025和0.000。HGF和cmet蛋白表达阳性率与年龄和病理分级无关,P值分别为0.436、0.549、0.465和0.124。HGF和cmet蛋白相对表达强度在卵巢癌组织中为1.29±1.25和1.57±1.25,在良性肿瘤组织中为0.17±0.34和0.44±0.46,两组比较差异有统计学意义,P值分别为0.000和0.007。在卵巢癌组织中HGF和cmet蛋白的表达呈正相关性,P=0.009。结论:卵巢上皮性肿瘤组织中存在HGF和cmet蛋白的表达,HGF和cmet与卵巢癌的发生、侵袭和转移密切相关。

活跃期杜冷丁及催产素联合应用对产程的影响

活跃期杜冷丁及催产素联合应用对产程的影响王化丽张丽峰钟丽华鞍钢铁东医院妇产科（１１４００２）我们于１９９６年１～１０月对活跃期联合应用催产素和杜冷丁的效果进行了观察，现将结果报告如下。１对象与方法１１对象均为在我院分娩的初产妇，单胎头位足月妊娠，无...

老年子宫颈高危型HPV感染与子宫颈病变的相关性分析

目的 探讨人乳头瘤病毒（HPV）在老年妇女（≥60岁）的感染状态及其在老年子宫颈病变中的意义.方法 对2013年1月至2013年10月于中国医科大学附属第一医院妇科门诊自愿行子宫颈病变筛查的老年妇女（502例）行子宫颈HPV筛查,并对高危型HPV阳性且肉眼可疑子宫颈病变或子宫颈液基薄层细胞学检查（TCT）提示异常者行阴道镜下子宫颈活检.结果 84例检出高危型HPV感染,总感染率为16.73％（84/502）.39例行阴道镜下子宫颈活检,其中确诊子宫颈癌5例（5.62％）;CINⅡ～Ⅲ10例（11.24％）;CIN Ⅰ 5例（5.62％）;湿疣1例（1.12％）;正常或慢性子宫颈炎18例（20.22％）.引起CIN以上级别的子宫颈病变HPV亚型感染主要为HPV 16、31、33、52和53;其中5例子宫颈癌中均存在HPV16感染.结论 由于老年个体的特殊性,在老年患者中HPV感染阳性率下降的同时,其致病率明显上升,故对老年HPV阳性患者应引起足够重视.

先兆流产患者血浆中肿瘤坏死因子α检测及意义

先兆流产患者血浆中肿瘤坏死因子α检测及意义王化丽杜明文陆义玲鞍钢铁东医院妇产科（１１４００２）肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）是巨噬细胞和激活的淋巴细胞产生的一种细胞因子，不仅对人和动物的多种肿瘤细胞有细胞毒性和细胞静止作用，而且是机体炎症和免疫的重要调节...

HPV感染对P53、TGF-β_1表达的影响及在子宫颈癌发病中的意义

目的检测人乳头瘤病毒HPV16和抑癌基因P53蛋白及转化生长因子TGFβ1在宫颈癌的表达,并分析HPV16对P53和TGFβ1表达的影响。方法应用免疫组化SP法检测56例宫颈癌和20例非宫颈癌组织中HPV16、P53和TGFβ1蛋白的表达。结果HPV16蛋白在宫颈癌和非宫颈癌组的阳性表达率分别为571%和50%,宫颈癌组明显高于非宫颈癌组(P<005)。在宫颈癌HPV16感染与非感染组P53蛋白的表达率分别为406%和83%(P<005);TGFβ1蛋白表达率分别为219%和625%(P<005)。HPV16感染组P53蛋白在病理分级Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级的表达分别为222%、450%和667%,Ⅰ级和Ⅲ级间差异有显著性(P<005)。TGFβ1蛋白在病理分级Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级的表达分别为333%、200%和333%,TGFβ1蛋白在病理分级的表达差异无显著性(P>005)结论HPV感染是宫颈癌发病的重要因素之一,其致癌机制可能通过变型P53蛋白表达上调,TGFβ1蛋白表达下调,引起宫颈细胞增殖失控,发生恶性转化。

米非司酮对人早孕蜕膜组织细胞凋亡的影响

细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）同胚泡植入及胎盘发育密切相关，为了进一步探讨米非司酮终止早孕的机制，本文随机选择要求人工流产的妇女２５名，服药组１３名，对照组１２名。应用流式细胞仪对经碘化丙锭（ＰＩ）染色后的蜕膜组织细胞ＤＮＡ进行分析。结果两组细胞ＤＮＡ直方图上均出现细胞凋亡峰，其细胞所占比例（ｘ±ｓ）％服药组为６．８２±３．０９，对照组为３．４３±２．１３，服药组明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）。二倍体峰细胞比例服药组为７６．００±７．０９，对照组为８４．４５±３．８４，服药组低于对照组（Ｐ＜０．０５）。四倍体峰细胞比例两组分别为３．７０±１．６４、３．２９±０．６７，无明显差别（Ｐ＞０．０５）。结果表明人早孕蜕膜组织中存在着细胞凋亡，米非司酮终止早孕的作用可能是通过拮抗孕激素作用促进蜕膜细胞凋亡而实现的。

辽宁地区12307例女性宫颈高危型人乳头瘤病毒感染筛查结果分析

目的分析辽宁地区12 307例女性宫颈高危型人乳头瘤病毒(HPV)的筛查结果,了解该地区不同年龄段女性高危型HPV的感染。方法对2013年1月-2013年10月在中国医科大学附属第一医院妇科门诊自愿行宫颈病变筛查的12 307例女性行HPV筛查,HPV测定采用AB I2Prism7000 PCR检测仪,由专业妇科医师采用专用HPV取样器按严格规范方法采集标本,并于1周内完成检测。对不同年龄段女性的HPV检出率及感染亚型进行统计学分析。结果 1辽宁地区女性HPV的感染高峰年龄为≤30岁;2辽宁地区女性高危型HPV感染常见亚型(感染率>1%)由高到低依次为16、52、58、53、33、18及31;3HPV18感染高发于≤30岁女性;4高危型HPV单一亚型感染率随年龄的增加呈下降趋势;多重混合高危亚型的HPV感染率在≥60岁的老年组有所升高。结论辽宁地区不同年龄段女性高危型HPV感染具有特征性分布规律,针对性的进行宫颈癌筛查十分必要。

子宫内膜异位症在位内膜神经纤维分布与疼痛关系的研究

目的:检测子宫内膜异位症(EMT)在位内膜中的神经纤维蛋白基因产物9.5(PGP9.5)、P物质(SP)和神经生长因子(NGF)的分布,探讨其与疼痛的关系。方法:选择EMT患者45例,按视觉模拟评分(VAS)法将患者分为EMT疼痛组(24例)和EMT无痛组(21例),其中轻度疼痛者4例,中度疼痛者7例,重度疼痛者13例;另选择同期患子宫肌瘤住院的患者25例作为对照组。应用免疫组化SP方法分别检测子宫内膜的PGP9.5标记的神经纤维密度(条/mm2)和SP、NGF的平均光密度(OD)值,并与VAS评分进行相关性分析。结果:EMT疼痛组中PGP9.5的密度和SP、NGF的OD值均高于EMT无痛组和对照组(P<0.05)。EMT重度疼痛组中PGP9.5的密度和SP、NGF的OD值明显高于轻度和中度疼痛组(P<0.05)。同时,EMT疼痛组中PGP9.5的密度和SP、NGF的OD值与患者的VAS疼痛评分呈正相关(r=0.745,0.624,0.628;P<0.05)。结论:EMT患者在位内膜存在神经纤维的异常分布。EMT中神经纤维的表达与疼痛的严重程度有关,神经纤维的异常高表达可能是EMT患者疼痛的原因之一。