GNL3蛋白在胃癌中的表达及其在细胞增殖、侵袭以及迁移中的作用

目的探讨鸟嘌呤核苷酸结合蛋白样3(guanine nucleotide binding protein-like 3,GNL3)蛋白在胃癌中的表达,探明GNL3蛋白在胃癌增殖、迁移及侵袭等生物学功能中的作用。方法数据库分析GNL3 mRNA在胃癌组织中的表达情况;采用免疫组化SP法检测51例胃癌组织和对应癌旁正常组织中GNL3蛋白表达;χ^(2)检验分析GNL3蛋白表达与胃癌临床病理特征之间的关系;通过转染小发夹RNA(small hairpin RNA,sh-RNA)沉默胃癌细胞中GNL3的表达,并应用Western blot法验证沉默效率。采用CCK-8、平板克隆和EdU实验检测沉默GNL3对胃癌细胞增殖能力的影响。采用细胞划痕和Transwell实验检测沉默GNL3对胃癌细胞侵袭和迁移能力的影响。结果SangerBox和UALCAN数据库检索结果显示,GNL3 mRNA在胃癌组织中的表达显著增加(P均<0.01)。免疫组化结果显示,GNL3蛋白在胃癌组织中的阳性率(96.1%)和高表达率(78.4%)显著高于癌旁组织(74.5%、51.0%,P<0.01),并且GNL3高表达与胃癌淋巴结转移(χ^(2)=4.933,P=0.026)具有相关性。CCK-8、平板克隆以及EdU实验结果显示,沉默GNL3可抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖能力。细胞划痕和Transwell实验结果显示,沉默GNL3可抑制胃癌细胞SGC-7901的迁移和侵袭能力。结论GNL3蛋白在胃癌组织中高表达,且与胃癌细胞增殖、迁移及侵袭能力密切相关。

结肠癌组织中SRSF1蛋白的表达及其临床意义

目的 探讨SRSF1在结肠癌中的表达及其与临床病理特征、预后的关系。方法 应用癌症基因组图谱(TCGA)和GEO数据库分析SRSF1 mRNA在结肠癌、正常结肠组织中的表达。采用免疫组化法检测SRSF1蛋白在94例结肠癌和86例癌旁正常组织中的表达,分析其表达与结肠癌临床病理特征的关系。应用Kaplan-Meier生存法分析SRSF1蛋白表达与结肠癌患者生存时间的相关性;采用Cox回归模型分析SRSF1在结肠癌风险预测中的评估价值。结果 TCGA和GEO数据库结果显示SRSF1 mRNA在结肠癌中高表达(P<0.05)。免疫组化检测显示SRSF1蛋白在结肠癌组织中的阳性率和高表达率分别为92.6%(87/94)和67.0%(63/94),显著高于癌旁正常组织(57.0%、11.6%)。χ^(2)=检验结果显示SRSF1表达水平与结肠癌患者临床分期相关(P=0.028)。Kaplan-Meier生存分析表明:SRSF1蛋白高表达结肠癌患者的总生存期低于SRSF1蛋白低表达患者(P=0.040)。Cox单因素回归分析表明:淋巴结转移(HR:3.638,95%CI=1.913~6.917,P<0.001)、临床肿瘤分期(HR:4.313,95%CI=2.228~8.348,P<0.001)和SRSF1蛋白高表达(HR:2.130,95%CI=1.010~4.492,P=0.047)是影响结肠癌患者预后的独立风险因素。结论 SRSF1表达与结肠癌的发生、发展及预后密切相关,可作为结肠癌预后评估的潜在标志物。

肝细胞癌中NCAPD2的表达及临床意义

目的探讨染色体凝缩蛋白复合物Ⅰ的亚基D2(non-SMC condensinⅠcomplex subunit D2,NCAPD2)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的临床价值。方法应用UALCAN数据库分析正常肝组织和HCC组织中NCAPD2 mRNA的表达及其与临床病理学特征的关系;应用免疫组化SP两步法检测正常肝组织和HCC组织中NCAPD2蛋白的表达,并分析其与临床病理学特征之间的相关性;应用GEPIA和Oncolnc数据库分析NCAPD2 mRNA表达与HCC患者生存期的关系;运用GO富集分析和STRING数据库筛查NCAPD2可能参与的生物学功能及蛋白互作关系。结果UALCAN数据库分析结果显示,NCAPD2 mRNA表达在HCC组织中显著增强,其高表达与HCC临床分期、组织学分级和TP53突变呈正相关(P<0.05)。免疫组化结果显示,NCAPD2在低分化癌中的强阳性率(68.0%,17/25)明显高于中分化(34.0%,14/41)和高分化癌(25.0%,1/4)(P<0.05),NCAPD2蛋白在临床分期Ⅲ+Ⅳ期HCC组织中的强阳性率(55.0%,33/60)明显高于Ⅰ+Ⅱ期HCC组织(20.0%,2/10)(P<0.05)。与癌旁组织相比,HCC组织中NCAPD2蛋白表达水平显著升高(P<0.01),且与HCC组织学分级和临床分期关系密切。生存分析结果显示,NCAPD2高表达组患者的总生存率和无瘤生存率均显著低于低表达组(P<0.05)。生信分析结果显示,NCAPD2主要参与肿瘤的细胞周期和增殖等生物学功能,并与细胞周期进程相关蛋白相互作用。结论NCAPD2在HCC中异常表达且发挥重要作用,可能作为HCC早期诊断生物标志物及药物治疗新靶点。

NQO1生物活性药物β-Lapachone抑制皮肤鳞状细胞癌A431增殖、诱导周期阻滞及ROS生成

目的探讨NQO1蛋白在皮肤鳞状细胞癌(cutaneous squamous cell carcinoma,CSCC)组织中的表达及β-Lapachone在CSCC中的抗肿瘤作用。方法采用免疫组化法检测76例CSCC组织和13例正常皮肤组织中NQO1的表达;分析NQO1表达与CSCC临床病理特征的关系;体外常规培养A431细胞,通过克隆形成、流式细胞术及免疫荧光染色法检测β-Lapachone对细胞增殖、周期进程以及活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成的作用,并通过Western blot检测相关分子和信号通路。结果免疫组化:NQO1蛋白在CSCC中的阳性率(85.5%,65/76)高于正常皮肤组织(46.2%,6/13,P<0.05)。χ^(2)检验:NQO1蛋白表达与肿瘤大小有关(P<0.05),与患者年龄、性别、分化和临床分期均无相关性。MTT和克隆形成实验:β-Lapachone可抑制A431细胞的增殖能力。流式细胞术检测:β-Lapachone诱导A431细胞发生周期阻滞。β-Lapachone可促进细胞生成ROS,激活JNK信号通路。结论NQO1在CSCC中高表达,其生物激活剂β-Lapachone可通过调控多种生物学功能,进而抑制CSCC的恶性演进。