LncRNA的结构、功能及其与疾病的关系

70％的人类基因组能够被转录，而其中仅有1％～2％的转录本能够编码蛋白，余下98％均为非编码RNA（non-codingRNA，ncRNA）．在ncRNA中，长度大于200核苷酸称为长链非编码RNA（long non-codingRNA，LncRNA），占全部ncRNA的80％-90％．LncRNA除了数量庞大以外，还具有表达量较低、物种间保守性较差及细胞表达特异性等特点，使LncRNA结构及作用机制等研究充满挑战．目前关于LncRNA的研究主要集中于功能方面．LncRNA能够广泛参与生物体的各种生理及病理过程，如表观遗传学调控、癌症、神经系统功能等．LncRNA作用机制众多，能够以分子诱饵、分子向导、分子支架及信号通路的调节剂等多种角色参与调节机体各种生物学过程．解析LncRNA的分子结构、深入研究其在生物体生理及病理过程中所发挥的作用，并揭示其作用机制，不仅能够加深对生物体生理及病理过程的认识，同时也能给某些疾病的诊断、防治提供新的思路及解决途径．本文综述了近年来有关LncRNA结构、功能及作用机制相关研究进展，以期为后续LncRNA相关研究提供参考．

尾吊对大鼠海马组织学习记忆及凋亡相关蛋白表达的影响

目的研究尾吊模拟失重效应对大鼠海马神经元形态数目和学习记忆相关分子NMDAR2A,BDNF及促凋亡相关分子Bax,Caspase-3表达的影响,探讨模拟失重所致大鼠学习记忆能力下降的机制。方法24只8周龄SD大鼠随机分为对照组及模拟失重组,每组12只,采用30°尾吊方法模拟失重效应。采用HE及尼氏染色观察模拟失重效应对海马神经元数目形态的影响;采用Western blot检测模拟微重力效应对NMDAR2A,BDNF,Bax,Caspase-3蛋白表达的影响。结果 HE染色及尼氏染色结果发现,尾吊大鼠海马组织神经元数目显著低于对照组,同时其形态也发生了一定的改变。Western blot实验结果显示,与对照组相比,尾吊大鼠海马组织NMDAR2A、BDNF蛋白表达水平显著降低,Bax,Caspase-3蛋白表达水平显著提高。结论尾吊模拟失重效应可影响大鼠海马神经元形态与数目,下调学习记忆相关分子表达,上调促凋亡相关分子表达。

黄芪甲苷联用维生素D_3对二维回转培养大鼠原代成骨细胞增殖的影响

探讨了黄芪提取物黄芪甲苷与维生素D3联用对二维回转培养大鼠原代成骨细胞增殖的影响。离体培养大鼠原代成骨细胞后,用碱性磷酸酶染色、茜素红染色等方法对细胞进行鉴定;通过细胞回转器模拟微重力效应,采用MTT、细胞计数等方法研究不同浓度配比的黄芪甲苷与维生素D3混合液对大鼠原代成骨细胞增殖的影响。结果表明,单用黄芪甲苷或维生素D3均对正常培养成骨细胞增殖具有促进作用,最佳促增殖浓度分别为1×10-7 mol·L-1和1×10-8 mol·L-1,当1×10-7 mol·L-1黄芪甲苷分别配以1×10-9 mol·L-1或1×10-8 mol·L-1维生素D3时,其相对增殖率可达200%和196%;不同浓度配比的黄芪甲苷与维生素D3混合液对模拟微重力下二维回转培养成骨细胞的增殖有显著促进作用,其最佳促增殖浓度为1×10-7 mol·L-1黄芪甲苷配以1×10-9 mol·L-1维生素D3。

染料木素促成骨样细胞增殖作用及其机制研究

目的观察染料木素(genistein)对成骨样细胞MC3T3-E1细胞增殖及骨形成蛋白-2(BMP-2)、β-连环素(β-catenin)表达的影响。方法培养成骨样细胞MC3T3-E1,加入不同浓度的染料木素(1×10-10、1×10-9、1×10-8、1×10-7、1×10-6和1×10-5mol·L-1),以1×10-9mol·L-1雌激素(β-estradiol,E2)作为阳性对照组,采用MTT比色试验法和碱性磷酸酶(ALP)活性检测法,观察染料木素作用后MC3T3-E1的增殖及分化情况,以Westernblot方法检测成骨样细胞中BMP-2和β-catenin蛋白的表达。结果染料木素可促进MC3T3-E1细胞增殖,染料木素作用后细胞的ALP值也明显升高,呈浓度依赖性;染料木素可增加BMP-2和β-catenin表达,且呈浓度依赖性。结论染料木素促进MC3T3-E1细胞增殖与分化,可通过调节BMP-2和Wnt/β-catenin信号通路而影响成骨样细胞的活性。

氯化锂对去卵巢大鼠骨密度的影响研究

目的观察GSK3特异性抑制剂氯化锂(LiCl)对去卵巢(OVX)大鼠骨密度的影响并探讨其作用机制。方法24只雌性SD大鼠,随机均分为3组:假手术(Sham)组、OVX组和LiCl组。Sham组仅切除一段肠系膜,OVX组和LiCl组行双侧卵巢摘除,LiCl组给予LiCl溶液140mg/(kg.d)灌胃,Sham组与OVX组均用生理盐水(1ml/d)灌胃,持续10周。每周称量大鼠体重,10周后观测各组大鼠骨密度、子宫重量及子宫内膜的改变;采用免疫组化和Westernblotting观察骨组织形态学改变和β-catenin蛋白的表达。结果10周后,与OVX组比较,LiCl组大鼠体重增幅小而骨密度有所增加,子宫内膜未出现萎缩性改变,骨小梁形态结构基本完整,骨小梁形态结构破坏少。与Sham组比较,OVX组成骨细胞β-catenin蛋白表达降低,而LiCl组表达明显升高。结论LiCl可使OVX大鼠的骨密度增加,可抑制由雌激素缺乏引起的子宫萎缩,从而有效预防雌激素缺乏导致的骨质疏松。

尾吊复合隔离导致的大鼠抑郁样行为研究

目的研究2周的尾吊复合隔离环境所导致的大鼠抑郁样行为。方法 24只雄性SD大鼠随机平均分为3组:对照(Con)、尾吊(tail suspension,TS)、尾吊复合隔离(tail suspension combined with isolation,TS+I)。造模前后检测摄食量和体重变化,造模结束后依次进行空场、新奇事物探索、强迫游泳实验。结果 TS和TS+I组大鼠体重和摄食量低于对照组,且TS+I组最低。TS和TS+I组大鼠的主动性活动显著少于对照组,且TS+I组大鼠最少。TS和TS+I组大鼠探索潜伏期变长,且探究行为减少,其中TS+I组大鼠表现最差。TS和TS+I组大鼠的攀爬次数少于对照组,TS+I组大鼠不动时间最长。结论 2周的尾吊复合隔离环境导致的抑郁样行为比单一尾吊更为严重,此模型可用于航天抑郁发病机制研究及对抗药物开发。

木犀草素对东莨菪碱所致大鼠学习记忆障碍的改善作用

研究了木犀草素对东莨菪碱所致大鼠学习记忆障碍的改善作用。将SD大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、多奈哌齐组和不同剂量(30mg·kg^(-1)、60mg·kg^(-1)、120mg·kg^(-1))木犀草素组,腹腔注射东莨菪碱建立大鼠学习记忆障碍模型,采用Morris水迷宫实验和避暗实验测试大鼠学习记忆能力,同时测定大鼠海马组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、乙酰胆碱酯酶(AchE)活性及丙二醛(MDA)含量。结果表明:与模型组比较,木犀草素(120mg·kg^(-1))处理可显著缩短大鼠在Morris水迷宫实验中的逃避潜伏期(P<0.05或P<0.01),增加大鼠穿台次数、目的象限时间比和游程比(P<0.05),延长避暗实验中大鼠的入暗潜伏期(P<0.01);同时木犀草素(120mg·kg^(-1))处理可提高大鼠海马组织SOD活性(P<0.01),降低AchE活性(P<0.05)及MDA含量。木犀草素可通过抑制海马区氧化损伤和增强胆碱能功能改善东莨菪碱所致大鼠学习记忆障碍。

5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗增殖性红斑一例

临床资料 患者，男，45岁。主因龟头红斑、肿块、溃疡、结痂伴轻微疼痛感4年余，于2014年5月就诊。患者4年前龟头出现直径约1 cm的红斑，渐出现糜烂、结痂，伴轻微疼痛。曾于外院诊治，具体诊疗经过不详，病情未见好转。皮损渐扩大，且局部隆起形成肿块，2个月前皮损中央出现溃疡、结痂。患者既往体健，否认有特殊疾病史及冶游史，家族成员无类似疾病史，无包皮过长史。体格检查：系统体检未见明显异常。皮肤科情况：龟头见直径约2.5 cm的红色斑块，中央溃疡，其上见棕黄色结痂及少许渗液（图1），中等程度压痛，双侧腹股沟淋巴结未触及增大。实验室检查：血、尿、粪、肝功能及肾功能正常，梅毒血清学试验及艾滋病病毒抗体均阴性。皮损组织病理示：表皮角化过度伴角化不全，棘层增厚，皮突不规则延长，表皮局部细胞排列紊乱，有大小、形态异形，部分胞质淡染，较多核分裂相；真皮浅层血管增生、扩张、充血，大量淋巴细胞浸润（图2a-2b）。诊断：增殖性红斑。治疗：5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗；光动力治疗结束后口服胸腺肽肠溶片（30 mg/d）维持治疗。5-氨基酮戊酸（上海复旦张江生物医药股份有限公司）治疗前用灭菌生理盐水配制成20%浓度。He-Ne激光器（武汉凌云光电科技有限责任公司）波长为635 nm，输出功率为100 mW。治疗前清除患者皮损表面鳞屑或痂皮，纱布浸取适量配制好的5-氨基酮戊酸溶液湿敷于皮损及其周围1 cm处，外用塑料薄膜封包及厚纱布避光4 h。4 h后He-Ne激光照射20 min，能量密度约100 J/cm2。每周治疗1次，共进行5次。患者在激光照射过程中出现疼痛感，可耐受，无其他不适感。经5次治疗后，患者皮损基本消退（图3a-3e）。目前光动力治疗结束后2个月，患者皮损已完全消退，仍在随访中。

小鼠节律基因clock,bmal1 3'UTR重组质粒构建与应用

为探讨miRNA与节律基因的相互作用,首先通过NCBI查找小鼠节律基因clock,bmal1 3'UTR序列,PCR扩增节律基因clock,bmal1 3'UTR全长后将目的片段定向克隆到PGL3-promoter质粒上并测序验证,构建节律基因clock,bmal1 3'UTR重组质粒。然后通过Target Scan软件预测可能与clock,bmal1 3'UTR相互作用的miRNAs,利用脂质体将miRNA模拟物与重组质粒共转293T细胞进行荧光活性检测,初步分析可能调控clock,bmal1表达的miRNAs。结果显示,采用RVP4引物进行的重组质粒反向测序结果与NCBI上查找的序列反向互补,成功构建小鼠节律基因clock,bmal1 3'UTR重组质粒,为进一步研究节律基因转录后调控机制奠定基础。miR-199a-5p(P<0.05)与miR-142-3p(P<0.01)下调重组质粒活性约33%和45%,初步证实miR-199a-5p能够与clock 3'UTR,miR-142-3p能够与bmal1 3'UTR作用调控基因转录活性。

Ba_(1.03)Ce_(0.9-x)Zr_xTm_(0.1)O_(3-α)固体电解质的化学稳定性和电性能(英文)

用高温固相反应法制备了非化学计量组成的Ba1.03Ce0.9-xZrxTm0.1O3-a固体电解质。分别用粉末X-射线衍射（XRD）和扫描电镜（SEM）方法表征了这两种材料的相组成和断面形貌，测定了它们在900℃下，CO2以及水蒸气气氛中的化学稳定性。在500～900℃温度范围内．分别用气体浓差电池方法和交流阻抗谱技术研究了材料在不同气体气氛中的离子导电性,研究了以这两种材料为固体电解质的氢一空气燃料电池性能。结果表明，Ba1.03Ce0.7Zr0.2Tm0.1O3-a材料为单一钙钛矿型斜方晶结构，Ba1.03Ce0.5Zr0.4Tm0.1O3-a。材料为单一钙钛矿型立方晶结构。2种材料均具有较高的致密性和化学稳定性。在500—900℃温度范围内、湿润氢气中，Ba1.03Ce0.7Zr0.2Tm0.1O3-a材料表现为纯的离子导电性，而Ba1.03Ce0.5Zr0.4Tm0.1O3-a材料表现为离子和电子的混合导电性；在湿润空气中，两种材料均表现为质子、氧离子和电子空穴的混合导电性；在氢-空气燃料电池条件下，均表现为质子、氧离子和电子的混合导电性。以这两种材料为固体电解质的氢-空气燃料电池均能稳定地工作。在相同实验条件下，Ba1.03Ce0.7Zr0.2Tm.01O3-a。材料的离子导电性及其氢一空气燃料电池性能均高于Ba1.03Ce0.5Zr0.4Tm0.1O3-a材料。

per1,per2 3′UTR双荧光素酶报告基因重组质粒的构建

构建了包含目的片段小鼠节律基因per1,per2 3′UTR全长的重组质粒,为初步分析转录后可能调控per1,per2基因的miRNAs提供了有效手段。用反转录试剂盒将从小鼠肝脏组织提取的RNA反转录得到cDNA,以获得的cDNA为模板PCR扩增per1,per2 3′UTR全长,经回收纯化、酶切后将目的片段定向克隆到PGL3-promoter质粒上,再经转化扩增挑取克隆进行菌落PCR,对获得的阳性克隆进行酶切鉴定并测序。PCR产物鉴定结果表明,目的片段per1,per2 3′UTR序列扩增成功;菌落PCR及单酶切鉴定结果表明,per1,per2 3′UTR已插入PGL3-promoter载体中;测序结果表明,per1,per2 3′UTR插入序列,插入方向正确。per1,per2 3′UTR双荧光素酶报告基因重组质粒的成功构建为进一步研究节律基因转录后的调控机制奠定了基础。

近代西北城镇的发展及制约因素

清政府"新政"时期和抗战时期,近代西北城镇得到了较快的发展。尤其是抗战时期,西北城镇逐渐多样化,出现了多种类型的城镇。但因帝国主义的侵略、农村经济发展的滞后、国内政治变迁以及战争、灾荒频繁等诸多因素的制约,使近代西北城镇的发展一直处于比较滞后的局面。

浅论西汉河西四郡设立的重要性

两汉盛世,由于汉王朝和其他国家及地区发生了联系和对外贸易,大力发展全国交通,并开拓了中西道路交通,即丝绸之路。丝绸之路是中国最早与西方之间的政治交往、商品贸易和文化交流的陆路通道。这条通道在《汉书.西域传》中称"自玉门、阳关出西域,有两道,"[1]就是汉通西域道。甘肃便成了通往中亚南北两条商路的必经之地。丝绸之路穿过今甘肃东西全境,长约两千多公里,尤其是河西走廊成为了丝绸之路的重要孔道,河西走廊的敦煌是中西交通的总枢纽,汉武帝为巩固西北边防,确保丝路东段河西道路畅通,从而设置河西四郡。

氯化锂对尾吊大鼠骨丢失的防护作用

目的研究GSK3特异性抑制剂氯化锂(lithium chloride,LiCl)对尾吊大鼠骨密度的影响。方法 SD雄性大鼠18只,分为3组:正常对照组(Control)、尾吊对照组、尾吊LiCl组,每组6只。尾吊LiCl组大鼠每日灌胃给予LiCl20mg/(kg.d)。分别于第1天和第15天使用双能X线骨密度测量仪测定大鼠左股骨骨密度(bone mineral density,BMD);第15天处死大鼠取左胫骨近心端进行组织包埋切片,HE染色,进行骨组织计量学测量,包括骨小梁面积百分率(Tb.Ar%)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁平均厚度(Tb.Th);对大鼠右股骨进行三点弯曲实验,测量骨力学指标。采用Western blot观察骨组织中β-catenin蛋白的表达。结果实验结束后,尾吊对照组和尾吊LiCl组大鼠BMD均低于正常对照组(P<0.05),而尾吊对照组大鼠BMD明显低于尾吊LiCl组(P<0.01);骨组织计量学结果 ,尾吊对照组大鼠骨小梁平均厚度低于正常对照组(P<0.05),骨小梁面积百分率、骨小梁数量明显低于正常对照组(P<0.01),而尾吊LiCl组大鼠三项参数均高于尾吊对照组(P<0.05);骨力学测试结果 ,尾吊对照组大鼠股骨弹性模量低于正常对照组(P<0.05),刚性系数明显低于正常对照组(P<0.01),而尾吊LiCl组大鼠股骨弹性模量高于尾吊对照组(P<0.05),刚性系数明显高于尾吊对照组(P<0.01)。Western blot结果显示,尾吊对照组β-catenin蛋白表达量明显低于正常对照组,而尾吊LiCl组β-catenin蛋白表达量明显高于尾吊对照组。结论尾部悬吊能够造成大鼠废用性骨丢失,而LiCl能有效地预防尾吊所导致的骨质疏松。

无创尾吊大鼠心血管功能监测新方法

目的:运用植入式遥测系统建立一种在体的实时监测无创尾部悬吊大鼠心血管生理参数模型.方法:将SD雄性大鼠随机分为对照组,尾吊组,每组5只.手术植入遥测子后记录尾吊前后各组大鼠血压(BP)、心率(HR)、心电图(ECG)变化.结果:所有大鼠在手术14d后完全恢复,体质量显著增加;尾吊组大鼠在尾吊0～5min时BP,HR值逐渐上升,随后逐渐下降,5.5h后维持稳定.其中BP值高于尾吊前及对照组,HR未出现类似状况.RR间期在尾吊0～5min下降,之后逐渐升高至尾吊前水平,对照组大鼠各项参数值无显著变化.结论:植入式遥测系统适用于监测尾吊大鼠心血管生理参数变化,为进一步研究失重引起的心血管功能变化提供了可靠的技术方法和实验依据.

Hailey-Hailey病四个家系的ATP2C1基因突变分析

目的检测Hailey-Hailey病(HHD)4个家系的致病基因ATP2C1,鉴定其突变位点和突变类型。方法采集4个HHD家系成员共9例患者和6名正常人,与100名无关健康对照者外周静脉血各2 ml,提取全基因组DNA。运用聚合酶链反应(PCR)扩增ATP2C1基因的全部28个外显子及其侧翼内含子序列,扩增产物纯化后进行DNA直接测序,BLAST比对分析其突变位点和突变方式。结果在9例HHD患者中共检出了3个ATP2C1基因致病突变:c.888_889ins T(p.296Tfs X2)、c.1330del C(p.443Qfs X33)和c.2416C>T(p.Arg806X)。在4个HHD家系的6名正常者和100名健康对照者中均未发现上述突变。结论在9个HHD家系患者中存在2个移码突变(c.888_889ins T和c.1330del C)及1个无义突变(c.2416C>T),其中2个移码突变为首次报道。这些突变的发现有助于HHD的诊断,并丰富了HHD相关ATP2C1突变数据库。

398例白癜风首诊患者心理状态的现况分析

目的了解首次确诊的白癜风患者心理状态,正确理解精神因素在白癜风发病中的可能作用。方法采用自制白癜风信息调查问卷收集研究对象的相关信息,根据患者年龄差异而分别选用不同的最适心理测评问卷进行调查。结果参与调查患者496例,实际完成调查者398例,其中存在不同程度的行为-心理障碍者共210例,阳性率为52.8%;其中≤6岁组26例患儿中有24例存在不同程度的异常,阳性率为92.3%;6~14岁组99例患者中存在不同程度的异常者42例,占42.4%;在14~18岁组52例患者中不同程度的心理障碍者33例,占63.5%;在>18岁组221例患者中存在不同程度的心理障碍者111例,占50.2%;不同分型白癜风患者间存在心理障碍的分布差异有统计学意义(P<0.05);节段型白癜风患者与其他分型患者间出现心理障碍的分布差异有统计学意义(P<0.05)。结论不同年龄段的白癜风患者存在不同程度的心理障碍;节段型白癜风患者较其他分型患者更易出现心理障碍,且本研究≤6岁白癜风患儿中常见行为-心理障碍,二者强烈佐证了神经精神因素在白癜风发病中具有重要作用,提示在临床工作中应根据其不同特点而予以适当的心理辅导,将有利于疾病的康复。

五个品种北美海棠的生长量与光合特性的比较

为了探究北美海棠生长量与光合特性之间的关系,为引种和培育不同需光特性的新品种提供理论依据,以天津远大苗圃的“冬红”、“舞美”、“绚丽”、“印第安魔力”、“王族”五个生长速度不同的北美海棠品种为试材,测量了植株4项生长指标与五种海棠的光合特性,5个品种海棠胸径、地径、冠幅、新梢四个生长量指标与净光合速率、气孔导度、蒸腾速率、胞间CO2浓度和光合有效辐射。利用隶属函数综合分析得出北美海棠的综合特性顺序为:绚丽 】印第安魔力 】冬红 】王族 】舞美。

银离子消毒剂的应用研究

银离子消毒剂是一种无色无味,无毒、无刺激,无污染的消毒产品。有研究发现,一定浓度的银离子对细菌、真菌、病毒等均有杀灭作用[1]。人们逐渐意识到微生物的危害,消毒液、杀菌剂成为生活的必需品,能起杀菌作用的不仅仅是一些非金属类的消毒产品,如酒精、84消毒液、过氧化氢等,有些金属也具有杀菌抗菌的作用。本文从银离子消毒机制、杀灭作用、消毒效果及影响因素及在生活中的运用展开概述,最后对银离子的前景进行分析和展望。

气相色谱法测定化妆品中1,2-己二醇的含量

本文建立了测定化妆品中1,2-己二醇含量的气相色谱法,采用气相色谱分离,氢火焰离子化检测器检测,根据保留时间定性,峰面积定量,以标准曲线法计算含量。1,2-己二醇在100~4000 mg/L与峰面积呈现良好的线性关系,相关系数R2=0.999。取样量为1 g时,方法检出限为100 mg/L,该方法对化妆品中1,2-己二醇测定的加标回收率为100.2%,重复性相对标准偏差为0.5%,结果表明该检测方法适用于化妆品中1,2-己二醇含量的测定。