组织工程学中“种子细胞”线上线下教学的设计

随着互联网、信息技术、人工智能快速发展,线上线下混合式教学已日益成为教学研究和实践的常态化教学模式。然而,这种教学模式需要运用不同的学习平台,采用不同的技术手段,对教师的教学资源整合、建设和教学设计及教学管理提出了更高的要求。其中,教学设计是线上线下混合式教学是否成功的关键要素[1]。种子细胞是应用组织工程的方法再造组织和器官所用的各类细胞统称,是组织工程学3大要素之一[2]。

RNA干扰技术在动物寄生线虫研究中的局限性

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种应用广泛的基因功能研究技术,不仅应用于模式生物秀丽隐杆线虫中,而且已成为鉴定基因功能高通量的筛选方法。但是,最近的研究发现,RNAi在动物寄生性线虫的应用上还存在一些问题,如:RNAi在不同线虫体内效果差异较大,同一种线虫不同发育时期的效果差异也较大。产生这些问题的原因可能有:①RNAi传送途径的效率在不同的寄生性线虫中是不同的;②RNAi机制只存在于相关的线虫中,大多寄生性线虫都存在着基因功能缺陷;③RNAi可能受线虫不同生活方式的影响。本文就RNA干扰技术在动物寄生性线虫研究中的局限性作一综述。

三种吸虫感染与胆管癌发病关系的研究进展

由华支睾吸虫(Clonorchis sinensis)、麝猫后睾吸虫(Opisthorchis viverrini)和猫后睾吸虫(Opisthorchis fe-lineus)所引起的吸虫病是严重危害人类健康的食源性寄生虫病,在亚洲地区流行较为广泛,人们通过食含有囊蚴的生鱼或虾类而感染。长期且重度感染会造成肝脏机能障碍,如胆结石和胆囊炎等。近年来,越来越多的研究表明这三种吸虫与胆管癌之间存在着病因学联系。本文对他们之间的关系及胆管癌可能的发病机制进行综述。

旋毛虫肠道1期幼虫抗原性基因的筛选与分析

筛选旋毛虫肠道1期幼虫抗原性基因。利用λZAP载体构建旋毛虫肠道1期幼虫cDNA文库。用感染旋毛虫26 d猪血清对其进行免疫学筛选,对筛选出的阳性克隆进行测序与分析;应用RT-PCR方法对编码p46 000蛋白强阳性克隆基因在不同发育时期虫体转录情况进行检测。成功构建了旋毛虫肠道1期幼虫cDNA文库,其库容量为1.5×106pfu,重组率为95%,插入片段在400 bp^2 000 bp之间,扩增后文库滴度为1.5×1012pfu/mL。筛选出阳性克隆33个,序列分析表明,有20个克隆为同一已知基因,称为旋毛虫p46 000蛋白,编码旋毛虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂,且在筛选过程中反应信号均较强;还发现了一些旋毛虫新基因,如编码Ubc蛋白,GM13181蛋白,Rieske硫铁蛋白1等。本研究获得了一个高丰度、反应原性较强抗原基因,其编码蛋白为半胱氨酸蛋白酶抑制剂。

华支睾吸虫成虫cDNA表达文库的构建与筛选

为了获得华支睾吸虫成虫期强反应原性抗原基因，首先利用λZAP载体构建华支睾吸虫成虫cDNA表达文库：即从我国东北疫区（镇赉县）家犬胆管内分离收集华支睾吸虫成虫，采用Trizol Reagent提取其总RNA，Oligo（dT）纤维素柱纯化mRNA，反转录合成第1链eDNA及第2链cDNA，用CHROMASPIN-400柱离心层析纯化后，与载体xZAPExpress连接，体外包装后成功获得我国东北疫区华支睾吸虫成虫cDNA表达文库。文库容量为1．5×10^6pfu，重组率为99％，插入片段长度在0．4～2．0kb之间，扩增文库的滴度为1．5×10^10 pfu／mL。然后利用免疫学方法对该cDNA表达文库进行筛选：以自然感染华支睾吸虫的人血清为抗体探针，从2．0×10^5个重组噬菌体筛选强反应原性抗原基因，对筛选出的强反应原性克隆进行测序，利用相关分子生物学软件进行序列分析。共获得41个阳性克隆，测序结果分析表明，这些cDNAs根据其编码的蛋白可分为以下几种，即与来自华支睾吸虫的甘氨酸-2、脯氨酸-2及Cs44抗原高同源的基因及分别与来自Nematostella vectensis的未知蛋白、转录延伸因子及果蝇CG3446基因编码蛋白较低同源性的基因。本研究结果为进一步对华支睾吸虫抗原的生物学特性研究及应用奠定了理论基础和实验依据。

基于校城共融的应用型本科人才培养模式改革探索

以西安文理学院生物与环境工程学院的应用型本科人才培养模式改革为背景,立足学校“坚持地方性、应用型、开放式,建设特色鲜明的高水平城市大学”的办学定位,围绕应用型人才培养目标,以生物科学专业为例,基于校城共融理念,围绕产业链优化专业链,服务地方生物医药产业;重构教学内容的三维度,打通一、二、三课堂,进行课内与课外、线上与线下、校内与校外联动协同培养;加快专业教育和“双创”教育的深度融合,探索实训平台+大创项目+学科竞赛+科研创新“四位一体”教学模式;通过行业导师制协同育人,全面提升应用型人才培养质量。

鼠脱氧核糖核酸酶(DNase Ⅱα)基因的克隆及原核表达

根据鼠脱氧核糖核酸酶Ⅱ(DNaseⅡ)基因设计引物,通过RT-PCR扩增出鼠DNaseⅡα基因片段,克隆到pMD-18T载体,然后转化至大肠杆菌JM109。经鉴定及序列测定,克隆基因与鼠DNaseⅡα基因序列完全一致,大小为1 008 bp。将重组质粒pMD-DNaseⅡα进行酶切后连接到原核表达载体pET-28a中,重组质粒经PCR和双酶切鉴定及序列分析正确后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE检测,然后进行初步纯化,Western-blot鉴定。结果表明,本试验成功构建了pET-28a-DNaseⅡα表达载体;表达产物以包涵体形式存在,相对分子质量约为38 800;初步纯化的目的蛋白在SDS-PAGE图谱上呈单一条带,Western-blot鉴定能与抗体发生特异免疫反应。

伊立替康(Irinotecan)对SCA3细胞模型的影响

伊立替康(Irinotecan,CPT-11)是一种治疗癌症的化疗药物,主要代谢产物为7-乙基-10羟基喜树碱(7-Ethyl-10-hydroxycamptothecin,SN38).课题组实验筛选结果表明伊立替康对ataxin-3核质转运有潜在影响.通过免疫荧光、微孔过滤分析以及PretoBlue细胞活性检测等方法,探讨伊立替康对ataxin-3质核分离、突变ataxin-3形成的聚集体以及spinocerebellar ataxia type 3(SCA3)细胞活性的影响.结果表明伊立替康在10μM处理浓度时能够减少ataxin-3进入细胞核,但对蛋白聚集体没有影响;伊立替康在0.001μM或100μM处理浓度时,对SCA3细胞具有细胞毒性作用.本研究阐释了伊立替康对SCA3细胞模型的影响,揭示了旧药新靶点,为其他神经退行性疾病的致病机理和治疗药物研发提供新依据.

活性氧在红缘拟层孔菌杀伤白血病细胞中的作用研究

红缘拟层孔菌抗肿瘤作用受到广泛关注,但其弱极性化合物对白血病细胞的增殖抑制及作用机制尚缺乏实验证据。采用MTT法评价红缘拟层孔菌不同极性组分抗肿瘤活性,结果显示氯仿组分(FPKc)可显著抑制U937细胞的增殖;进而结合流式细胞术分析FPKc杀伤白血病细胞的作用机制,发现其能够显著提升胞内活性氧含量,同时伴随细胞质膜电位下降、胞内钙离子浓度上升、线粒体膜电位崩解、细胞凋亡率增加,而活性氧抑制剂则能明显缓解细胞凋亡的发生,提高细胞存活率。因此,FPKc可能调控活性氧的过量生成促进U937细胞的死亡。

自然地理与资源环境专业应用型人才培养探索与实践

依托测绘、地理信息系统产业优势,以就业为导向,探讨自然地理与资源环境专业的建设问题,重点讨论了专业定位、课程体系、教学实践内容及教学方法等重要环节,以期实现以地理为基础、重点掌握遥感地信技术,以资源环境为应用方向的人才培养过程的优化设计。通过自然地理与资源环境应用型专业建设实例分析,希望为应用型专业发展、应用型人才培养起到一定的借鉴作用。

东亚钳蝎高粱酒对小鼠抗体和免疫细胞活性的影响

通过饮用一定时间东亚钳蝎高粱酒,探讨对小鼠免疫功能的影响.对雄性昆明小白鼠连续灌胃蝎子酒(40 g/kg)35天,通过注射绵羊红细胞,进行迟发型变态反应,检测相应免疫指标.结果显示,东亚钳蝎高粱酒组与对照和高粱酒组比较,东亚钳蝎高粱酒组左脚趾的厚度变化较小,血清溶血素水平明显升高,抗体生成数量提高,脏器比重增大,NK细胞活性明显提高,T细胞数量增多.环磷酰胺组能够提高NK细胞活性,但减少T细胞转化率.半浓度东亚钳蝎高粱酒组比单纯环磷酰胺组的免疫功能强大.显示蝎子酒能够有效提高小鼠免疫功能,增强免疫系统对肿瘤细胞的免疫力.

华支睾吸虫吉林分离株的鉴定

为了研究吉林省内华支睾吸虫自然分离株的种类及基因变异情况,将镜检含有疑似华支睾吸虫囊蚴的麦穗鱼,经胃蛋白酶消化后获得该寄生虫囊蚴,用比重沉降法去除杂质,同时利用形态学和PCR方法进行种类鉴定。镜检结果表明分离株具有典型的华支睾吸虫囊蚴特征,并且经过PCR方法扩增出了华支睾吸虫的种特异性基因片段,碱基序列与GenBank注册的华支睾吸虫特异性基因序列(越南分离株)同源性达100%,与文献中提供序列(中国南方分离株)的同源性也为100%。结果表明在吉林省内成功的分离到了华支睾吸虫囊蚴,其特异性基因片段与越南分离株和中国南方分离株相比未发生变异。

生物科学方向必选课中“免疫器官和免疫组织”章节线上线下教学的设计

为了探讨“互联网+”时代如何合理、适当地设计并运用线上教学资源构建新型课堂,使线上线下混合式教学达成既定教学目标,以我校生物科学专业2018级本科生和2020级专升本学生为研究对象,以《免疫学教程》中“免疫器官和免疫组织”章节为例,从课前、课中、课后3个阶段探索线上线下混合式教学模式在教学中的应用。结果发现:线上与线下课堂的有效融合解决了传统课堂教学形式枯燥单一、师生互动缺乏、学生基础免疫学学习积极性较差等问题,提高了基础免疫学教学效率、提升了基础免疫学教学活力、改善了免疫技术学习现状,较好地完成了教学目标和教学任务。

青蒿素及其衍生物的药理学作用研究进展

青蒿素是治疗疟疾的主要药物,其在抗其他寄生虫、抑瘤、抗菌、抗纤维化和神经保护等方面也具有显著的效果。本文就目前国内外青蒿素及其衍生物的临床及实验药理学研究进展进行综述。

生物科学专业助推建设高水平城市大学的研究与实践

地方本科高校生物科学专业面临着人才培养定位不清晰、教学单一、实践乏力、服务地方能力不足、师资结构不合理等问题.地方本科高校生物科学专业欲形成产教融合、校企合作协同育人机制,首先,应理清产教融合模式的建设思路;其次,应构建生物科学专业核心课程群;第三,应强化实践教学体系,增强实践能力;第四,应联合行业企业制定设置实习实训教学计划,建设先进的产教融合一体化实习实训资源平台.通过以上措施,生物科学专业才能助推建设高水平城市大学的快速发展.

生物专业英语课程教学改革实践

根据西安文理学院生物科学专业科学研究班和企业定制班不同的培养目标,通过教学模式、教学内容、教学方法、考核评价方式等方面进行了生物专业英语课程的综合改革,取得了良好的教学效果。

索拉菲尼对突变ataxin-3引起的细胞凋亡的影响

脊髓小脑共济失调Ⅲ型(spinocerebellar ataxia type 3,SCA3)又称马查多-约瑟夫病(Machado-Josephdisease,MJD),是由于编码谷氨酰胺的密码子CAG的异常扩增而引起的1种常染色体显性遗传疾病。索拉菲尼是1种新型多靶向性的治疗肿瘤FDA药物,通过构建SCA3细胞模型,利用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)等技术手段,探索索拉菲尼对SCA3细胞模型中突变蛋白ataxin-3引起的细胞凋亡的影响。结果表明,不同浓度的索拉菲尼药物处理2h后,对SCA3细胞凋亡没有抑制作用,也没有毒性作用,但在浓度为1μM时,有抑制细胞凋亡的趋势;在加药24h后,对细胞凋亡没有抑制作用,而且在浓度为100μM和1000μM时,对SCA3细胞模型具有毒性作用。此研究丰富了旧药新作用,为后续实验也提供了作用浓度和时间的参考依据。

博莱霉素对突变ataxin-3引起的细胞凋亡的影响

脊髓小脑共济失调Ⅲ型(SCA3)是一种常染色体显性遗传的神经退行性疾病,目前尚无有效的治疗药物,只能通过某些药物缓解症状。硫酸博莱霉素也称博莱霉素(Bleomycin),用于治疗肿瘤,其作用机制涉及自噬,氧化应激等途径,而这2个通路在SCA3致病过程起重要作用。该研究采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)探索博莱霉素对突变ataxin-3引起的细胞凋亡的影响。实验结果表明,在药物处理2h后,博莱霉素对SCA3细胞没有毒性作用,也没有抑制细胞凋亡的作用;在药物处理24h后,在1000μM浓度时,博莱霉素对SCA3细胞有显著毒性作用。该研究不仅丰富了旧药新发现,也为神经退行性疾病治疗提供了参考依据。

蒿甲醚对食管癌细胞株ECA-109细胞增殖的影响

食管癌是一种常见的消化道肿瘤,主要以手术和化疗为主,但复发率高.研究发现,青蒿素的衍生物蒿甲醚(artemether)能够抑制癌细胞增殖.本研究以食管癌细胞株ECA-109为研究对象,以二甲基亚砜(DMSO)为对照组,通过CCK-8方法检测蒿甲醚在不同作用浓度(0.1μM、1μM、10μM、100μM)以及不同时间梯度(2 h、4 h、6 h、24 h)对ECA-109细胞增殖的作用,使用酶标仪检测细胞OD值,通过GraphPad Prism软件进行数据分析.实验结果表明,蒿甲醚在100μM浓度时处理食管癌细胞株ECA-1092 h以及4 h后对癌细胞增殖有显著抑制作用(P<0.05);且药物处理4h后对癌细胞增殖抑制作用效果最好.本研究通过探索蒿甲醚对食管癌细胞株ECA-109增殖的抑制作用,为该疾病在临床上的治疗提供理论依据.

青春期社会奖赏行为性别差异的催产素和多巴胺调控机制

社交互动的奖励特性对于社会行为的表达和适应性社会关系的发展至关重要。当个体受到应激时会导致奖赏系统异常而缺乏社会交往,出现情绪障碍并具有性二态。青春期发育中社会奖赏行为存在显著的性别差异,男性对社会奖赏敏感性大于女性;相反,女性对社会惩罚的敏感性高于男性。在青春期发育过程中,催产素/加压素(OT/AVP)、多巴胺(DA)系统在奖赏环路的性别差异及OT/AVP受体基因表达的多态性,是奖赏行为及情绪障碍性二态的原因,揭示OT-社会奖赏-情绪障碍性二态三者交互作用的神经机制,对开展精神疾病治疗有重要指导意义。