青蒿琥酯对肝癌细胞增殖的抑制作用和机制

目的考察青蒿琥酯对肝癌细胞的增殖及其相关作用机制。方法应用CellTiter-Glo^■ Luminescent Cell Viability Assay活性试剂检测青蒿琥酯单独与索拉非尼联合用药对Huh7、HepG2细胞的活力。采用流式细胞术检测Huh7、HepG2细胞周期的变化,Western blotting检测AKT/mTOR/c-Myc信号通路相关蛋白的表达量。结果细胞活力检测结果显示Huh7、HepG2细胞的活力随作用时间-浓度增加而减少,在青蒿琥酯12.5μmol·L-1时,与索拉非尼联合应用,联合用药组对肝癌细胞生长的抑制率显著高于索拉非尼单药组,流式细胞的结果显示青蒿琥酯以浓度依赖的方式使Huh7、HepG2细胞的G2/M细胞周期比例逐渐增加,Western blotting结果表明青蒿琥酯单独作用肝癌细胞下调了p-AKT、p-S6、c-Myc蛋白水平。青蒿琥酯与索拉非尼联用显著地降低了肝癌细胞p-AKT、c-Myc水平。结论青蒿琥酯可能通过抑制AKT/mTOR/c-Myc信号通路使Huh7、HepG2细胞阻滞在G2/M期,并且青蒿琥酯可能通过降低p-AKT、c-Myc水平来增加了索拉非尼的敏感度。

基于代谢组学分析青蒿琥酯治疗肝癌的作用机制

目的:采用GC-MS联用技术探索青蒿琥酯治疗肝癌的作用机制,为该药物在肝癌治疗中的临床应用提供实验依据。方法:应用发光法细胞活力检测试剂盒(Cell Titer-Glo? Luminescent Cell Viability Assay)检测不同浓度青蒿琥酯(0,12. 5,25,50,100μmol·L-1)作用于人肝癌Huh7,SMMC-7721细胞24,48,72 h的活性。采用GC-MS联用技术分析青蒿琥酯作用于2种肝癌细胞(Huh7,SMMC-7721) 24 h后代谢物的变化,利用Postrun Analysis 4. 41工作站对数据进行预处理,采用偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)对两组差异代谢物进行分析,通过Metabo Analyst 3. 0软件对差异代谢物进行代谢通路分析。结果:与正常组相比,青蒿琥酯作用于2种肝癌细胞后,细胞内相同代谢物共有39种发生了显著变化,主要涉及到氨基酰-转运RNA(tRNA)生物合成,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,精氨酸和脯氨酸代谢,谷胱甘肽代谢5条代谢通路。结论:青蒿琥酯(12. 5~100μmol·L-1)均能够抑制肝癌细胞(Huh7,SMMC-7721)的生长,主要涉及到5条代谢通路,这可能是青蒿琥酯抗肝癌的作用途径。