局灶性脑缺血耐受和星形胶质细胞反应

目的 研究短暂性局灶性脑缺血预处理对永久性局灶性脑缺血的保护作用 ,及最佳预处理时间剂量 ,并探讨星形胶质细胞在脑缺血耐受中的反应。方法 采用开颅方法阻断大鼠大脑中动脉 ,通过观察大鼠脑梗死后神经功能损伤状况、脑梗死体积分析及病理形态学变化 ,评价不同的缺血预处理时间剂量 (10分钟、2 0分钟、30分钟 )对永久性局灶性脑缺血的保护作用。采用胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)免疫组化法观察星形胶质细胞在脑缺血耐受中的反应。结果 与对照组相比 ,缺血预处理 2 0分钟未引起明显的神经元损伤 ,但使永久性局灶性脑缺血后神经功能损伤减轻 ,梗死体积明显减小 (P <0 .0 1)。免疫组化显示 ,2 0分钟缺血预处理组及重复缺血组星形胶质细胞在损伤预处理侧广泛激活。结论 2 0分钟局灶性脑缺血预处理能够有效诱导脑缺血耐受。星形胶质细胞的激活可能与脑缺血耐受中神经元的存活相关。

大鼠局灶性脑缺血预处理的抗细胞凋亡作用机制的研究

目的 研究大鼠短暂局灶性脑缺血预处理对再次脑缺血神经细胞凋亡的保护作用 ,及bcl 2、bax与脑缺血耐受的关系。方法 用开颅方法阻断大鼠大脑中动脉 (MCA) 2 0分钟 ,3天后再次阻断 6小时。观察大鼠脑梗死体积及组织病理学改变 ,采用TUNEL法观察神经细胞凋亡状况 ,采用免疫组织化学方法观察bcl 2、bax蛋白表达的改变。结果 与假预处理组和缺血组相比 ,预处理后缺血组梗死灶体积明显减小 (均P <0 .0 1) ,半影区凋亡细胞数明显减少 (P <0 .0 1) ,bax蛋白表达下降 (P <0 .0 5 ) ,bcl 2蛋白表达显著上升 (P <0 .0 1)。结论 2 0分钟局灶性脑缺血预处理能够通过bcl

插入外源性白细胞介素2基因的肿瘤细胞的抗肿瘤抗转移作用

我们应用逆转录病毒载体pLXSN将人IL-2基因插入大鼠和人的肿瘤细胞.探讨了携带外源性IL-2基因的肿瘤细胞的体内外生物学特性及其意义.转基因细胞在体外培养中的细胞形态、生长特性以及软琼脂集落形成能力未见明显改变,但对杀伤性免疫活性细胞的杀伤更为敏感,与淋巴细胞混合培养的上清中测得更高水平的IFN和TNF活性.大鼠肿瘤细胞WBT插入IL-2基因后,其体内成瘤性明显下降.腹腔接种WBT/IL-2细胞可使大鼠获得抗肿瘤免疫能力以抑制皮下野生型WBT细胞的生长.携带IL-2基因的人和大鼠肿瘤细胞在裸鼠体内可以成瘤,但生长缓慢.具有高转移能力的Anip973细胞插入IL-2基因后,在裸鼠体内的转移性丧失.结果提示IL-2基因插入肿瘤细胞进行肿瘤基因治疗的有效性、可行性和发展潜能.

高低转移性人肺腺癌细胞膜磷脂组成分析

癌转移是一极其复杂的生物学过程,国内外研究表明,它与多种因素有关,但与膜脂质代谢的关系,在人癌细胞中,尚未见报导。磷脂是构成生物膜双脂层的基本成份。癌细胞的转移,与膜的性质有关,如细胞的粘附、运动、变形等。为探讨癌转移的分子生物学机制。

局灶性脑缺血预处理对再次缺血后微血管损伤及脑水肿的保护作用

目的 研究短暂局灶性脑缺血预处理对再次脑缺血后微血管损伤及脑水肿的保护作用。方法 采用开颅方法阻断大鼠大脑中动脉 (MCA) 2 0min ,3天后再次阻断 2 4h。应用TTC染色、TUNEL及透射电镜技术 ,观察大鼠脑缺血后梗死灶体积、损伤侧脑体积 ,组织病理学及超微结构改变。结果 同对照组相比 ,缺血预处理 2 0min不引起明显的神经元损伤 ,而能使再次的 2 4h局灶性脑缺血后梗死体积明显减小 ,微血管损伤及脑水肿明显减轻 ,半影区血管内皮细胞凋亡减少。结论 2 0min局灶性脑缺血预处理能够通过减轻微血管损伤及脑水肿对再次严重的脑缺血产生保护作用。

肺腺癌细胞微环境及转移与黏附分子表达的关系

目的 研究肺腺癌细胞生长环境及转移性与黏附分子CD4 4v6和CD2 9的表达关系。方法 将起源相同、转移性不同的两个肺腺癌细胞系AGZY和Anip分别用简便肿瘤多细胞球体 (MTS)培养法培养 ,并设常规单层贴壁细胞培养对照。通过倒置显微镜、扫描及透射电镜观察MTS形成情况 ,并用免疫组化法分别对MTS及贴壁细胞上CD4 4v6和CD2 9表达进行检测。结果 MTS培养成功 ,贴壁细胞与MTS在细胞结构及细胞连接结构上相似 ,两种MTS在形态及结构上差异无显著性。免疫组化结果显示 ,CD2 9在高转移性的Anip细胞及其MTS上呈阳性表达 ;在低转移性的AGZY细胞及其MTS上阴性表达。CD4 4v6在Anip和AGZY细胞及MTS上均呈阳性表达 ,差异无显著性。贴壁细胞与MTS上两种黏附分子表达均无差异。结论 成功建立了一种简易制备MTS的方法。细胞生长方式 (单层贴壁与MTS)可能不影响CD4 4v6和CD2 9的表达。CD2 9表达可能与肺腺癌转移性相关 ;CD4

高低转移性不同的人肺腺癌细胞膜脂肪酸分析

脂肪酸类是构成生物膜双脂层的非极性部分,在生物膜的功能方面起着重要作用。癌细胞的转移与膜的性质有关,如细胞的粘附、运动、变形等。以前,我们分析了人肺腺癌细胞的磷脂组成,现对该细胞系进行脂肪酸分析比较。

食管癌发生发展过程中RAR-βmRNA的原位表达

目的:研究RAR-βmRNA在食管癌发生发展过程中的作用,探讨维A酸(RA,retinoid acid)在食管癌高危人群中化学预防和化学治疗中应用的可行性. 方法:应用原位杂交方法检测了食管癌70例(原位癌30 例,鳞状细胞癌20例,腺癌20例)及增生性病变97例(单纯增生19例,不典型增生Ⅰ-Ⅲ分别为20例,39例,38 例)和正常食管黏膜鳞状上皮组织19例中RAR-βmRNA表达情况. 结果:在正常食管黏膜上皮、单纯增生、不典型增生上皮总体及其Ⅰ-Ⅲ、原位癌、侵袭性鳞状细胞癌及腺癌中RAR-βmRNA表达的阳性率分别为100%(19/19),94.7% (18/19),90%(18/20),69.2%(27/39),68.4%(26/38), 63.3%(19/30),60%(12/20),60%(12/20).正常食管黏膜上皮较不典型增生总体、原位癌和侵袭癌组织均有显著性差异(P<0.05). 结论:RAR-βmRNA表达的丢失与食管癌的发生发展有关, 用RA对表达RAR-β高危人群进行化学干预可能会得到预期效果.

食管癌及其癌前病变组织p16蛋白表达的研究

目的:探讨p16蛋白表达与食管癌发生发展的关系.方法:应用免疫组织化学方法检测了79例食管癌(原位癌30例,浸润性鳞状细胞癌19例,腺癌30例)及其116例增生性病变(单纯增生30例,不典型增生轻31例、中31例、重24例)和28例正常食管黏膜上皮组织中p16蛋白表达情况.结果:p16蛋白表达的阳性率分别为侵袭性鳞状细胞癌21.1%(4/19)、原位癌50%(15/30)、重度不典型增生83.3%(20/24)、中度不典型增生64.5%(20/31)、轻度不典型增生67.7%(20/31)、单纯增生80%(24/30)、正常组织60.7%(17/28).结论:p16蛋白表达的缺失可能与食管癌的发生发展有关.

E钙粘蛋白/catenin复合体在人非小细胞肺癌细胞系中的表达

目的 探讨E钙粘蛋白 catenin粘附系统在人非小细胞肺癌细胞系中的表达。 方法 采用免疫组织化学和RT PCR两种方法分别从蛋白及mRNA两个水平分析E钙粘蛋白、α catenin、β catenin在 7种人非小细胞肺癌细胞系中的表达情况。 结果 每个细胞系至少出现 1个、两个或多个E钙粘蛋白 /catenin复合体成分的表达异常。 结论 E钙粘蛋白、α catenin和 β catenin的蛋白及mRNA异常表达与人非小细胞肺癌有关。

几种脂肪酸对不同转移能力的人肺腺癌细胞膜脂流动性的影响

脂肪酸是细胞膜正常流动性的主要调节因素之一。不同转移表型癌细胞膜的脂肪酸组成有较大差异,其细胞膜流动性亦有显著差异。但不同脂肪酸对转移能力不同的癌细胞膜流动性的影响如何未见报导:本文应用荧光偏振技术对不同转移表型的人肺腺癌细胞经脂肪酸改造后膜流动性的改变进行了初步研究。

人肺腺癌染色体异常与转移的关系

本文对同一组织来源的具有不同转移能力的人肺腺癌AGZY-83a细胞系和Anip-973细胞系进行了细胞遗传学研究。G显带核型分析表明,这两个细胞系在染色体众数,正常染色体数、部分标记染色体的结构来源等均有差别。人肺腺癌细胞系染色体的变化和转移能力有密切关系,这可能与某些染色体的丢失、重排、增加等所引起的基因变化有关。

人淋巴瘤细胞系（HTL－90）的建立及其生物学特性

人淋巴瘤细胞系（ＨＴＬ－９０）建于一例患有盆腔肿瘤的腹水瘤细胞，瘤组织经细胞学和组织学确定为恶性淋巴瘤，并命名为ＨＴＬ－９０。利用免疫组织化学、细胞遗传学以及分子遗传学手段对ＨＴＬ－９０细胞系的免疫表型、细胞核型及Ｔ－细胞受体基因重排，进一步分析鉴定发现ＨＴＬ－９０细胞系免疫表型显示ＣＤ７＋／ＣＤ３４＋／ＨＬＡＤＲ＋／ＣＤ４－／ＣＤ８－表明本细胞系是具有多种分化潜能的祖干细胞来源，并具有向Ｔ细胞分化的倾向。细胞遗传学分析显示细胞核型表现为染色体众数为４７，并呈克隆性染色体异常。综合文献复习提出ｄｅｌ（６）及１１ｑ２３－２４部位染色体异常可能是低度分化的淋巴肿瘤特征性染色体改变。ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｌｏｔ分析显示ＲＣＲ受体基因（ＴＣＲγ和ＴＣＲδ）和免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因发生重排，ＴＣＲβ基因保持胚系结构。

高低转移性人肺腺癌细胞膜脂区流动性的测定及比较

本文应用荧光探剂DPH(1,6-dipheny1-1,3,5-hexatriene)及荧光偏振技术,对高转移性的人肺腺癌细胞系Anip-973及其低转移性的母系AGiY-83a,经S相(S-phase)同步后细胞膜的流动性进行了测定并作了对比分析。结果表明,高转移性的人肺腺癌细胞膜比其低转移性的母系细胞膜具有较大流动性。

人肺腺癌细胞在裸小鼠体内脑、骨、肌肉转移模型的建立

我们将人肺腺癌细胞系Ａｎｉｐ－１９代腹水型细胞，经裸小鼠体内传代和体外培养反复交替传代筛选，获得了Ａｎｉｐ系列的亚系，给以代号（８２５、９２６、９７３）．然后对Ａｎｉｐ－１９代腹水型癌细胞和Ａｎｉｐ系列的亚系进行转移能力比较。结果Ａｎｉｐ系列亚系中Ａｎｉｐ９７３转移能力最强，并出现脑、骨、肌肉转移。而Ａｎｉｐ１９代腹水型细胞未出现脑、骨、肌肉转移，肺转移率也低于Ａｎｉｐ９７３。

E钙粘蛋白、α-catenin、β-catenin在人肺腺癌组织中的表达

目的 探讨E钙粘蛋白 (ECD)、α catenin(α cat)及 β catenin( β cat)在人肺腺癌组织中的表达与肺腺癌分化、转移的关系。方法 采用免疫组化的方法 ,对 5 7例肺原发腺癌和 2 7例淋巴结转移癌的ECD、α cat、β cat进行了半定量分析。结果 ECD在低分化组中表达明显低于高分化组 ,在淋巴结转移癌中同样与分化相关 ,但原发癌ECD的表达与淋巴结转移的发生无关。α cat和 β cat在低分化组中的表达也明显低于高分化组 (P <0 .0 5 ) ,且两者在原发癌中表达的下调与淋巴结转移癌的发生有着明显的相关性 (P <0 .0 5 )。结论 ECD、α cat、β cat表达的减少伴随着肺腺癌的去分化 ,并且α cat、β cat表达异常和淋巴结转移癌有极幂切的相关性。

BRI基因在人非小细胞肺癌细胞系中的差异表达

目的 研究BRI基因在人非小细胞肺癌细胞系中的表达 ,探讨其表达情况与肺癌转移能力的相关性。方法 应用半定量RT PCR、Northernblot法分析一对来源相同、转移能力不同的人肺腺癌细胞系AGZY83 a和Anip973中BRI基因的差异表达 ,并检测另外 6个肺癌细胞系SPC A 1、A5 49、95D、TKB 18、GLC 82和PAa中BRI基因的表达情况 ,分析其过度表达与肺癌转移能力的关系。结果 BRI基因在两同源细胞系中确实存在明显的差异表达 ,在具有高转移潜能的Anip973中呈高表达。在其他 6个不同转移潜能的肺癌细胞系中BRI的表达情况也与其转移能力有一定的相关性。BRI基因存在 1.6kb和 2 .0kb两个转录本 ,在肺癌细胞系中以 1.6kb转录本为主。结论 BRImRNA尤其是 1.

不同转移表型人肺癌细胞膜磷脂、脂肪酸组成和膜流动性分析

目的探讨肿瘤细胞膜组成及流动性在癌转移中的作用及机制。方法以具有不同转移表型的人肺腺癌细胞系Ａｎｉｐ及ＡＧＺＹ为对象，采用３２Ｐ标记法及薄膜层层析和气相层析技术分析两个细胞系的膜脂及脂肪酸组成，并用荧光偏振技术测定两者的膜脂流动性。结果两者在磷脂和脂肪酸及膜流动性上均有显著不同，转移性较高的Ａｎｉｐ细胞质膜含有较多的磷脂酸（ＰＡ）和磷脂酰肌醇（ＰＩ）及较少的肉豆蔻酸（ｍｙｒｉｓｔｉｃａｃｉｄ），并具有较低的流动性。结论癌细胞的转移能力与膜脂肪酸组成有密切关系。

抗人肺癌细胞转移相关抗原单克隆抗体的制备及初步鉴定

用转移能力及其它生物学特性不同的2个人肺腺癌细胞系免疫BALB/c小鼠,制备出一组可与人肺腺癌细胞发生特异性反应,而与其它脏器肿瘤组织无交叉反应的单克隆抗体。经初步鉴定,其中的3个单抗分别识别低转移或高转移肺腺癌细胞系表面抗原。