脂肪源性间充质干细胞外泌体在大鼠全层皮肤缺损创面愈合中的机制研究

目的探究脂肪源性间充质干细胞外泌体(hADSC-Exo)在大鼠全层皮肤缺损创面愈合中的作用机制。方法分离并鉴定hADSC与hADSC-Exo。将人真皮微血管内皮细胞(hMECs)分为对照组、200μg/L重组人表皮生长因子处理的阳性对照组与100μg/mL hADSC-Exo处理的hADSC-Exo组,通过CCK-8、划痕实验、血管形成实验,检测hMECs增殖、迁移与血管形成能力。60只大鼠随机分为对照组、阳性对照组、hADSC组与hADSC-Exo组,每组15只。所有大鼠于背部制备全层皮肤缺损创面,每组分别于大鼠尾静脉注射200μL 1×PBS、100μg/kg重组人表皮生长因子、200μL约含1×10^(6)个hADSC的1×PBS、200μL含200μg hADSC-Exo的1×PBS。每组随机保留3只大鼠,分别于0、3、7、10、12 d拍摄创面图像并计算创面面积。每组其余大鼠随机分为4组,每组3只,分别于3、7、10、12 d采集未愈合创面组织并制成石蜡切片,HE、Masson染色观察创面愈合情况,免疫组化检测炎症与创面愈合相关蛋白表达情况。结果细胞实验结果显示,与对照组相比,阳性对照组、hADSC-Exo组细胞增殖活性、细胞迁移率升高(P<0.05),管腔长度与分支点数量增加(P<0.05);与阳性对照组相比,hADSC-Exo组细胞增殖活性、细胞迁移率进一步升高(P<0.05),管腔长度与分支点数量进一步增加(P<0.05)。动物试验结果显示,与对照组相比,阳性对照组、hADSC组与hADSC-Exo组皮肤创面愈合率、CD206、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、CollagenⅢ、水通道蛋白3(AQP3)表达水平升高(P<0.05),肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、CD68、角蛋白1(KRT1)表达水平与CollagenⅠ/CollagenⅢ比例下降(P<0.05),新生表皮组织更为完整,厚度增加,表皮下可见成纤维细胞增殖,创面新生胶原沉积明显增加;与阳性对照组相比,hADSC组与hADSC-Exo组CD206、CollagenⅠ、CollagenⅢ、AQP3表达水平进一步升高(P<0.05),TNF-α、IL-6、CD68、KRT1表达水平进一步下降(P<0.05)。结论hADSC-Exo能够增强hMECs增殖、迁移、血管生成能力,降低创面炎症反应水平,促进创面细胞增殖、胶原重塑,加速创面愈合,具有成为皮肤创伤治疗药物的潜力。

智能控制在无刷直流电机控制中的应用

分别介绍了模糊控制、神经网络和遗传算法用于无刷直流电机控制的方法、效果以及研究应用情况。由趋势可见,智能控制方法可以使无刷电机的整体性能得到显著改善,是高性能无刷直流电机控制系统开发的一个重要方向。

甲胎蛋白异质体AFP—L3鉴别良恶肝病及预警肝癌的研究

目的研究微量离心柱法检测甲胎蛋白异质体（AFP—L3）用于鉴别良恶性肝病及对肝细胞癌的预警。方法147例AFP升高（主要为低浓度阳性）的肝病患者血清，同时检测AFP-L3％含量，对AFP—L3%异常升高者、正常者进行临床病理核对，分析AFP—L3%升高作为鉴别良恶性肝病的新指标是否比单纯检测AFP更为准确有效；并对疑似HCC的19例肝病患者结合6个月后临床诊断结果，分析AFP-L3％〉10％对肝癌的预警作用。结果AFP升高的患者中AFP—L3％值与AFP值无相关性；AFP—L3％〉10％对肝癌诊断敏感度为89．1％；诊断特异度为94．4％；总有效率为90．6％。AFP—L3〉10％发生肝癌的危险性比AFP—L3％〈10％增加了6．88倍。结论以AFP-1．3％〉10%做为诊断标准对区分良恶肝病具有良好的临床意义；AFP—13％〉10％可以做为肝细胞癌的预警。

血清SCC-Ag、VEGF、TSGF在子宫颈癌患者中的表达及其与预后的关系

目的:探讨血清鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)、血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤特异性生长因子(TSGF)在子宫颈癌患者中的表达,并分析其与预后的关系。方法:回顾性分析2014年1月-2015年12月烟台山医院收治的108例子宫颈癌患者的临床资料作为癌症组,同期收集体检中心100例健康女性的临床资料作为对照组。检测两组血清SCC-Ag、VEGF、TSGF水平,并分析其与患者临床病理特征、预后的关系。结果:癌症组血清SCC-Ag、VEGF、TSGF水平均高于对照组(P<0.05)。临床分期为Ⅲ、Ⅳ期、低分化、有淋巴结转移及SCC-Ag、VEGF、TSGF阳性表达患者的5年生存率较低(P<0.05)。临床分期、分化程度、淋巴结转移及SCC-Ag、VEGF、TSGF阳性表达是子宫颈癌患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论:子宫颈癌患者血清SCC-Ag、VEGF、TSGF水平明显升高,临床分期、分化程度、淋巴结转移及SCC-Ag、VEGF、TSGF阳性表达是影响患者预后的危险因素,临床上应加强干预,提高患者生存率。

肺心病患者上呼吸道感染产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的检测

目的检测反复呼吸道感染(RRI)慢性肺心病患者咽拭子培养产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)病原菌,回顾分析其耐药性。方法收集2012年10月至2015年1月于该院就诊的1 098例老年肺心病伴RRI患者咽拭子标本进行培养,用法国生物梅里埃细菌分析软件对患者进行菌株鉴定及药敏试验,结果按美国临床实验室标准化协会(CLSI)标准判读,并进行统计分析。结果共检出大肠埃希菌197株、肺炎克雷伯菌156株,其中产ESBLs菌株的检出率分别为44.16%、30.77%。产ESBLs菌株较非产ESBLs菌株有更强的耐药性,两者对亚胺培南、哌拉西林/舒巴坦及阿米卡星高度敏感,但对三代以下头孢类抗菌药物呈多重耐药性。结论慢性肺心病合并RRI患者产ESBLs病原菌检出率较高,该类细菌对头孢类抗菌药物呈较高耐药性,依据细菌培养结果及药敏试验进行治疗是治疗成功的关键。

AFP、AFP-L3、GP73联合检测在肝癌诊断中的应用

目的 检测不同患者样本中甲胎蛋白（AFP）、甲胎蛋白异质体（AFP-L3）以及高尔基体蛋白73（GP73）的含量,研究AFP、AFP-L3、GP73在肝癌诊断中的应用.方法 收集肝癌患者样本、肝炎肝硬化样本以及正常健康人员样本,用电化学发光法检测AFP、AFP-L3及用ELISA法检测GP73含量.结果 1.本研究显示：AFP-L3%〉10%对肝癌诊断敏感度为89.1%;诊断特异度为94.4%[1];2.在101例肝癌标本中,GP73的阳性率为72.28%,AFP的阳性率37.62%,经过卡方检验,两者具有显著性差异（χ2=18.86,p〈0.01）;3.在所有非肝癌患者中,GP73的诊断特异性为93.44%;AFP的诊断特异性为86.48%.结论 AFP-L3、GP73 用于诊断肝癌效果明显优于AFP,可以显著提高对肝癌诊断的灵敏度和特异性,而且AFP-L3、GP73 相比AFP更不容易受到肝部炎症和其他部位肿瘤的影响.结合本人早期研究结果,将GP73、AFP-L3、AFP联合起来检测,能更好更快的对肝癌做出早期诊断.

一种电化学发光免疫法测定NT-proBNP的实验探讨

目的对脑利钠肽前体(NT-proBNP)电化学发光法测定的原理及此法测定的精密度、分析的灵敏度、干扰试验等内容做进一步的测定或验证,为临床提供方法学的支持。方法使用Roche公司生产的NT-proBNP试剂盒在Roche MODULAR PPE全自动生化免疫分析仪上测定,以对其正常参考范围、精密度、灵敏度等内容进行测定或验证。结果NT-proBNP的正常参考范围为:<125pg/ml。批内精密度CV(%)分别为0.841、.04、0.541、.12;批间精密度CV(%)为4.063、.503、.21、3.83.测量线性范围为5~35000pg/ml。结论此法测试时间短,准确性好,是目前较理想的方法。

一种糖化血红蛋白自动分析法的实验探讨

目的对糖化血红蛋白(HbAlc)免疫抑制比浊法(TINIA)测定的原理及自动化分析法的精密性、准确性等内容进行较深入的探讨,为临床提供方法学的支持.方法使用Roche公司生产的HbAlc免疫抑制比浊法试剂盒在OLYMPUSAU600全自动生化仪上建立分析参数,并以其正常参考范围、精密性、准确性、线性等内容进行测定.结果 HbAlc(%)正常参考范围(x-±2s)=4.85～6.13,HbAlc批内及批间CV(%)分别为2.44,1.99,4.55,4.91,Hb批内及批间CV(%)分别为1.61,2.04,3.83,3.95,线性范围HbAlc0.5～18.5 g/L,Hb60～220 g/L,回收率(%)HbAlc97.7～103.3,Hb97.4～102.9.结论此法测HbAlc(%)简便快速,结果准确可靠,是目前较为理想的方法.

二氮嗪预处理对阻塞性黄疸肝脏缺血再灌注损伤的影响

将部分阻塞性黄疸大鼠分成缺血再灌注损伤组(对照组)、M PG处理组、二氮嗪预处理组(A、B、C组)。用二氮嗪预处理肝脏行缺血再灌注损伤实验,观察二氮嗪对肝脏缺血再灌注损伤有否保护作用。结果二氮嗪各预处理组与M PG组比较,血清谷丙转氨酶、谷草转肽酶、乳酸脱氢酶、细胞内丙二醛、超氧化物歧化酶及凋亡指数有统计学差异(P<0.05);与对照组比较无统计学差异。认为二氮嗪预处理对大鼠部分阻塞性黄疸肝脏缺血再灌注损伤无保护作用。

VEGF及STAT3在烟台地区胃癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨VEGF及 STAT3的表达与胃癌临床病理特征之间的关系及VEGF和STAT3之间的相关关系.方法 采用SP免疫组化方法检测VEGF及STAT3在胃癌组织中的表达.结果 胃癌组织中VEGF、STAT3阳性率分别为74%、34.7%,癌组织中VEGF的表达分别与浸润深度、临床分期、淋巴结转移相关.STAT3的表达分别与分化程度、临床分期相关.胃癌组织中VEGF与STAT3表达呈正相关.结论 VEGF、STAT3异常表达与胃癌的发生、发展关系密切,且两者之间的相关性支持VEGF基因直接由STAT3蛋白调节的论点,是肿瘤生物学行为较有价值的标记物.

浅谈初中化学用语教学策略——以《化学式与化合价》教学为例

本文从多年初中化学用语教学中存在学生机械记忆,教师苦于无良好策略的现状。根据自己在教学中的不断探究与实践,提出名实结合、突出三个表征、明确涵义的教学策略。

组蛋白去乙酰化酶3通过调节miR-625/ASF1B轴抑制乳腺癌细胞焦亡

目的探讨组蛋白去乙酰化酶3(histone deacetylase 3,HDAC3)调节miR-625/组蛋白伴侣抗沉默功能蛋白1B(anti-silencing function 1B,ASF1B)轴对乳腺癌(breast cancer,BC)细胞焦亡的影响及其作用机制。方法采用qRT-PCR法检测HDAC3、miR-625和ASF1B在乳腺癌(breast cancer,BC)组织和癌旁正常组织、BC细胞系(T47D、MCF7和MDA-MB-231)和人正常乳腺上皮细胞MCF-10A中的表达水平。采用Western blot实验检测细胞焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1和GSDMD的表达水平。ELISA法检测焦亡相关炎性因子IL-18和IL-1β的表达水平。ChIP实验用于测定HDAC3与miR-625的互作用关系。双荧光素酶报告实验验证miR-625和ASF1B的靶向关系。结果与癌旁正常组织和MCF-10A细胞比较,BC组织和细胞中的HDAC3和ASF1B表达升高,miR-625表达降低(均P<0.05)。与si-NC组比较,si-HDAC3组细胞NLRP3、Caspase-1和GSDMD的蛋白表达水平升高,细胞培养上清液中IL-18和IL-1β的浓度升高(均P<0.05)。HDAC3通过结合miR-625的启动子区域抑制其表达(P<0.05)。与si-HDAC3+miR-NC组比较,si-HDAC3+miR-625 inhibitor组细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-18和IL-1β的表达减少(均P<0.05)。ASF1B被证实为miR-625的靶基因,si-HDAC3+pcDNA3.1-ASF1B组细胞中的焦亡相关因子水平显著低于si-HDAC3+pcDNA3.1-NC组。结论HDAC3通过抑制miR-625上调ASF1B的表达,进而抑制BC细胞焦亡。

EB病毒核抗原1优势表位区段抗原的克隆表达及其在鼻咽癌诊断中的应用

目的制备高活性EB病毒核抗原1(Epstein-Barr virus nuclear antigen 1, EBNA1)的优势表位区段抗原,并初步评价该抗原在鼻咽癌诊断中的应用价值。方法利用生物学软件BIOSUN分析EBNA1抗原的B细胞表位分布,并从中选取含有优势表位的抗原区段。然后利用分子生物学技术构建含有优势表位区段序列的原核表达质粒并进行表达,获得纯化优势表位抗原,采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)初步评价优势表位区段抗原的检测性能。结果成功构建含有优势表位抗原区段序列的原核表达质粒,获得了可溶性表达的EBNA1优势表位区段抗原NA-2(401~641 aa)。通过间接ELISA法对小量样本进行验证,确定NA-2抗原针对EBNA1-IgA抗体具有较高的抗原活性和特异性,较EBNA1-IgG和EBNA1-IgM抗体而言,能够较好地区分鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma, NPC)和健康对照样本。放大样本量进行检测,基于NA-2抗原的EBNA1-IgA抗体间接ELISA方法检测灵敏度和特异性分别为90.38%和91.58%,EBNA1-IgA抗体检测的AUC值为0.942。结论获得EBNA1优势表位区段抗原NA-2,该抗原是优选的可以用于EBNA1-IgA检测的抗原,利用该抗原所建立的间接ELISA检测方法可以很好地区分鼻咽癌患者和健康对照。

肺癌患者血清CEA、CYFRA21-1和NSE的检测及临床意义

目的探讨外周血癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的检测对肺癌的诊断、病理分型和疗效判断的临床用价值。方法采用化学发光法检测了62例肺癌患者、54例良性肺部疾病患者、36例健康人、40例肺癌患者手术前后血清CEA、CYFRA21-1和NSE的水平。结果肺癌患者手术前血清CEA、CYFRA21-1和NSE的含量明显高于良性肺部疾病组及正常对照组(P<0.01)。鳞癌组、腺癌组和小细胞癌组之间肿瘤标志物CEA、CYFRA21-1和NSE水平差异有统计学意义。CEA阳性率以腺癌组最高(84%),CYFRA21-1阳性率以鳞癌组最高(85.2%),NSE阳性率以小细胞癌组最高(80.0%)。手术治疗后未复发转移组CEA、CYFRA21-1和NSE水平低于术前,而复发转移组与术前比变化不显著(P>0.05)。结论血清CEA、CYFRA21-1和NSE的检测对不同病理类型肺癌患者的诊断、病情检测及疗效判断有较好的临床参考价值。

也谈“性才气”

“性才气”一词,是在我读了毛志成先生的大文(载于本刊1994年11期)后才知道的,那意思是说,有关性的显示,演示,光是强调“大胆”还不够,还应该强调一点“才气”,即所谓“文采”。 的确,综观当代电视,在表现性生活方面,胆不可谓不大,但除去“性欲”、“性心思”,“性排场”,“性技术”,“性刺激”的津津乐道之外,看不到“文采”的光华,也嗅不到“才气”的味道,是令人深感遗憾的。对“性美学”和“性文明”两层因素的构成及表演“

马征的足迹——来自《带血的足球剧》组的报告

足球自它在英格兰诞生以来,迄今已成为风靡世界的第一运动。那个小小的足球,也牵动了生活在地球上的人类神经。绿茵场上的角逐,不仅仅是体育比赛,而且也同时是地域的、民族的、国度的乃至其他多种成份的竞争了。 电视剧《带血的足球》,反映的是我国第一场国际足球比赛。故事发生在1906年清朝光绪年间,当时朝政腐败,帝国主义列强凭借兵舰大炮在中国恣意横行。

“外包装”与内涵

近年来.古装剧在荧屏走俏,也许是为了那服饰道具较今人衣裤眩目,或是为那故事的遥远可以不受对号入座者的苛责,于创作者也释去不少的累赘。 然而,一旦了,也便觉得古装剧似有过滥之虑。拍来摄去,终不过那几位皇帝佬儿,还有那几位历史上出了名的女人了,至于那《白蛇传》,《孟姜女》、《梁山伯与祝英台》等家喻户晓的传奇故事,也早已被弄得面目皆非,很难认定那是在古代还是今天了。真正能够称为精品的却是寥寥无几。

乏味与倒胃

人要是曾经倒过胃口,那定然会对倒过胃口的食品乏味。然而,如果是眼睛因看了某种“艺术”品类的东西,而引致胃间酸水溢出,那怕是比为某种食品的乏味导致消化不良,应该说是更加难以忍受和难以治愈了。既如电视荧屏上叠出的笑星们,有的恕本人不敢恭维,那简直是令观众瞠目的骂星啊！相声,作为说唱的民间艺术。