黑曲霉内切菊粉酶基因在毕赤酵母中的表达及应用研究

利用PCR方法从黑曲霉(Aspergillus niger)基因组DNA中扩增内切菊粉酶(endo I)全长基因(1551 bp),经序列分析后将其连接到表达载体p PIC9K上,得到重组表达载体p PIC9K-endo I。重组质粒经Sac I线性化并电转化到毕赤酵母GS115,阳性转化子进行发酵产酶后考察其酶学性质。酶学性质研究表明,重组酶的最适p H和最适温度分别为5和60℃,重组酶在55℃下保温9 h后,重组菊粉内切酶仍残余83.2%的活性,表现出极高的热稳定性,Cu^(2+)、Ag^+对重组酶有明显的抑制作用。对内切菊粉酶水解菊粉的过程研究表明,重组内切菊粉酶能在8 h内将4%(w/v)菊粉水解为3~6个聚合度的低聚果糖,水解11 h后,低聚果糖得率达到63.5%,本研究为进一步开发以菊粉为原料生产低聚果糖的应用奠定了基础。

蔗糖异构酶突变菌株的构建及其应用研究

蔗糖异构酶是糖苷水解酶13家族的重要成员,可以异构化蔗糖生成异麦芽酮糖和海藻酮糖,同时水解生成少量的葡萄糖和果糖。通过定点突变法对土壤发散菌来源的蔗糖异构酶基因进行定点突变,在大肠杆菌中实现异源表达,获得3例突变菌株R-M1(Q299E),R-M2(Q299D),R-M3(Q299N)。R-M1转化蔗糖的产物当中,异麦芽酮糖的比例从90.28%升至93.16%,海藻酮糖比例从3.09%降低到1.79%。对突变菌株R-M1游离细胞转化蔗糖底物的条件进行了优化,确定了最适转化条件为:30℃条件下,投入浓度为8×109cfu/m L的细胞到蔗糖浓度为50%的10 m L的磷酸柠檬酸缓冲液中,反应90 min,可实现蔗糖最大程度的转化,麦芽酮糖产物浓度达到460 mg/m L。

阿托伐他汀联合银杏二萜内酯葡胺注射液对急性脑梗死患者神经功能的影响

目的:评价阿托伐他汀联合银杏二萜内酯葡胺注射液对急性脑梗死患者神经功能的影响。方法:选取2020年11月-2021年11月我院收治的88例急性脑梗死患者,随机分为联合组和单一组,各44例。单一组采用阿托伐他汀,联合组在单一组基础上加用银杏二萜内酯葡胺注射液。对比两组疗效及治疗前后纤维蛋白原(FIB)、C反应蛋白(CRP)、低密度脂蛋白(LDL)、神经功能缺损(NIHSS)评分。结果:联合组总有效率97.73%(43/44)高于单一组的75.00%(33/44)(P<0.05);治疗后,联合组FIB、CRP、LDL水平和NIHSS评分低于单一组(P<0.05)。结论:急性脑梗死采用阿托伐他汀、银杏二萜内酯葡胺联合治疗临床效果显著,可促进神经功能恢复。