鹅去氧胆酸调控Nrf2通路缓解热应激小鼠肝脏损伤的研究

为了研究鹅去氧胆酸(CDCA)对热应激小鼠肝脏抗氧化能力的影响,试验选择体重18～22 g C57BL/6清洁级小鼠40只,随机分为4组(空白对照组、热应激组、低剂量组、高剂量组),每组10只。空白对照组、热应激组按照每10 g体重0.1 mL灌胃0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液,低剂量组、高剂量组每千克体重分别灌胃50,100 mg CDCA,每天1次。每天灌胃结束后将热应激组、低剂量组、高剂量组小鼠置于42℃恒温培养箱2 h(12:00—14:00),重复处理7 d,测定肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性与谷胱甘肽(GSH)含量,并以Western-blot方法分析小鼠肝脏中核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶-1(HO-1)与醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白表达情况。结果表明:100 mg/kg CDCA可显著增加热应激小鼠肝脏组织中SOD活性及GSH含量(P<0.05),并且可极显著增加热应激小鼠肝脏中Nrf2、HO-1与NQO1蛋白表达水平(P<0.01)。说明CDCA可缓解热应激小鼠肝脏氧化损伤,具有潜在的临床应用价值。

熊去氧胆酸对热应激小鼠肝损伤的保护作用

目的:研究熊去氧胆酸(Ursodeoxycholic acid,UDCA)缓解热应激肝损伤的作用及其机制。方法:选择55只C57BL/6小鼠,随机分为空白对照组、模型组和UDCA处理组(包括低、中、高剂量组)。空白组与模型组按照0.1 m L/10 g·b·w灌胃0.5%羧甲基纤维素钠溶液,UDCA处理组分别按照20、40、80 mg/kg剂量灌胃UDCA,连续灌胃7 d,每天灌胃结束后在相同时间(12∶00~14∶00)将小鼠置于42℃恒温培养箱2 h,试验期间,小鼠自由采食和饮水。第7 d热应激结束后处死小鼠,分离肝脏,测定肝组织中丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活力和还原性谷胱甘肽(Glutathione,GSH)含量变化以及Nrf2(Nuclear factor erythroid 2-related factor 2)蛋白和Keap1(Kelch-like ECH-associated protein-1)蛋白的表达。结果:(1)40 mg/kg、80 mg/kg UDCA可显著或极显著降低小鼠肝脏MDA含量,同时增加GSH含量和SOD活力;(2)40 mg/kg、80 mg/kg UDCA显著增加Nrf2蛋白的表达,且显著降低Keap1蛋白的表达。结论:UDCA对热应激小鼠肝损伤具有一定保护作用,具有应用前景。

黄芪甲苷缓解对乙酰氨基酚诱导的肝脏氧化应激损伤

目的:研究黄芪甲苷(AS-IV)缓解对乙酰氨基酚(APAP)诱导的肝脏氧化应激损伤及其机理。方法:ICR小鼠40只,随机分为4组:空白对照组、APAP模型组(400 mg/kg)、AS-IV低剂量组、AS-IV高剂量组。空白对照组和模型组灌胃0.2 mL的0.5%羧甲基纤维素钠,低剂量组和高剂量组分别给予20 mg/kg和40 mg/kg的AS-IV,1次/天,连续7天后,除空白对照组外,余下3组灌胃400 mg/kg的APAP,灌胃4 h后处死,采集血液和肝脏,检测血清中谷丙转氨酶(ALT),谷草转氨酶(AST)和肝脏中SOD、GSH、MDA,同时采用免疫组织化学法检测各组样本内Nrf2和NF-κB p65的表达情况。结果:模型组血清中ALT、AST活力明显高于空白对照组(P<0.001);与空白组相比,模型组肝脏中GSH含量和SOD活力值显著降低(P<0.01,P<0.001),并且MDA含量显著升高(P<0.001)。与模型组相比,AS-IV(20 mg/kg,40 mg/kg)处理组血清中的ALT、AST活力明显降低(P<0.001),肝脏中GSH的含量与SOD的活力显著升高(P<0.05,P<0.001),MDA的含量显著降低(P<0.001)。免疫组化结果表明,AS-IV可以增加Nrf2的表达水平、降低NF-κB p65的表达水平。结论:AS-IV能够改善对乙酰氨基酚诱导的急性肝损伤,其保护机制与抗氧化应激有关,具有一定的应用前景。