大豆过氧化物酶基因在毕赤酵母中的表达

大豆过氧化物酶(Soybean peroxidase,SBP)是一类主要催化过氧化氢的氧化还原酶,具有耐热性高和pH适用范围宽等优点。利用已构建好的重组表达载体pPICZα-A-sbp,通过氯化锂化学转化法将重组质粒转化进入毕赤酵母GS115中,并在甲醇诱导下进行表达。利用SDS-PAGE法和愈创木酚法测定了重组菌株的SBP表达活性。结果显示,重组毕赤酵母表达了分子量约为40 KD的SBP蛋白,同时发酵24 h后SBP表达活性开始迅速增高,发酵72 h SBP表达活性达到最大,并筛选出表达活性高的菌株。

干细胞niche与肿瘤的发生和转移

干细胞niche是干细胞生存的微环境,通过与干细胞之间的直接和/或间接作用影响干细胞的命运,在维持干细胞自我更新和分化过程中起着极为关键的作用。niche功能异常使得正常干细胞转变成肿瘤干细胞,从而涉及肿瘤的发生发展。在肿瘤转移的过程中niche承担着重要的作用。

干细胞、肿瘤干细胞和肿瘤关系的探究

近年来,恶性肿瘤的发病率已上升到疾病谱的第二位,成为严重威胁人类生命和健康的疾病。其主要特征是肿瘤细胞的恶性生长、转移及复发,病因和发病机制尚不清楚。最近研究认为,肿瘤中存在一小群具有自我更新和分化潜能的细胞即肿瘤干细胞,可能是肿瘤转移和复发的根源。正常干细胞和肿瘤干细胞均具有自我更新和多向分化的潜能,有相类似的标记物,一定条件下可以互相转化。间质干细胞(MSC)作为间质细胞的来源,与肿瘤的关系尤为密切。本文主要就干细胞尤其是间质干细胞,肿瘤干细胞和肿瘤的发生,发展作一综述。

辣根过氧化物酶基因真核表达载体的构建

从辣根侧根中提取总RNA,以OligodT(18)为引物,通过反转录获得了辣根总mRNA的cDNA。以获得的cDNA为模板,利用设计的一对特异寡核苷酸引物P1和P2进行PCR扩增,得到了辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP,EC1.11.1.7)同功酶C2的结构基因(hrpC2)。将hrpC2与真核表达质粒载体pPICZα-A分别用限制性内切酶EcoRI和Xbal双酶切后连接,构建了重组质粒表达载体pPICZα-A-hrpC2。将pPICZα-A-hrpC2转化大肠杆菌筛选阳性克隆并测序。测序结果显示,pPICZα-A-hrpC2重组质粒构建成功。利用BlastN程序进行DNA序列分析,显示该序列为目的ORF框,无移码突变;与Fujiyama.K,Takemura.H等报道的hrpC2序列[D90115.1]有95%的同源性。

基于改进扩散限制凝聚模型的点电极金属二维分形生长模拟

采用VB编程软件对传统扩散限制凝聚模型进行改进,通过改变特定漂移概率下的粒子数和运动步长,模拟点电极金属二维分形生长的过程。采用MATLAB软件对分形图进行分析时发现,分形维数随着粒子数的增多而逐渐增大,随着运动步长的增大而逐渐减小。模拟的分形图与特定条件下铜电沉积物的形貌较为吻合,分形维数相近,说明通过计算机模拟点电极金属二维分形生长是可行的。

正构烷烃加氢异构化催化剂研究进展

介绍了烷烃加氢异构化反应机理,包括分子筛的择形催化和正构烷烃在双功能催化剂上的加氢异构化反应过程。综述了双功能催化剂载体孔道尺寸、晶粒大小、酸强度、酸类型以及金属种类、分散度对烷烃异构化过程的影响。分析表明,选择孔径适宜、具有较高酸含量和酸强度的分子筛可提高异构产物收率,采用适宜方式负载金属得到高分散度且分布均匀的负载金属的分子筛有利于烷烃异构化反应。重点讨论了双功能催化剂金属和酸之间的协同作用——金属中心与酸中心的比例和金属中心与酸中心的距离对烷烃异构化的影响。提出金属中心与酸中心合适的比例和距离是提高双功能催化剂反应活性的关键。

大鼠骨髓间充质干细胞向脂肪细胞分化及分化阻断

目的通过阻断正常干细胞的分化过程，探讨肿瘤发生机制。方法利用贴壁培养法获得大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs），通过地塞米松、胰岛素和吲哚美辛联合诱导大鼠BMSCs，使其分化为脂肪细胞。在细胞分化过程中利用3-甲基胆蒽（3-MC）阻断大鼠BMSCs的分化过程。结果大鼠BMSCs分化实验结果显示，诱导30d后，经油红O染色，细胞内可见脂肪细胞特有的红色脂滴沉淀，且随着诱导时间的延长，油红O阳性细胞比例增加，脂滴增大，表明大鼠BMScs已成功分化为脂肪细胞。大鼠BMSCs分化阻断实验结果显示，诱导30d后，经油红O染色，细胞内红色脂滴沉淀明显下降，表明阻断后的细胞具有脂肪细胞的特性，但分化不完全；形态学鉴定表现为细胞接触抑制消失、细胞核异常、微核畸变率高和核型异常，表明阻断后的干细胞发生恶性转变。结论大鼠BMSCs分化过程受到阻断，细胞停止在分化的中间阶段，有转化为肿瘤细胞的趋势。