牙龈卟啉单胞菌感染对载脂蛋白e基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

目的:探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)引起的炎症和氧化应激反应对动脉粥样硬化的影响及作用机制。方法:采用8周龄载脂蛋白e基因敲除(ApoE knockout,ApoE-/-)小鼠建立动脉粥样硬化动物模型,将小鼠随机分为两组:(1)磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)健康对照组:8只ApoE-/-小鼠,普通饮食+PBS鼠尾静脉注射;(2)P.gingivalis感染组:8只ApoE-/-小鼠,普通饮食+P.gingivalis鼠尾静脉注射。1周3次,隔天1次,共10次。4周后处死,取心脏组织进行油红O染色,血清进行酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),主动脉进行实时荧光定量PCR以及Western blot检测。结果:P.gingivalis感染组较PBS健康对照组可以显著加重ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的形成,增加血清中炎症介质,如白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)以及氧化应激介质8-羟脱氧鸟苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OHDG)表达,增加主动脉组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、NADPH氧化酶(NADPH oxidase,NOX)-2和NOX-4基因的mRNA水平。P.gingivalis感染后在主动脉组织中观察到核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)表达有增高趋势。结论:P.gingivalis感染会加速ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化进程,诱导氧化应激和炎症反应;NF-κB信号通路可能是P.gingivalis加速动脉粥样硬化形成的重要作用机制。

线粒体基因7.4kbp大片段缺失突变与侵袭性牙周炎的关系研究

目的:探讨线粒体基因(mtDNA)7.4 kbp大片段缺失突变和侵袭性牙周炎(AgP)的关系。方法:选取20例AgP患者(AgP组)和20例牙周健康者(对照组),收集外周血及牙周翻瓣术及牙冠延长术中切取的牙龈组织,同时收集10例慢性牙周炎者(CP组)牙周翻瓣术中切取的组织。采用长距离PCR方法检测血样本和牙龈组织样本中mtDNA 7.4 kbp大片段缺失,比较3组间的差异。结果:AgP组20例牙龈组织中1例存在mtDNA 7.4 kbp大片段缺失,AgP组2例组织和CP组1例组织中检测到目前尚未报告过的mtDNA 5 537 bp大片段缺失突变。所有血样和对照者牙龈组织中均未检测到大片段缺失突变。结论:AgP患者牙龈组织中存在mtDNA 7.4 kbp大片段缺失,发现一种新的mtDNA 5 537 bp大片段缺失突变。