基于艾里光片照明的随机光学重构显微系统的研制

基于单分子定位的随机光学重构显微镜(STORM)是观察亚细胞结构的重要工具,但是在实际应用中往往会受到多方面的限制。光片照明显微镜因为具有快速、高对比度、光损伤低等优点,在近些年也得到了快速的发展。但是传统的高斯光片照明因为会快速的发散而使成像的视野受到了限制,而艾里光束作为一种无衍射光束,表现出良好的传播不变性,应用在光片照明显微镜中可以获得更大的视野。研制了一套基于艾里光片照明的随机光学重构显微系统,并在100×100μm视野范围内实现对Thy1-YFP小鼠脑片进行连续光学切面的二维超分辨成像。

连续长波紫外线照射对人皮肤成纤维细胞胞吞、降解弹性蛋白的影响

目的：研究连续长波紫外线（UVA）照射对人皮肤成纤维细胞胞吞和胞内降解细胞外弹性蛋白能力的影响，探讨光老化皮肤弹性蛋白堆积的机制。方法将人皮肤成纤维细胞分为空白对照组和连续 UVA照射组，连续 UVA 照射组予连续7 d 每天9.9 J/cm^2 UVA 照射以构建人皮肤成纤维细胞慢性光损伤模型。用流式细胞仪和衰老相关β半乳糖苷酶染色法分别检测细胞周期和细胞老化程度以验证模型。用荧光示踪技术和共轭淬灭技术，比较两组细胞对培养基中弹性蛋白的胞吞情况和对胞吞进入细胞的弹性蛋白的降解情况差异。结果与空白对照组相比，连续 UVA 照射组 G1期细胞比例和衰老细胞比例明显增高，人皮肤成纤维细胞慢性光损伤模型构建成功。空白对照组人皮肤成纤维细胞在与弹性蛋白共孵育24、48、72 h 后对弹性蛋白的胞吞率依次为（10.0±1.4）%、（27.8±4.2）%、（39.9±4.1）%，连续 UVA 照射组人皮肤成纤维细胞在对应时间点的胞吞率依次为（9.9±1.6）%、（28.3±5.1）%、（42.0±5.7）%，在相同时间点两组细胞对弹性蛋白的胞吞率差异均无统计学意义（均 P 〉0.05）。空白对照组人皮肤成纤维细胞在与弹性蛋白共孵育24、48、72 h 后，胞内降解内吞入胞的弹性蛋白的细胞百分率依次为（7.7±0.9）%、（22.8±1.8）%、（33.9±3.1）%，而连续 UVA 照射组人皮肤成纤维细胞在对应时间点依次为（4.2±1.1）%、（16.5±2.4）%、（26.7±2.6）%，均较对照组显著降低（均 P 〈0.05）。结论连续7 d 每日9.9 J/cm^2 UVA 照射对人皮肤成纤维细胞胞吞弹性蛋白的能力没有明显影响，却使细胞对胞吞的弹性蛋白的胞内降解能力下降。