血小板─内皮细胞粘附分子─1的研究进展

血小板┐内皮细胞粘附分子┐１（ＰＥＣＡＭ┐１／ＣＤ３１）是一种血管细胞粘附分子。它可以表达在与血管成份有关的多种细胞上，能够介导多种重要的细胞与细胞之间的相互作用。

环孢菌素A体外对骨髓增生异常综合征患者造血祖细胞的作用

为观察环孢菌素 A(Cs A)体外对骨髓增生异常综合征 (MDS)患者造血祖细胞的作用 ,在骨髓培养体系中加入不同浓度的 Cs A,观察其对粒 -单核祖细胞 (CFU - GM)和红系祖细胞 (CFU - E)的增殖作用。结果显示 ,Cs A在体外可显著促进 MDS患者 CFU- GM、CFU- E增殖 ,且随 Cs A浓度的增加而加强 ;高浓度 Cs A对难治性贫血伴原始细胞增多 (RAEB)、难治性贫血伴原始细胞增多 -转变型 (RAEB- T)组的作用明显高于难治性贫血(RA )、环型铁粒幼细胞性难治性贫血组。提示应用 Cs A治疗

造血细胞生长因子与阿糖胞苷的细胞动力学抵抗

阿糖胞苷(Ara-C)是一种S期特异性细胞毒药物,某些造血细胞生长因子可通过增加S期白血病细胞的数目,而提高其细胞毒活性。本文从基础和临床方面探讨了GM-CSF、G-CSF和IL-3对Ara-C细胞毒作用方面的影响,以期对临床有一定的指导意义。

急性白血病患者医院感染危险因素分析

目的探讨急性白血病患者医院感染的特点及危险因素,为防治医院感染提供依据。方法回顾性分析246例急性白血病医院感染患者的临床资料,采用单因素χ2及多因素非条件Logistic进行相关危险因素分析。结果急性白血病患者医院感染发病率为57.7%;最容易发生感染的部位为呼吸道、口腔及血液;病原菌以G-感染占首位;多因素分析显示预防性使用抗生素、肛周疾患、肺部疾患、糖尿病及长时间糖皮质激素的使用是独立的医院感染危险因素;较高的血红蛋白及血小板水平是医院感染的保护性因素。结论临床针对上述独立危险因素采取积极的预防措施有助于控制急性白血病患者的医院感染率。

幽门螺杆菌在儿童特发性血小板减少性紫癜中的临床意义

本研究旨在探讨幽门螺杆菌(helicobacter pylori,HP)在儿童特发性血小板减少性紫癜(ITP)中的临床意义。用13C尿素呼气试验检测92例ITP儿童患者的感染情况,并检测66名健康儿童作为对照组。将ITP患儿中68例阳性者随机分为2组:复合用药治疗组34例,应用糖皮质激素+抗菌治疗;单药治疗组34例,用糖皮质激素治疗。结果表明:ITP患儿HP的感染率为74.7%,明显高于对照组(39.4%)(P<0.05)。ITP患儿经治疗后,单药治疗组的总有效率(73.5%)明显低于复合用药治疗组的总有效率(94.1%)(P<0.05);治疗组1年内的复发率(17.6%)明显低于单药治疗组(47.1%)(P<0.05);治疗过程中患儿外周血血小板计数均呈逐渐上升趋势,在相同时间点,复合用药治疗组血小板计数明显高于单药治疗组(P<0.01)。结论:ITP患儿HP感染率高于健康儿童,HP可能参与了儿童ITP的发病过程,抗HP治疗可提高ITP患儿的治疗效果,降低其复发率。

三种来源CIK细胞体外增殖及杀伤活性比较

目的为白血病的治疗提供理论依据。方法用Ficoll两步分离法分别从正常人、非霍奇金淋巴瘤患者外周血和脐血中分离获得单个核细胞;细胞因子诱导培养成细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)。流式细胞仪检测CIK的免疫表型,MTT法测定其对白血病K562细胞的杀伤活性。结果三种不同来源的单个核细胞均可诱导成CIK,脐血来源的CIK其扩增效率和杀伤活性均优于其他两种来源,差异有显著性(P<0.01)。结论脐血来源的CIK细胞体外增殖快,杀伤活性强;脐血具有来源方便、免疫原性弱、含有大量造血干细胞、单个核细胞提取率高、输注时移植物抗宿主病(GVHD)发生率低等优点,白血病治疗时可优先考虑。

改良的以硼替佐米为基础的化疗方案治疗老年复发/难治性多发性骨髓瘤的疗效

目的探讨改良的以硼替佐米为基础的化疗方案(P-CTD方案)对老年复发/难治性多发性骨髓瘤的治疗效果。方法选择44例老年复发/难治性多发性骨髓瘤患者,21例患者接受CTD方案治疗(环磷酰胺、沙利度胺、地塞米松),23例患者接受P-CTD方案(硼替佐米、环磷酰胺、沙利度胺、地塞米松)进行治疗。上述患者共接受4个疗程的治疗,治疗结束后参照国际骨髓瘤工作组(IMWG)制定的多发性骨髓瘤疗效判定标准评估疗效,WHO标准判断不良反应。结果 CTD组患者接受治疗后,完全缓解(CR)和很好的部分缓解(VGPR)3例(14.3%),部分缓解(PR)8例(38.1%),病情稳定(SD)4例(19%),病情进展(PD)6例(28.6%),总有效(CR+VGPR+PR)11例(52.4%)。P-CTD组患者治疗后CR和VGPR 8例(34.8%),PR 11例(47.8%),SD 1例(4.3%),PD 3例(13%),总有效19例(82.6%),P-CTD组缓解率优于CTD组(P<0.05)。两组患者各种不良反应相似(P>0.05)。结论 CTD方案和P-CTD方案均具有良好的安全性,P-CTD方案的缓解率优于CTD方案。

IL-2、IL-6及其受体与多发性骨髓瘤的研究

采用固相放射免疫分析法 (RIA)和双抗体夹心酶联免疫法 (EL ISA) ,对多发性骨髓瘤 (MM)患者进行血清白细胞介素 2 (IL- 2 )、白细胞介素 2受体 (s IL- 2 R)、白细胞介素 6 (IL- 6 )、白细胞介素 6受体 (s IL- 6 R)检测 ,并进行长期随访。结果 MM患者血清 IL- 2、s IL- 2 R和 IL- 6、s IL- 6 R水平明显升高 ,IL-2与 ﹀2 微球蛋白 (﹀2 - MG)呈负相关 ,IL- 6、s IL- 6 R与 ﹀2 - MG呈正相关。初诊时血清 s IL- 6 R升高者疗效较差 ,IL- 2升高者预后较好。

白细胞介素15与血液系统疾病研究进展

IL-15是一种与IL-2具有相似生物学活性的细胞因子,它参入了多种疾病的发生及发展,本文主要综述其在血液系统疾病中的研究进展。

联合抗幽门螺杆菌治疗儿童免疫性血小板减少症的临床研究

目的探讨免疫性血小板减少症(ITP)患儿感染幽门螺杆菌(Hp)的特点及抗感染治疗的意义。方法采用13 C尿素呼气试验检测142例ITP患儿和92例健康儿童Hp感染情况。将ITP患儿中97例阳性者分为两组:联合治疗组49例,应用糖皮质激素联合抗Hp治疗;单药治疗组48例,单用糖皮质激素治疗。分别检测两组治疗前后血小板相关参数、血小板相关抗体和淋巴细胞亚群的变化。结果 ITP患儿Hp的感染率为69.7%,明显高于健康儿童(40.2%)。两组患儿治疗6个月后,联合治疗组患儿血小板计数、PCT、CD3+、CD3+CD4+和CD3+CD4+/CD3+CD8+升高水平明显高于单药治疗组(P<0.01),而MPV、PDW、PAIgG、PAIgA、CD3+CD8+下降水平均高于单药治疗组(P<0.01)。结论 ITP患儿Hp感染率高于健康儿童;Hp可能通过影响机体免疫功能参与了儿童ITP的发病和发展过程,联合抗Hp治疗可改善ITP患儿机体免疫状态,提高治疗效果。

白细胞过滤器去除血液中肿瘤细胞及对红细胞的影响

目的研究白细胞过滤器清除血液回收机漂洗后血液中残存肿瘤细胞的效果,并观察过滤后红细胞的数量、形态及其脆性的改变。方法选择繁殖能力强,不易受损的细胞系肠肿瘤细胞(LOVO)和胃肿瘤细胞(SGC)进行体外培养,待细胞消化后制成单一细胞悬液;采集非肿瘤患者术野血液,经过滤、离心、漂洗收集浓缩红细胞。将细胞悬液中的肿瘤细胞计数后混入浓缩的红细胞中,混匀,再用血液回收机过滤、离心、漂洗,将漂洗后得到的浓缩红细胞用白细胞过滤器过滤,观察过滤对血样中肿瘤细胞的影响并与未经过滤处理的对照组进行比较,同时测定红细胞数、红细胞平均体积(MCV)、红细胞体积分布宽度变异(RDW)及红细胞渗透脆性,观察过滤对红细胞的影响。结果过滤后的血样中未发现肿瘤细胞,而对照组血样中可见到肿瘤细胞。培养14天后观察,经白细胞过滤器过滤后的血样未见肿瘤细胞生长,而对照组血样中有大量肿瘤细胞生长。过滤后的RBC、MCV、RDW和红细胞渗透脆性与对照组相比差异无显著性(P>0.05)。结论应用自体血液回收机配合白细胞过滤器,可有效去除血液中的肿瘤细胞,且对红细胞数量、形态及细胞膜无明显影响。

急性白血病患者血清及脑脊液中SDF-1α的检测及其临床意义

目的探讨急性白血病(acute leukemia,AL)患者血清及脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)中基质细胞衍生因子-1α(stromal cell-derived factor-lα,SDF-1α)的水平及临床意义。方法采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)分别检测26例初诊未治及经标准方案化疗2疗程后AL患者和10例非恶性血液病患者(对照组)的血清及CSF中SDF-1α的水平。结果①初诊未治及经标准方案化疗2疗程后急性淋巴细胞白血病(ALL)组、急性髓细胞白血病(AML)组血清及CSF中SDF-1α浓度明显高于对照组(P<0.01);ALL组明显高于AML组(P<0.01)。②初诊未治及经标准方案化疗2疗程后中枢神经系统白血病(CNSL)组、非中枢神经系统白血病(N-CNSL)组血清及CSF中SDF-1α浓度明显高于对照组(P<0.01);CNSL组明显高于N-CNSL组(P<0.01)。结论①AL患者初诊时及化疗后血清及CSF中SDF-1α水平呈高水平表达,提示它可以作为AL特别是CNSL的一种病情变化检测指标,可能与AL耐药及复发相关。②CNSL患者血清及CSF中SDF-1α浓度有一定的相关性,提示在CNSL患者仅检测血清SDF-1α水平就可能有助于判断病情变化,避免反复腰穿给患者带来痛苦。

人脐带间充质干细胞对白血病细胞增殖分化的作用

目的:探讨人脐带间充质干细胞对急性髓系白血病M3型细胞NB4细胞系增殖分化的影响及其相关机制。方法:分离及培养HUC-MSC细胞和NB4细胞,建立以HUC-MSC细胞为基质细胞、NB4细胞为目的细胞的直接共培养体系。应用CCK-8法和细胞计数法检测细胞增殖情况;应用瑞氏吉姆萨染色和NBT还原实验检测细胞分化状态;应用ELISA法检测各组上清中IL-6表达水平;应用实时定量PCR技术检测IL-6相关基因CDKN1A、CCND1、Survivin、STAT3的转录水平。结果:两种细胞共培养后在倒置显微镜下可见到共生良好。与正常NB4细胞相比,同HUC-MSC共培养的NB4细胞的增殖能力减弱;HUC-MSC能促进ATRA诱导的NB4细胞分化。在共培养组上清中IL-6水平显著升高。与单纯培养的NB4细胞相比,共培养组和ATRA诱导组的NB4细胞中细胞周期素D1基因(CCN D1)转录水平均不同程度下降(NB4:NM:NA:NMA=1:0.35:0.70:0.20),CDKN1A表达水平不同程度增高(NB4:NM:NA:NMA=1:3.21:1.41:5.32)。结论:间充质干细胞可能通过IL-6信号通路抑制NB4细胞的增殖,促进ATRA诱导的NB4细胞的分化。

白血病抑制因子对K562细胞增殖、凋亡及p53蛋白表达的影响

目的探讨白血病抑制因子(LIF)体外对K562细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法取对数生长期K562细胞接种于96孔板中,随机分为对照组和观察1～3组,分别加入质量浓度为0、5、10、40μg/L的重组人LIF,继续培养61、2、24、48 h;应用MTT法、Hoechst染色法观察各组K562细胞增殖活性、凋亡率,采用免疫组化法检测观察3组和对照组p53蛋白表达情况。结果观察1～3组不同时间细胞增殖活性均显著低于对照组,且观察1组>观察2组>观察3组、6 h>12 h>24 h>48 h(P均<0.05);观察1～3组不同时间细胞凋亡率均显著高于对照组,且观察1组<观察2组<观察3组、6 h<12 h<24 h<48 h(P均<0.05);观察3组各时间点p53蛋白阳性表达率均明显高于对照组,且6 h<12 h<24 h<48 h(P均<0.05)。结论 LIF能以浓度—时间依赖性抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡,机制可能为上调p53蛋白表达。

ICAM-1基因沉默对人淋巴瘤细胞迁移及侵袭的影响

目的探讨慢病毒介导的RNAi靶向沉默人细胞间黏附分子1(ICAM-1)基因对人淋巴瘤Raji细胞迁移及侵袭的影响。方法常规培养Raji细胞并随机分为空白对照组、NC组及干扰组。将p LKO. 1-ICAM-1shRNAGFP载体、ps PAX2载体及p MD2. G载体共转染HEK293T细胞并包装慢病毒转染干扰组,同时构建无干扰能力的阴性对照病毒转染NC组,空白对照组不予转染。用RT-PCR法检测细胞内ICAM-1 mRNA表达,用Western blotting法检测细胞内ICAM-1蛋白表达,用细胞划痕实验检测细胞迁移能力,用Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果干扰组ICAM-1 mRNA及蛋白相对表达量低于NC组、空白对照组(P均<0. 05),细胞迁移率低于NC组、空白对照组(P均<0. 05),细胞穿膜数低于NC组与空白对照组(P均<0. 05)。结论慢病毒介导的RNAi靶向沉默ICAM-1基因表达可有效抑制人淋巴瘤Raji细胞的迁移与侵袭。

急性白血病患者外周血中CD4^+ CD25^+ Foxp3^+ Treg细胞的表达及临床意义

目的:探讨急性白血病患者治疗前后外周血CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞的变化及临床意义。方法:应用流式细胞技术分别对40名健康成人和92例急性白血病初诊患者治疗前后外周血CD4+ Foxp3+ 、CD4+ CD25+ 、CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞表达水平进行检测。结果:CD4+ Foxp3+ 、CD4+ CD25+ 、CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞在健康成人和急性白血病患者外周血中都有表达。急性白血病初诊患者外周血中CD4+ CD25+ Treg细胞的比例较对照组稍有增加,但差异无统计学意义(P>0.05);CD4+ Foxp3+ 、CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞的比例均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。急性白血病两种亚型ALL、ANLL间,以及ANLL中的四种主要亚型(M2、M3、M4、M5)患者外周血中表达均无明显的差异(P>0.05)。治疗后,患者外周血中CD4+ CD25+ 、CD4+ Foxp3+ 、CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞比例明显高于治疗前和对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:CD4+ CD25+ Tregs可能是急性白血病患者免疫抑制并导致肿瘤免疫逃逸的一个重要原因之一。

脐血来源CIK细胞的诱导及检测

目的探讨从脐血中大剂量制备CIK细胞的方法并检测其生物活性。方法利用Ficoll两步分离法分离获得脐血单个核细胞,细胞因子诱导分化扩增。光镜观察细胞形态,流式细胞仪检测培养物的免疫表型,MTT法检测其杀伤活性。结果CIK细胞经诱导后第4天细胞形态开始出现体积增大,胞核不规则,细胞数目增多,培养10 d后细胞数目成对数扩增,30 d后逐渐下降;免疫表型中以CD3^+、CD16+56^+细胞扩增最显著(P<0.01);第14天时CIK细胞对K562和Raji细胞株表现出强大的杀伤活性。结论细胞因子在体外可以大剂量培养脐血CIK细胞,扩增倍数高,杀伤活性强。