FBXW7调控非小细胞肺癌上皮间质转化的作用机制

目的:研究FBXW7在非小细胞肺癌上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)过程中发挥的作用。方法:收集100对非小细胞肺癌组织和对应的癌旁组织,利用免疫组化检测FBXW7在癌组织和癌旁组织中的表达。利用Western blot检测FBXW7在细胞系中的表达及FBXW7对EMT部分标志蛋白的影响。利用Transwell实验检测FBXW7对NSCLC细胞迁移能力的影响。免疫共沉淀实验和泛素化的Western blot验证FBXW7与Snail1的关系。结果:FBXW7在NSCLC组织中的表达明显低于对应癌旁组织中的表达。FBXW7在正常肺上皮细胞中的表达也明显高于4种非小细胞肺癌细胞系中的表达。FBXW7过表达显著抑制A549细胞的迁移能力。FBXW7过表达也明显抑制NSCLC细胞的EMT。机制研究发现,FBXW7可以直接结合并泛素化降解Snail1蛋白,并且Snail1部分逆转FBXW7对NSCLC细胞EMT标志蛋白的影响。结论:FBXW7对NSCLC细胞EMT的调控部分依赖于泛素化降解Snail1蛋白。

miR-367-3p在非小细胞肺癌组织中的表达及对细胞功能的影响

目的:研究miR-367-3p在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中促进肿瘤生长的作用机制。方法:收集非小细胞肺癌患者的临床标本,检测miR-367-3p在非小细胞肺癌组织中的表达。利用qRT-PCR、MTT和流式细胞术分别评估miR-367-3p的表达改变对肿瘤细胞增殖和周期的影响。Western blot检测miR-367-3p表达改变对FBXW7的影响。双荧光素酶实验验证miR-367-3p与FBXW7之间的直接关系。结果:miR-367-3p在非小细胞肺癌组织中的表达明显高于对应癌旁组织。miR-367-3p作为促癌的miRNA,在非小细胞肺癌细胞中促进肿瘤细胞增殖和细胞周期进程。miR-367-3p对NSCLC细胞生物学功能的影响部分依赖靶向抑制FBXW7。结论:miR-367-3p通过靶向抑制FBXW7的表达促进NSCLC细胞增殖和周期。

唑来膦酸对乳腺癌细胞系MCF-7的凋亡作用及其机制

目的:研究唑来膦酸对乳腺癌MCF-7细胞的凋亡作用和途径。方法:培养乳腺癌MCF-7细胞株,用不同浓度梯度的唑来膦酸进行处理,MTT、Annexin V-PI双染法进行生长抑制和凋亡情况的检测和分析,Western blot检测相关蛋白表达情况。结果:唑来膦酸作用于MCF-7细胞后,MTT、Annexin V-PI双染法检测发现药物对细胞呈明显的生长抑制作用,且有明显的剂量依赖性。当作用时间为48h时抑制作用最为明显。Western blot检测发现,使用唑来膦酸后,Bcl-2、Bcl-XL和Survivin 3个凋亡抑制蛋白表达水平相较于未处理组(NM)表达降低,促凋亡蛋白Bax表达明显升高。同时,Caspase-3和Caspase-9相较于未处理组,表达水平也有明显的升高,并都呈现剂量相关性。结论:唑来膦酸通过线粒体凋亡途径促进乳腺癌MCF-7细胞凋亡,且具有剂量依赖性。

阻断Hh信号通路活性增敏Let-7抑制三阴性乳腺癌细胞增殖的作用及机制研究

目的:目的:探讨阻断Hh信号通路活性增敏Let-7抑制三阴性乳腺癌细胞增殖的作用及机制研究。方法:应用qRT-PCR和Western Blot、免疫组化(IHC)和免疫荧光(IF)在内的多种生物学实验方法,从临床标本及体外细胞实验的角度探究Let-7增敏TNBC的作用及可能与Hh信号通路的相关性。结果:阻断Hh信号通路降低了MDA-MB-231及BT-20细胞的增殖能力,并且增强了Let-7对三阴乳腺癌细胞系增殖能力的抑制作用。Let-7对MDA-MB-231及BT-20细胞内Cyclin D1水平的影响微弱,但是通过Hh通路的抑制剂环巴胺则有效的增强了Let-7对Cyclin D1的抑制作用,进一步在肿瘤干细胞样细胞亚群中,Hh通路抑制剂降低了MDA-MB-231及BT-20细胞系中ALDH1阳性干细胞亚群的比例,增强了Let-7对乳腺癌干细胞亚群自我更新能力的抑制作用。结论:Hh通路抑制剂通过对Cyclin D1的共抑制可以增强Let-7抑制三阴性乳腺癌细胞的增殖。

西北地区三个医学中心食管癌根治术后患者发生吻合口瘘的风险分析

目的评估西北地区三个医学中心食管癌根治术后患者发生吻合口瘘的风险因素。方法回顾性分析西北地区三个医学中心接受食管癌根治手术的544例患者的临床资料,分析患者相关基础疾病及围手术期处理策略与术后吻合口瘘发生率的关系。结果入组患者来源的3家医院均具有一定的区域代表性。544例患者术后吻合口瘘发生率为9.2%(50/544),发生瘘的平均时间为(6.4±1.02)d,无死亡。食管癌根治术后吻合口瘘单因素分析结果显示,患者年龄、糖尿病、术前血清白蛋白水平、呼吸系统疾病、吻合部位及手术时间均与食管癌根治术后吻合口瘘有关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,术前合并糖尿病、呼吸系统疾病、术前血清清蛋白水平低、手术时间≥4 h是食管癌患者根治术后发生吻合口瘘的独立危险因素(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,肠内营养开始时间与吻合口愈合情况及术后第7天血清白蛋白浓度均呈现正相关(P<0.05)。结论合并有糖尿病、高血压、呼吸系统疾病、低白蛋白血症及较长手术时间的患者更易发生食管吻合口的愈合不良,术后早期进行肠内营养支持治疗,有利于吻合口愈合及术后第7天血清白蛋白水平的恢复。

授人以鱼 不如授之以渔——谈换位思考法在语文阅读教学中的作用

一、创设情境。激发兴趣 七年级学生的生活阅历非常有限．对许多课文的内容存在明显的心理差距．对课文涉及的背景环境也缺乏了解，这就为学生准确理解文章主旨造成了重重障碍。所以，教师首先应为学生创设故事发生的背景情境，帮助学生了解文章内容，为其由现实角色进入文章角色提供有利的心理条件准备。