金黄色葡萄球菌小菌落突变株体外感染乳腺上皮细胞的研究

为研究金黄色葡萄球菌小菌落突变株(S.aureus small colony variants,SASCVs)与正常株对原代培养的乳腺上皮细胞的侵袭情况,并观察对比其对细胞结构的损坏程度和对乳腺上皮细胞的影响,本试验对由云南农业大学动物医学实验教学中心实验室分离的一株SASCV进行体外感染小鼠乳腺上皮细胞试验,将分离出的一株SASCV及质控菌株ATCC 25923分别注入实验室体外培养的小鼠乳腺上皮细胞内,采用普通光镜和扫描电子显微镜观察质控菌株ATCC 25923及SASCVs诱导乳腺上皮细胞凋亡的细胞形态学变化;用流式细胞仪(Annexin VFITC/PI双染法)定量检测质控菌株ATCC 25923及SASCVs感染乳腺上皮细胞凋亡的诱导作用,观察细胞的变化。结果显示,质控菌株ATCC 25923及SASCVs感染小鼠乳腺上皮细胞3h后,可诱导乳腺上皮细胞发生凋亡,显示为细胞核皱缩,染色质边缘化和细胞浆内空泡增多等典型的凋亡特征。Annexin V-FITC/PI双染法检测后发现,与对照组相比,感染组细胞凋亡率明显升高,并且阳性对照组的细胞凋亡率明显高于试验组。结果表明,SASCVs在侵染细胞的过程中达到一定数量不再上升;SASCVs的凋亡率明显的较正常金黄色葡萄球菌低。因此,SASCVs也可诱导乳腺上皮细胞凋亡,具有细胞凋亡的典型形态特征。本试验结果为以后预防和控制SASCVs感染奶牛慢性乳房炎提供试验依据。

胸腺嘧啶依赖型金黄色葡萄球菌小菌落突变株的分离鉴定

本试验对由患慢性奶牛乳房炎奶样中分离出的1株疑似金黄色葡萄球菌小菌落突变株(SCVs)进行形态观察、金黄色葡萄球菌相关保守基因片段(nuc、nucA、16SrDNA)多重PCR扩增鉴定、药敏试验、生理生化特性研究及补偿试验。结果显示分离出1株金黄色葡萄球菌SCVs,该菌含有金黄色葡萄球菌菌种特异性基因nuc和nucA;与金黄色葡萄球菌质控菌株ATCC 25923的抑菌圈大小明显不同;菌落形态主要表现为菌落细小、生长缓慢、溶血能力下降;凝固酶活性下降;耐盐能力降低;革兰氏染色为革兰氏阳性球菌,呈葡萄状排列;补偿试验鉴定该金黄色葡萄球菌SCVs为胸腺嘧啶依赖型。结果表明成功分离鉴定出1株胸腺嘧啶依赖型金黄色葡萄球菌SCVs,为由金黄色葡萄球菌SCVs引起的奶牛慢性乳房炎的预防和控制及其致病机制的研究奠定前期基础。

一株金黄色葡萄球菌小菌落突变株全基因组测序分析

对金黄色葡萄球菌小菌落突变株(small colony mutant strains Staphylococcus aureus,SASCVs)和CP000253.1基因组差异进行了研究,为后续研究金葡菌分泌抗药物相关物质能力提供数据支持。对一株金葡菌小菌落突变株进行全基因组测序,并与CP000253.1参考序列进行序列比较。结果显示,金葡菌SCVs的文库插入片段为350bp,测序读长为150bp,SCVs的原始数据量为551 Mb,SCVs的碱基含量分布在处理前后有所不同,通过重测序,存在单核苷酸多态性(SNP)的数量较大。金葡菌SCVs与CP000253.1参考序列之间存在明显的序列差异,该数据为研究金葡菌感染奶牛乳房炎提供了一定的序列依据。

金黄色葡萄球菌小菌落突变株感染小鼠乳房炎模型的建立

为了建立由金黄色葡萄球菌小菌落突变株（small colony variants，SCVs）诱发感染乳房炎动物模型，本试验取40只分娩6-8d的BALB／c小鼠，随机分成8组（n=5），分别为阴性对照、生理盐水组和不同剂量金黄色葡萄球菌SCVs及金黄色葡萄球菌质控菌株（1．0×10^3、1．0×10^4、1．0×10^5CFU／mL）试验组，对生理盐水组及各试验组小鼠第4对乳腺注射生理盐水和对应剂量的菌液（50mL／只），注射后24h解剖观察病理变化，一侧乳头制作石蜡切片，另一侧研磨后用ELISA检测试剂盒检测组织匀浆上清中的TNF-α含量。结果显示，注射菌液的试验组，小鼠均出现不同程度的临床症状，乳腺出现不同程度的炎性症状和病理变化。同一注射剂量下，金黄色葡萄球菌质控菌株较金黄色葡萄球菌SCVs病理变化严重，通过SPSS等软件对试验数据进行统计分析后得出，高浓度处理组金黄色葡萄球菌质控菌株的TNF-α表达量极显著高于金黄色葡萄球菌SCVs（P〈0．01）。结果表明，金黄色葡萄球菌及其SCVs均可用来建立小鼠乳房炎模型，且金黄色葡萄球菌SCVs引起的情况较其正常株轻微，这一结果为由金黄色葡萄球菌SCVs引起的奶牛慢性乳房炎的预防和控制及其致病机制的研究提供了新的材料和有益的探索，为SCVs与慢性乳房炎更深层次关系的研究奠定基础。

竹鼠沙门氏菌与链球菌混合感染的诊断

竹鼠是食用和药用的上等野味补品,市场空间巨大,随着近年来人工养殖的繁盛,竹鼠的有关疾病日益增多。本文对前来云南农业大学附属动物医院就诊的竹鼠进行了临床检查和实验室检查。通过病理剖检、细菌分离培养与鉴定、生化试验及体内外寄生虫检查等,诊断竹鼠是由于沙门氏菌和链球菌混合感染引起的死亡。药敏试验结果表明分离得到的菌株对头孢他啶、头孢吡肟、庆大霉素极度敏感,对环丙沙星等高度敏感;对氨苄青霉素、恩诺沙星等中度敏感;对诺氟沙星、新霉素等低敏敏感;对环丙沙星、强力霉素等不敏感。

猪巴氏杆菌病的病原分离鉴定及药敏试验

为了及时鉴定猪巴氏杆菌病,对疾病做出准确额治疗。本实验通过细菌分离、生化试验、动物试验、药敏试验等方法对规模化养猪场的三例疑似巴氏杆菌病例猪进行病原菌分离鉴定、药敏试验等系列检测。结果显示,从三例疑似巴氏杆菌病例猪中均分离到了巴氏杆菌;三例猪巴氏杆菌病例的高敏药物分别是:左氧氟沙星、头孢哌酮、左氧氟沙星。本实验成功分离了巴氏杆菌并对其进行了药敏试验,对猪巴氏杆菌病的准确诊断以及治疗提供一定的理论依据。

兔胎儿肺脏发育的组织形态学特征

为阐明兔胎儿肺脏发育的组织形态学特征,采集4组兔胎儿(平均体长分别为1.9、2.75、4.7 cm和10.35 cm)肺脏,经制备石蜡切片,显微镜观察组织结构变化。结果显示,1.9 cm组,肺脏只见两条主支气管,由假复层柱状上皮组成;2.75 cm组,已形成支气管树,分支形成许多腺管状的细支气管结构,末端形成终蕾;在4.7 cm组,已形成终末细支气管,由单层立方上皮构成;10.35 cm组,已形成终囊(原始肺泡),囊壁较厚,只有少量终囊分化出肺泡Ⅰ型和Ⅱ型细胞,但也存在未形成终囊及终末细支气管的肺间质区域。这些结果表明,4组兔胎儿肺脏发育分别处于肺芽期、假腺期、小管期和终囊期。

浅析猪排红色尿液的常见病因

生产中随着猪饲养密度的提高和应激因素的增加,猪病种类明显增多,病情也日趋复杂,疾病成为养猪业最大的威胁。红尿是许多猪病的常见伴发症状,引起猪排红尿的原因很多,如传染性因素、营养性因素、中毒病、遗传因素、药物性因素等本文着重从各种红尿的成份出发,如血尿、血红蛋白尿、肌红蛋白尿、布林尿等方面分析,为猪病确诊及治疗提供了依据。

一例奶牛不孕症的辩证治疗

中兽医学(中国传统兽医学)源远流长,是我国文化遗产的重要组成部分,是几千年来我国广大兽医工作者长期与疾病作斗争的经验总结。在当今社会,对畜禽疾病的防治,普遍应用化学药物、抗生素制剂和放射等疗法,严重影响到了畜禽产品的品质,进而直接影响人类健康。为此世界各国都在广泛地寻求具有高效、低毒副作用的诊疗方法,而传统中兽医运用天然药物、针灸、按摩等防治畜禽疾病已成为世界兽医发展的新动向〔1〕。本文介绍了中兽医的基本临诊理念,总结了一例奶牛不孕症的中兽医治疗过程,突出了在现今错综复杂的疾病面前中兽医辩证施治及临床发展的必然性。

奶牛乳房炎无乳链球菌的分离鉴定

为了能及时准确鉴定出奶牛乳房炎的病原,试验对规模化牛场的奶样进行细菌分离培养,从细菌的形态、生化特性、PCR扩增、动物回归试验等方面进行鉴定。结果表明:分离的菌株在形态、生化特性等方面疑似为无乳链球菌(GBS),PCR扩增及基因比对与GBS的同源性高达97%~98%,动物回归试验结果显示可引起动物乳房炎。说明分离的菌株为GBS。

影响猪肉性状相关基因的研究进展

本综述旨在对影响猪肉质性状的相关基因进行介绍,掌握相关基因在国内外的研究动态,分析不同因素、基因对肉质性状的影响,以期在基因水平调控肉质品质提供理论参考。通过阅读大量的相关文献,作者对影响猪肉质性状的主效基因如氟烷基因(halothane gene)、酸肉基因(rendement napole);候选基因如脂肪酸结合蛋白(fatty acid-binding protein)、脂蛋白酯酶(lipoprotein lipase)、瘦素(leptin)、脂联素(ADIPOQ);脂肪沉积过程中的关键调控因子如PPARγ因子、C/EBPs,三者的研究进展进行综述,为进一步指导实践,满足消费者的需求提供了一定的理论依据。

不同发育时期兔胎儿肝脏发育形态学观察

家兔既是重要的试验动物，也是重要的经济动物。随着家兔育种工作的进行和饲养管理科学水平的提高，对兔的生理解剖、细胞结构、基因组合、生活习性、消化特点、新陈代谢、生态环境、繁殖规律、生长发育、饲养管理等方面开展了卓有成效的系统研究。