成团泛菌低分子脂多糖的急性毒性、刺激性、致敏性及遗传毒性评估

本研究对成团泛菌低分子脂多糖(Pantoea agglomerans lipopolysaccharide,LPSp)的安全性进行初步评估。本研究采用一次限量法,用昆明种小鼠进行LPSp急性经口毒性试验,了解LPSp的急性毒性;采用新西兰兔分别进行LPSp急性和多次皮肤刺激性试验以及急性眼刺激性试验,了解LPSp的皮肤和粘膜刺激性;采用豚鼠进行LPSp皮肤变态反应试验,了解LPSp的致敏性;应用平板掺入法进行鼠伤寒沙门氏菌/回复突变试验和小鼠骨髓细胞微核试验考察LPSp的遗传危害。急性毒性试验结果显示,LPSp对小鼠经口一次灌胃的LD50大于5000mg/kg体重,属实际无毒级别;LPSp急性和多次皮肤刺激性试验以及急性眼刺激性试验结果显示,皮肤刺激和眼刺激积分均为0分,LPSp对皮肤无刺激性、对眼睛无急性刺激性;在皮肤变态反应试验中,LPSp在各观察时间点的皮肤变态反应积分均为0分,其致敏率均为0%,说明LPSp对豚鼠无致敏性;LPSp的鼠伤寒沙门氏菌/回复突变试验结果呈阴性(P>0.05);LPSp的小鼠骨髓细胞微核试验结果亦呈阴性,LPSp各剂量组的微核发生率与阴性对照组未见统计学差异(P>0.05),而与阳性对照组有明显差异(P<0.01)。本研究结果表明,在本实验剂量范围内,LPSp对小鼠经口毒性极低,属实际无毒级别,对家兔皮肤和眼睛无明显刺激性,对豚鼠无致敏性,对所试菌株和小鼠体细胞无诱变性和致突变性。

电子病历的三个法律问题探讨

电子病历是新生事物,在传统法律环境下电子病历应用和发展遇到了较大的法律障碍：一是电子病历是否具有法律效力无明文规定;二是电子病历使用规则不明确,对电子病历使用人的行为缺乏规范;三是电子病历的安全性、可靠性没有法律保障。2010年2月26日卫生部出台了《电子病历基本规范（试行）》。基于此,本文就电子病历的合法性、电子病历证据能力及其证据特征等问题作一探讨。

医疗机构不应就患者的医疗意外伤害投保责任险

近年部分地区尝试进行了医疗意外责任险,从经济效果看,因保费计算不合理、责任期间设定不公平,医疗意外责任险无法达到预期经济效果;从法律效果看,因医疗机构对保险标的无保险利益,医疗意外责任险合同无效;而从社会效果看,医疗意外责任险的实施可能使医患关系恶化。因此,应当停止实施医疗意外责任险。

瘦素与前列腺癌激素依赖性关系的研究

目的观察瘦素对前列腺癌细胞增殖的促进作用,探讨其与前列腺癌激素依赖性的关系。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测瘦素作用不同时间后雄激素依赖性前列腺癌细胞株22RV1和雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3的增殖率;用MTT法检测不同浓度瘦素及双氢睾酮(DTH)作用后前列腺癌细胞株22RV1和PC-3的增殖率。结果瘦素作用于PC-3细胞不同时间后吸光度(OD值)均明显增高(P<0.05),在48 h达到顶点;且随瘦素浓度逐渐增高,其促进PC-3细胞增殖率亦逐渐增高;而瘦素对22RV1细胞作用不同时间后OD值增高不明显(P>0.05)。DTH对22RV1细胞增殖作用最明显,增殖率随其浓度增高而逐渐升高,但其促进PC-3细胞增殖率明显较低(P<0.01)。结论瘦素对雄激素非依赖性前列腺癌细胞增殖具有明显的选择性促进作用,其可能与前列腺癌雄激素非依赖性的发生发展有密切关系。

穿膜肽-抗体-微球偶联物的制备方法研究

目的:探讨制备穿膜肽-抗体-微球新型药物传送系统的可行性。方法:采用N-琥珀酰亚胺基-3-(2-吡啶二硫)-丙酸酯(SPDP)交联法将穿膜肽-增强型绿色荧光蛋白融合蛋白(CPPs-EGFP)、牛血清白蛋白微球(BSA-NS)、乙肝高效价免疫球蛋白(HBIg)分别采用一次偶联法和二次偶联法两种交联方案进行共价交联,采用还原和非还原SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫荧光法评价穿膜肽、抗体、微球间的交联。结果:两种交联方案制备的穿膜肽-抗体-微球偶联物,SDS-PAGE还原电泳均可见在低分子量端形成三条蛋白条带,非还原电泳均未见条带;在不同激发波长的荧光显微镜下,均可见微球表面分别发出绿色荧光和红色荧光。结论:应用SP-DP交联剂,无论是一次偶联法还是二次偶联法均能够将穿膜肽、抗体、微球有效地进行偶联,为进一步研究穿膜肽-抗体-微球新型药物传送系统的特性奠定了基础。

医疗事故行政监管的法制困境及其出路——以江苏医疗事故处理为例

《医疗事故处理条例》赋予了卫生行政部门监管医疗事故的法定职责,但由于其所规定的医疗事故报告制度存在报告主体设置的反人性、报告事项难以确定、报告本身的悖论等三大困境,医疗事故行政监管事实上步步落空。以江苏为例,2010年《侵权责任法》施行以后,医疗事故行政监管的地方规范也存在合法性问题和回避行政监管的困境,其结果是重民事轻行政责任、医疗事故失于防控。解决医疗事故行政监管的国家法困境和地方规范困境的出路是:地方立法。而在地方立法中需要:一是,以"医疗事故"为中心,赋予患者申请权与知情权、医学会报告义务和行政处理建议权,以有效监督行政监管;二是,规范卫生行政监管的实施。

生物体内固醇类物质检测方法的研究进展

本文阐述了固醇类物质的结构、种类、性质以及在生物体中的重要作用,详细介绍了洋地黄皂苷法、红外光谱法、薄层色谱法、气相色谱法、液相色谱法、质谱法等固醇类物质的检测方法,比较了固醇类物质的各种检测方法的具体特点及其国内外研究最新进展。为食品科学以及医院临床检验领域中固醇类物质的研究与应用提供理论依据和技术参考。

医疗安全风险金制度的探讨

文章介绍了医疗安全风险金制度及其筹集、使用,并对医疗责任保险与医疗安全风险金制度有机结合的可能性进行了探讨,以期该管理措施能够推广应用。

LPSp作为乙型肝炎表面抗原佐剂的初步研究

目的研究革兰阴性非致病菌成团泛菌脂多糖 (Pantoeaagglomeranslipopolysaccharide,LPSp)作为佐剂对重组乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)诱导小鼠产生抗 -HBs抗体的影响。方法采用纯系 (Balb/c)小鼠作为免疫对象 ,经背部皮下免疫2次 ,ELISA法检测血清乙型肝炎表面抗体(抗 -HBs)滴度。结果HBsAg加LPSp组 ,其抗 -HBs总抗体滴度较单独注射HBsAg明显增高 (P<0.05) ;抗体持续时间可更长。结论LPSp对小鼠抗 -HBs抗体的产生具有增强作用 。

我院实施医疗安全风险金制度的实践与思考

我国现行的医疗安全风险化解机制主要包括医疗责任保险和医疗风险基金。但是,医疗责任保险制度无法直接规范医务人员的行为,而医疗风险基金缺乏行政法上的法律依据,且存在适用范围上的局限性。江苏省人民医院施行的医疗安全风险金制度具有"社会化"风险分担功能、奖惩结合功能、管理传导功能,但是同时也存在风险金单元单一、筹集标准调整规则简单等制度缺陷。我院于2011年起施行的《医疗安全风险金管理办法》修正案在制度评价的基础上,按照持续改进的原则,合理区分了医疗过失行为的性质和责任程度,并设立了共保金制度,对于规模较大的医院具有借鉴意义。

血清中非胆固醇类固醇检测方法研究进展

人体血清中除含有胆固醇外，还含有微量的角鲨烯和非胆固醇类固醇。近年的研究发现：血清中的角鲨烯和胆固醇前体固醇可以反映机体的内源性胆固醇合成效率，而植物固醇可反映机体的外源性胆固醇吸收效率。胆固醇前体固醇和植物固醇是一类以环戊烷全氢菲为骨架的醇类化合物。在某些家族性血脂代谢异常的患者血清中，非胆固醇类固醇的含量会明显偏高。

LPSp对狂犬病疫苗佐剂效应及安全性研究

目的研究成团泛菌脂多糖(LPSp)作为狂犬病疫苗佐剂的可行性。方法将Balb/c小鼠32只随机分为空白对照组(注射生理盐水)、LPSp对照组(注射LPSp)、狂犬病病毒蛋白组(注射狂犬病病毒蛋白)、LPSp实验组(注射LPSp和狂犬病病毒蛋白),分别在第0、7、15、21天经背部皮下免疫接种共4次。在免疫接种后第7、14、21、30、45、60天采集小鼠眼内眦静脉血,分离血清,末次采血后处死小鼠。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清抗狂犬病病毒IgG,并进行血液学、血液生化、脏器指数等检查。结果免疫接种4次后,LPSp能明显增强狂犬病病毒蛋白免疫小鼠产生IgG的能力(P<0.05);实验期间各组小鼠未发现明显异常表现,体质量、血液学、血液生化和脏器指数等各组间未见明显差异(P>0.05)。结论 LPSp对狂犬病病毒蛋白具有较好佐剂效应;在本实验条件下,LPSp对小鼠安全性好。

成团泛菌脂多糖对两种狂犬病疫苗免疫效果的影响

目的:研究成团泛菌脂多糖(pantoea agglomerans lipopolysaccharide,LPSp)对两种狂犬病疫苗产生抗体的影响,了解LPSp作为狂犬病疫苗佐剂的可行性。方法:将Balb/c小鼠随机分为空白对照组、LPSp对照组、纯蛋白疫苗组、铝佐剂疫苗组、LPSp+纯蛋白疫苗组、LPSp+铝佐剂疫苗组6组,背部皮下免疫4次。免疫后第7、14、21、30、45、60天分别经小鼠眼内眦静脉采血,ELISA法检测血清抗狂犬病毒IgG滴度。结果:免疫4次后,LPSp能明显增强纯蛋白疫苗产生抗体的能力(P<0.05);对铝佐剂疫苗免疫效果影响不大(P>0.05)。结论:LPSp对纯蛋白疫苗免疫小鼠产生抗体具有较强促进作用,对铝佐剂疫苗产生抗体无明显促进作用。

双相滴定法在稻谷陈化度测定中的应用研究

研究了稻谷脂肪酸值测定的双相滴定法。结果表明,该法以石油醚提取的色素物质不溶于水相,因此不会影响水相中脂肪酸的滴定。该法精密度高,加标回收率达99%以上。

从胆固醇代谢标志物视角分析高脂血症患者血脂异常的影响因素

目的分析胆固醇吸收与合成标志物及其它相关指标对高脂血症患者血脂成份的影响,探讨高脂血症患者胆固醇代谢特点。方法选取高脂血症患者(n=53)和健康对照者(n=50),常规检测肝肾功能及血脂水平,应用气相色谱法检测胆固醇吸收与合成标志物水平。结果高脂血症组总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)显著高于健康对照组(P<0.05);高脂血症组角鲨烯、7-烯胆烷醇的合成率均高于健康对照组(P<0.05),而豆固醇吸收率低于健康对照组(P<0.05)。多元线性逐步回归分析显示,高脂血症组影响TC的独立影响因素为LDLC和菜油固醇,影响TG的独立影响因素为脱氢胆固醇和LDLC,影响健康对照组TC和TG的独立影响因素均为LDLC和7-烯胆烷醇。结论高脂血症患者胆固醇代谢标志物特点是角鲨烯、7-烯胆烷醇合成率显著增高,植物固醇中豆固醇吸收率显著降低;高脂血症组影响TC和TG的独立影响因素除LDLC外,还与胆固醇合成标志物(脱氢胆固醇)、胆固醇吸收标志物(菜油固醇)有关。

64例血脂正常人胆固醇吸收与合成标志物检测

目的了解健康成人胆固醇吸收与合成标志物的均值及分布情况。方法入选北京安贞医院体检中心64例健康成人,常规测定肝肾功能、血清总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯、空腹血糖等指标;采用气相色谱法测定胆固醇吸收与合成标志物。结果 5种非胆固醇类固醇总和平均值为1.02 mg/dL,约为胆固醇总量的0.72%,且存在个体差异;与女性比较,男性血清中7-烯胆甾烷醇水平升高(P<0.05),而豆固醇水平较女性低(P<0.01);合成标志物角鲨烯随着年龄的增长而降低,吸收标志物豆固醇随着年龄的增长而升高。结论通过检测胆固醇吸收与合成标志物,了解健康个体间胆固醇吸收、合成标志物分布情况。

慢性乙型肝炎病毒感染者CD8^+T细胞Toll样受体2表达增强

目的测定未经抗病毒治疗的慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者CD8^+T细胞中Toll样受体2(TLR2)的水平,探索TLR2在慢性HBV感染者CD8^+T细胞中的表达的情况。方法采用实时荧光定量PCR检测40例样本的血清HBV载量,分为高病毒载量组(HBV DNA>1×104拷贝/m L)、低病毒载量组(HBV DNA<1×104拷贝/m L),19例志愿者作为健康对照组;分离外周血单个核细胞,流式细胞术检测CD8^+T淋巴细胞亚群中TLR2和CD38、HLA-DR、CD95、程序性死亡蛋白1(PD-1)的表达,并分析TLR2表达情况及与它们之间的相关性。结果低病毒载量组与高病毒载量组CD8^+T细胞TLR2的表达较健康对照组高,低病毒载量组CD8^+T细胞TLR2表达高于高病毒载量组;相关性分析结果显示CD8^+T细胞亚群中TLR2和CD38、HLA-DR、CD95、PD-1表达缺乏相关性。结论 HBV感染者CD8^+T淋巴细胞TLR2的表达增强。

LPSp辅佐HBsAg诱导机体产生特异性抗体的机制

目的:研究革兰阴性非致病性成团泛菌脂多糖(LPSp)作为佐剂促进乙型肝炎表面抗原蛋白(HBsAg)诱导小鼠产生抗-HBs抗体的作用机制。方法:在体外用LPSp+HBsAg、HBsAg、LPSp、生理盐水分别致敏小鼠腹腔巨噬细胞,观察致敏细胞回输体内后诱导HBs抗体产生水平,检测巨噬细胞培养上清中TNF-α活性和NO浓度;观察4组巨噬细胞吞噬功能变化,并检测致敏巨噬细胞诱导局部淋巴结细胞分泌IL-4和IFN-γ的能力。结果:HBsAg+LPSp致敏巨噬细胞促进小鼠HBs抗体产生,LPSp致敏的巨噬细胞的吞噬能力显著增强(P<0.05),释放TNF-α和NO水平增加(P<0.05)。LPSp+HBsAg致敏巨噬细胞诱导局部淋巴结细胞释放IL-4水平升高(P<0.05),诱导IFN-γ水平与单纯HBsAg致敏组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LPSp的佐剂机制为参与活化巨噬细胞,增强巨噬细胞对抗原的吞噬、消化和处理能力;同时促进HBsAg致敏的巨噬细胞诱导淋巴结内淋巴细胞释放IL-4,增强HBsAg致敏的巨噬细胞诱导Th2淋巴细胞活化,促进B细胞产生抗体。