基于网络药理学的生脉注射液作用机制研究

目的基于网络药理学技术探索生脉注射液的体内药效物质基础和作用机制。方法通过数据库及文献检索方法获取生脉注射液的有效成分,通过BATMAN-TCM构建的分子对接技术预测生脉注射液有效成分的体内作用靶标及相关通路,基于京都基因与基因组百科全书(KEGG)的通路富集分析功能,阐述生脉注射液的多成分-多通路作用机制。结果通过上述方法共计发现295个有效成分,直接或间接涉及体内4 891个靶标,552种相关疾病。关键成分是锦葵酸、腺苷、蝙蝠葛碱、维生素B12、十四醇、腺苷三磷酸肌醇。关键靶标是亚当金属肽酶结构域8、AKT丝氨酸/苏氨酸激酶1、ATP结合盒亚家族成员1、花生四烯酸15脂肪氧化酶、腺苷A1受体、缓激肽受体B2、一氧化氮合酶3、乙酰胆碱酯酶、丁酰胆碱酯酶。关键疾病是炎症反应、乳腺癌、心血管疾病、前列腺癌、哮喘、脓毒症、动脉粥样硬化、帕金森病、阿尔茨海默病、精神分裂症。涉及通路是糖酵解/糖异生、柠檬酸循环、磷酸戊糖途径、戊糖和葡糖醛酸盐相互转化、果糖与甘露糖代谢、半乳糖代谢、抗坏血酸与醛酸代谢、脂肪酸生物合成、脂肪酸伸长、脂肪酸降解。结论生脉注射液主要通过多成分协同起效的机制起到抗炎、抗乳腺癌等疾病的作用。本研究结果初步验证了生脉注射液治疗疾病的有效成分和作用机制,为进一步深入揭示相关疾病的有效治疗方法开发奠定基础。

巴西海木提取物抗生殖系统氧化损伤活性研究

目的考察巴西海木提取物对生殖系统氧化损伤的影响,初步探究其作用机制。方法采用水和不同比例(50%、70%及95%)乙醇溶液浸提巴西海木树皮,得到4种粗提物;依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取不同比例醇提物,得到9种有机相组分,共得到13种巴西海木提取物TCE-1~TCE-13。以小鼠睾丸支持细胞(TM4)增殖率变化为指标考察各提取物的细胞毒作用;采用H_(2)O_(2)处理TM4细胞建立氧化损伤模型,以细胞存活率及氧化指标超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力变化为指标,邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)处理雄性小鼠建立生殖系统氧化损伤模型,造模后灌胃给予300、600、900 mg·kg^(-1)50%粗提乙酸乙酯组分(TCE-6)28 d后,以睾丸组织氧化指标变化验证TCE-6药效。最后通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测相关基因的表达情况,初步探究其作用机制。结果细胞毒性实验结果表明95%粗提物(TCE-4),50%粗提石油醚组分(TCE-5)、正丁醇组分(TCE-7),70%粗提石油醚组分(TCE-8)、正丁醇组分(TCE-10)以及95%粗提石油醚(TCE-11)、正丁醇组分(TCE-13)对TM4细胞具有杀伤作用。50%粗提物(TCE-2)、TCE-6以及70%粗提乙酸乙酯组分(TCE-9)给药组显著提高氧化损伤后TM4细胞存活率,TCE-6组SOD、GSH-Px活力显著提高、MDA含量显著下降(P<0.01)。900 mg·kg^(-1)TCE-6处理后能显著提高氧化损伤模型小鼠睾丸组织内SOD、GSH-Px活力,降低MDA含量(P<0.05)。qRT-PCR结果表明,900 mg·kg^(-1)TCE-6处理后提高了核因子E2相关因子2(Nrf2)、超氧化物歧化酶2(SOD2)及超氧化物歧化酶3(SOD3)mRNA的表达(P<0.05)。结论TCE-6可能通过上调SOD酶家族表达和调节Nrf2信号通路发挥抗生殖系统氧化损伤作用,具有开发为生殖系统损伤治疗药物的潜力。

多波长检测UPLC法测定地锦草中鞣花酸等4种指标性成分的含量

目的:建立多波长同时测定地锦草药材中没食子酸、鞣花酸、槲皮素、山柰酚4种指标成分含量的超高效液相色谱法,并比较不同地锦草化学成分的差异。方法:采用Acquity UPLC BEH C_(18)色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,柱温30℃,流速0.2 mL·min^(-1),检测波长为271 nm(0~2 min)、254 nm(2~6 min)和360 nm(6~8 min)。结果:地锦草中没食子酸、鞣花酸、槲皮素、山柰酚4种成分在8 min内均达到基线分离,线性范围分别为65.88~164.70(R^2=0.999 2)、149.10~372.75(R^2=0.999 2)、27.48~68.70(R^2=0.999 7)、30.24~75.60μg·mL^(-1)(R^2=0.999 2),平均回收率(n=6)分别为99.5%(RSD=1.4%)、98.3%(RSD=0.92%)、99.1%(RSD=1.2%)和99.3%(RSD=1.4%);6批地锦草样品中没食子酸、鞣花酸、槲皮素、山柰酚的含量分别为4.148~7.663、9.727~17.388、1.763~2.977、0.684~2.037 mg·g^(-1)。结论:本文对不同产地地锦草中指标性成分含量差异性的研究,可为地锦草的质量控制提供理论依据。