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犊牛轮状病毒RT-LAMP检测方法的建立与应用
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作者 韩子阳 赵洋 +8 位作者 唐欣如 张榕兰 冯静萱 王嘉羽 特木尔巴根 郭宇 武娅楠 张志丹 周伟光 《当代畜禽养殖业》 2023年第6期7-12,共6页
为能够现场快速检测出牛场牛轮状病毒(bovine rotavirus,BRV),本试验根据GenBank中BRV NSP5基因序列,针对其保守区域设计了一套RT-LAMP引物,通过对反应体系中Mg2+、dNTPs、内引物的用量以及反应时间和温度进行优化,建立一种能够快速检测... 为能够现场快速检测出牛场牛轮状病毒(bovine rotavirus,BRV),本试验根据GenBank中BRV NSP5基因序列,针对其保守区域设计了一套RT-LAMP引物,通过对反应体系中Mg2+、dNTPs、内引物的用量以及反应时间和温度进行优化,建立一种能够快速检测BRV的反转录-环介导等温扩增技术(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)方法,并验证该方法的特异性、敏感性和重复性,选择出最优检测方法应用于后续临床样品的检验。结果表明:RT-LAMP方法的最佳反应温度为64℃、反应时间为45 min,Mg2+(100 mmol/L)和dNTPs(10 mmol/L)的最佳用量为1.2和1.5μL,内引物最佳用量为2μL;该方法从多种牛腹泻与呼吸道疾病的病原中只检测到BRV,其灵敏度为1×102 copies/μL,而普通RT-PCR的灵敏度为1×103 copies/μL,且重复性高;利用本试验建立的BRV RT-LAMP检测法和普通RT-PCR对38份临床样品进行检测,阳性率分别为47.4%和15.7%。综上所述,本试验建立的RT-LAMP检测方法具有检测速度快、特异性强、灵敏度高和可信度高等优点,且结果易于判定、便于现场检测,在BRV检测方面具有良好的应用前景,为BRV的流行病学调查及检测提供重要的技术支撑。 展开更多
关键词 牛轮状病毒 环介导等温扩增 敏感性 特异性
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生物钟基因与心血管疾病的研究进展 被引量:8
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作者 杨瑾 徐志峰 +4 位作者 苏嘉 范淑芳 王嘉羽 季林丹 陈晓敏 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期610-615,共6页
心血管疾病严重威胁着我国居民的健康。生物钟在心血管系统的生理过程中起着重要的调节作用,包括调节血压、心脏收缩和心率等。在环境周期信号的作用下,生物钟基因及其编码的蛋白质组成转录-翻译反馈环路,通过神经传导和体液途径实现信... 心血管疾病严重威胁着我国居民的健康。生物钟在心血管系统的生理过程中起着重要的调节作用,包括调节血压、心脏收缩和心率等。在环境周期信号的作用下,生物钟基因及其编码的蛋白质组成转录-翻译反馈环路,通过神经传导和体液途径实现信号输出,从而调节生物体的生理、生化和行为的昼夜节律。心血管疾病的发病时间具有昼夜变化的特点,一些生物钟基因表达的改变促进了心血管疾病的进展。该文介绍了心血管系统的昼夜节律,整理总结了高血压、动脉粥样硬化与心肌梗死等疾病中的相关生物钟基因及其分子机制。对昼夜节律和生物钟的研究为心血管疾病的预防和治疗提供了新思路。 展开更多
关键词 心血管疾病 昼夜节律 生物钟基因
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小实验的启示
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作者 王嘉羽 《读书与作文.低年级版》 2010年第4期14-14,共1页
讲桌上,放着三只大小相同的玻璃杯,其中一只杯子里装满了水,另一只杯子里装满了黄褐色的细沙,还有一只是空杯子,在三只杯子的旁边,放着一堆大小不一的石子。
关键词 小实验 杯子 玻璃杯 讲桌
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