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奶牛性控冷冻精液品质和转染外源DNA的特点
被引量:
1
1
作者
王岭斌
于明举
+1 位作者
范景胜
赵永聚
《中国畜牧杂志》
CAS
北大核心
2010年第1期20-22,52,共4页
本研究分析了奶牛性控冻精与普通冻精解冻后精液品质和转染外源DNA的特点。奶牛性控冻精与普通冻精解冻后,分别检测精液品质和精子超微结构,并与地高辛标记的线性化pEGFP-N1质粒共育转染,用免疫组化的方法检测精子转染外源DNA的效率。...
本研究分析了奶牛性控冻精与普通冻精解冻后精液品质和转染外源DNA的特点。奶牛性控冻精与普通冻精解冻后,分别检测精液品质和精子超微结构,并与地高辛标记的线性化pEGFP-N1质粒共育转染,用免疫组化的方法检测精子转染外源DNA的效率。结果表明:性控冻精与普通冻精相比,有效精子数少(P<0.01),精子活力、顶体完整率差(P<0.05);2组精子超微结构都出现一定程度的顶体破裂、脱落等形态变化;2组精子都具有自动结合和转运外源DNA的能力,性控冻精转染率极显著高于普通冻精(P<0.01),分别为(11.34%±2.41%)和(7.30%±2.14%)。
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关键词
性控精液
冷冻保存
外源DNA
奶牛
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职称材料
夏季山羊精液不同保存方法研究
被引量:
4
2
作者
罗艳梅
于明举
+5 位作者
赵永聚
王岭斌
赵从
谢畅
穆飙
张家骅
《西南大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第4期17-21,共5页
假阴道法采集重庆市大足黑山羊精液,分析鲜精精液品质,采取随机单位组两因素三水平无重复观察值方差分析试验设计,应用常温保存(20℃)、低温冷藏(4℃)和精液冷冻3种方式进行精液保存效果及对精液品质影响的研究.两因素分别为稀释液和精...
假阴道法采集重庆市大足黑山羊精液,分析鲜精精液品质,采取随机单位组两因素三水平无重复观察值方差分析试验设计,应用常温保存(20℃)、低温冷藏(4℃)和精液冷冻3种方式进行精液保存效果及对精液品质影响的研究.两因素分别为稀释液和精子密度,每个因素选择3个水平,以生存指数作为评价精液保存效果的指标.新鲜精液采集后检测发现品质良好,活力均值为0.87,畸形率为9.45%,符合GB20557-2006做山羊冻精标准.与去年同期比较,发现高温可造成精液品质下降.稀释液对3种保存效果影响差异均不显著(p>0.05),精子密度对常温保存和低温冷藏影响差异极显著(p<0.01),对冷冻影响差异不显著(p>0.05).不同处理均造成精液品质下降,其中冷冻造成影响极显著.常温和冷藏下以稀释液A1、精子密度1×109个/mL保存较好,冷冻保存以稀释液A2、精子密度2×108个/mL较好.
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关键词
精液保存
品质分析
生存指数
夏季
山羊
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职称材料
山羊夏季精液品质分析及冷冻方法优化
被引量:
3
3
作者
于明举
王岭斌
+3 位作者
罗艳梅
陈亮
杨兆明
赵永聚
《中国畜牧杂志》
CAS
北大核心
2009年第17期19-22,共4页
用假阴道法采集山羊精液,进行品质分析,应用正交设计L(934),4因素为稀释液种类(A)、稀释比例(B)、平衡时间(C)和解冻液(D),每因素选择3个水平,分析解冻精液品质,构建其综合指数,优化夏季山羊精液冷冻-解冻方法。结果表明:乏情季节精液...
用假阴道法采集山羊精液,进行品质分析,应用正交设计L(934),4因素为稀释液种类(A)、稀释比例(B)、平衡时间(C)和解冻液(D),每因素选择3个水平,分析解冻精液品质,构建其综合指数,优化夏季山羊精液冷冻-解冻方法。结果表明:乏情季节精液品质略有下降,但仍能满足制作冻精的需要。4因素影响解冻后精液综合指数的显著性顺序是A>C>D>B,其中稀释液种类对解冻后精液综合指数影响差异显著(P<0.05),稀释液Ⅱ优于稀释液Ⅲ和Ⅰ;精子稀释密度影响差异不显著(P>0.05),但稀释至108个/mL时综合指数高于稀释至5×108个/mL和2×108个/mL;平衡时间对解冻后综合指数影响差异显著(P<0.05),平衡4h效果优于1h和2h;解冻液种类对解冻后综合指数影响差异显著(P<0.05),维生素B12较TALP液和2.9%柠檬酸钠效果好。优选各因素最佳水平,确定夏季山羊精液冷冻-解冻方法为选用高卵黄稀释液Ⅱ,将精子密度稀释至108个/mL,平衡时间4h,以维生素B12作为解冻液40℃湿解冻。
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关键词
精液
冷冻保存
综合指数
非繁殖季节
山羊
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职称材料
不同处理对山羊精子转染外源DNA效率的影响
被引量:
2
4
作者
范景胜
赵永聚
+2 位作者
徐恢仲
王岭斌
于明举
《西南大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第4期126-130,共5页
将采集的山羊精液去除精清,分为鲜精组、冻精组、反复冻融致死组3组进行处理后,与地高辛标记的线性化PCS2EGFP质粒共育转染,用免疫组化的方法检测精子转染外源DNA的效率.结果显示鲜精、冻精和反复冻融致死3种处理组的阳性转染效率分别为...
将采集的山羊精液去除精清,分为鲜精组、冻精组、反复冻融致死组3组进行处理后,与地高辛标记的线性化PCS2EGFP质粒共育转染,用免疫组化的方法检测精子转染外源DNA的效率.结果显示鲜精、冻精和反复冻融致死3种处理组的阳性转染效率分别为(36.61±7.91)%,(32.68±3.38)%,(69.36±4.79)%.反复冻融致死组转染率极显著高于鲜精组和冻精组(p<0.01),鲜精组和冻精组转染效率差异不显著(p>0.05).
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关键词
山羊精子
外源DNA
转染
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职称材料
西南地区山羊遗传资源多样性及起源分化的研究进展
被引量:
1
5
作者
赵永聚
于明举
+1 位作者
王岭斌
张家骅
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2009年第6期24-25,共2页
山羊生产是我国西南地区草食畜牧业的重要组成部分。由于西南地区多样化的地理、生态、气候条件,众多民族及不同的生活习惯,加之长期以来经过广大劳动者的驯养和精心选育,形成了丰富的山羊遗传资源。文章论述了西南地区山羊遗传资源...
山羊生产是我国西南地区草食畜牧业的重要组成部分。由于西南地区多样化的地理、生态、气候条件,众多民族及不同的生活习惯,加之长期以来经过广大劳动者的驯养和精心选育,形成了丰富的山羊遗传资源。文章论述了西南地区山羊遗传资源多样性及起源分化的研究进展。
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关键词
西南地区
山羊
遗传多样性
起源分化
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职称材料
通过睾丸内注射转染外源DNA在小鼠精子的表达
被引量:
7
6
作者
谢畅
于明举
+3 位作者
惠楠
王岭斌
李文杰
赵永聚
《动物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第2期151-157,共7页
为研究睾丸内注射外源DNA法生产转基因小鼠(Mus musculus)的可行性,并探讨注射DNA的最佳浓度。将环形的质粒DNA pEGFP-N1与脂质体混合制备DNA-脂质体复合物,按DNA浓度不同分为0.08μg/μl、0.12μg/μl和0.24μg/μl3组,分别注射入成年...
为研究睾丸内注射外源DNA法生产转基因小鼠(Mus musculus)的可行性,并探讨注射DNA的最佳浓度。将环形的质粒DNA pEGFP-N1与脂质体混合制备DNA-脂质体复合物,按DNA浓度不同分为0.08μg/μl、0.12μg/μl和0.24μg/μl3组,分别注射入成年SPF级昆明小鼠睾丸内,同时设空白对照;每组处理公鼠2只,注射5d后每只与3只成年母鼠同笼,20d后在荧光显微镜下检测公鼠附睾精子,并制作睾丸石蜡切片,检测绿色荧光蛋白(GFP)的表达;PCR法检测各组后代阳性率。结果显示,3组小鼠附睾荧光精子比例分别为9.09%、47.06%和27.78%。3组小鼠的睾丸石蜡切片中均可看到不同强度的GFP表达。后代经PCR检测阳性率分别为17.26%、47.61%和22.11%。本实验证实了睾丸注射法能使外源DNA整合进入精子基因组,并能在自身和后代中得到表达,本研究中外源DNA注射浓度以0.12μg/μl效果为最佳。
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关键词
PEGFP
睾丸注射
精子介导基因转移
转基因小鼠
原文传递
题名
奶牛性控冷冻精液品质和转染外源DNA的特点
被引量:
1
1
作者
王岭斌
于明举
范景胜
赵永聚
机构
西南大学动物科技学院
出处
《中国畜牧杂志》
CAS
北大核心
2010年第1期20-22,52,共4页
基金
国家科技重大专项(2008ZX08008-004)
国家自然科学基金资助项目(30600430)
文摘
本研究分析了奶牛性控冻精与普通冻精解冻后精液品质和转染外源DNA的特点。奶牛性控冻精与普通冻精解冻后,分别检测精液品质和精子超微结构,并与地高辛标记的线性化pEGFP-N1质粒共育转染,用免疫组化的方法检测精子转染外源DNA的效率。结果表明:性控冻精与普通冻精相比,有效精子数少(P<0.01),精子活力、顶体完整率差(P<0.05);2组精子超微结构都出现一定程度的顶体破裂、脱落等形态变化;2组精子都具有自动结合和转运外源DNA的能力,性控冻精转染率极显著高于普通冻精(P<0.01),分别为(11.34%±2.41%)和(7.30%±2.14%)。
关键词
性控精液
冷冻保存
外源DNA
奶牛
分类号
S823.3 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
夏季山羊精液不同保存方法研究
被引量:
4
2
作者
罗艳梅
于明举
赵永聚
王岭斌
赵从
谢畅
穆飙
张家骅
机构
西南大学动物科技学院
出处
《西南大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第4期17-21,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30600430)
国家科技重大专项资助项目(2008X08008-004)
文摘
假阴道法采集重庆市大足黑山羊精液,分析鲜精精液品质,采取随机单位组两因素三水平无重复观察值方差分析试验设计,应用常温保存(20℃)、低温冷藏(4℃)和精液冷冻3种方式进行精液保存效果及对精液品质影响的研究.两因素分别为稀释液和精子密度,每个因素选择3个水平,以生存指数作为评价精液保存效果的指标.新鲜精液采集后检测发现品质良好,活力均值为0.87,畸形率为9.45%,符合GB20557-2006做山羊冻精标准.与去年同期比较,发现高温可造成精液品质下降.稀释液对3种保存效果影响差异均不显著(p>0.05),精子密度对常温保存和低温冷藏影响差异极显著(p<0.01),对冷冻影响差异不显著(p>0.05).不同处理均造成精液品质下降,其中冷冻造成影响极显著.常温和冷藏下以稀释液A1、精子密度1×109个/mL保存较好,冷冻保存以稀释液A2、精子密度2×108个/mL较好.
关键词
精液保存
品质分析
生存指数
夏季
山羊
Keywords
semen preservation
quality analysis
survival index
summer
goat
分类号
S827 [农业科学—畜牧学]
下载PDF
职称材料
题名
山羊夏季精液品质分析及冷冻方法优化
被引量:
3
3
作者
于明举
王岭斌
罗艳梅
陈亮
杨兆明
赵永聚
机构
西南大学动物科技学院
出处
《中国畜牧杂志》
CAS
北大核心
2009年第17期19-22,共4页
基金
国家科技重大专项(2008ZX08008-004)
国家自然科学基金(30600430)
西南大学博士启动基金资助
文摘
用假阴道法采集山羊精液,进行品质分析,应用正交设计L(934),4因素为稀释液种类(A)、稀释比例(B)、平衡时间(C)和解冻液(D),每因素选择3个水平,分析解冻精液品质,构建其综合指数,优化夏季山羊精液冷冻-解冻方法。结果表明:乏情季节精液品质略有下降,但仍能满足制作冻精的需要。4因素影响解冻后精液综合指数的显著性顺序是A>C>D>B,其中稀释液种类对解冻后精液综合指数影响差异显著(P<0.05),稀释液Ⅱ优于稀释液Ⅲ和Ⅰ;精子稀释密度影响差异不显著(P>0.05),但稀释至108个/mL时综合指数高于稀释至5×108个/mL和2×108个/mL;平衡时间对解冻后综合指数影响差异显著(P<0.05),平衡4h效果优于1h和2h;解冻液种类对解冻后综合指数影响差异显著(P<0.05),维生素B12较TALP液和2.9%柠檬酸钠效果好。优选各因素最佳水平,确定夏季山羊精液冷冻-解冻方法为选用高卵黄稀释液Ⅱ,将精子密度稀释至108个/mL,平衡时间4h,以维生素B12作为解冻液40℃湿解冻。
关键词
精液
冷冻保存
综合指数
非繁殖季节
山羊
分类号
S827.3 [农业科学—畜牧学]
下载PDF
职称材料
题名
不同处理对山羊精子转染外源DNA效率的影响
被引量:
2
4
作者
范景胜
赵永聚
徐恢仲
王岭斌
于明举
机构
西南大学动物科技学院
西南大学重庆市牧草与草食家畜重点实验室
出处
《西南大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第4期126-130,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30600430)
文摘
将采集的山羊精液去除精清,分为鲜精组、冻精组、反复冻融致死组3组进行处理后,与地高辛标记的线性化PCS2EGFP质粒共育转染,用免疫组化的方法检测精子转染外源DNA的效率.结果显示鲜精、冻精和反复冻融致死3种处理组的阳性转染效率分别为(36.61±7.91)%,(32.68±3.38)%,(69.36±4.79)%.反复冻融致死组转染率极显著高于鲜精组和冻精组(p<0.01),鲜精组和冻精组转染效率差异不显著(p>0.05).
关键词
山羊精子
外源DNA
转染
Keywords
goat sperm
foreign DNA
transfection
分类号
S827 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
西南地区山羊遗传资源多样性及起源分化的研究进展
被引量:
1
5
作者
赵永聚
于明举
王岭斌
张家骅
机构
西南大学动物科技学院重庆市牧草与草食家畜重点实验室
出处
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2009年第6期24-25,共2页
基金
国家自然科学基金项目(30600430)
“十五”国家科技攻关项目(2001BA604)
西南大学博士启动项目
文摘
山羊生产是我国西南地区草食畜牧业的重要组成部分。由于西南地区多样化的地理、生态、气候条件,众多民族及不同的生活习惯,加之长期以来经过广大劳动者的驯养和精心选育,形成了丰富的山羊遗传资源。文章论述了西南地区山羊遗传资源多样性及起源分化的研究进展。
关键词
西南地区
山羊
遗传多样性
起源分化
分类号
S826 [农业科学—畜牧学]
下载PDF
职称材料
题名
通过睾丸内注射转染外源DNA在小鼠精子的表达
被引量:
7
6
作者
谢畅
于明举
惠楠
王岭斌
李文杰
赵永聚
机构
西南大学动物科技学院重庆市牧草与草食家畜重点实验室
出处
《动物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第2期151-157,共7页
基金
国家科技重大专项项目(No.2008ZX08008-004)
国家自然科学基金项目(No.30600430)
文摘
为研究睾丸内注射外源DNA法生产转基因小鼠(Mus musculus)的可行性,并探讨注射DNA的最佳浓度。将环形的质粒DNA pEGFP-N1与脂质体混合制备DNA-脂质体复合物,按DNA浓度不同分为0.08μg/μl、0.12μg/μl和0.24μg/μl3组,分别注射入成年SPF级昆明小鼠睾丸内,同时设空白对照;每组处理公鼠2只,注射5d后每只与3只成年母鼠同笼,20d后在荧光显微镜下检测公鼠附睾精子,并制作睾丸石蜡切片,检测绿色荧光蛋白(GFP)的表达;PCR法检测各组后代阳性率。结果显示,3组小鼠附睾荧光精子比例分别为9.09%、47.06%和27.78%。3组小鼠的睾丸石蜡切片中均可看到不同强度的GFP表达。后代经PCR检测阳性率分别为17.26%、47.61%和22.11%。本实验证实了睾丸注射法能使外源DNA整合进入精子基因组,并能在自身和后代中得到表达,本研究中外源DNA注射浓度以0.12μg/μl效果为最佳。
关键词
PEGFP
睾丸注射
精子介导基因转移
转基因小鼠
Keywords
pEGFP
Testis injection
SMGT
Transgenic mice
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
奶牛性控冷冻精液品质和转染外源DNA的特点
王岭斌
于明举
范景胜
赵永聚
《中国畜牧杂志》
CAS
北大核心
2010
1
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职称材料
2
夏季山羊精液不同保存方法研究
罗艳梅
于明举
赵永聚
王岭斌
赵从
谢畅
穆飙
张家骅
《西南大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2010
4
下载PDF
职称材料
3
山羊夏季精液品质分析及冷冻方法优化
于明举
王岭斌
罗艳梅
陈亮
杨兆明
赵永聚
《中国畜牧杂志》
CAS
北大核心
2009
3
下载PDF
职称材料
4
不同处理对山羊精子转染外源DNA效率的影响
范景胜
赵永聚
徐恢仲
王岭斌
于明举
《西南大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2009
2
下载PDF
职称材料
5
西南地区山羊遗传资源多样性及起源分化的研究进展
赵永聚
于明举
王岭斌
张家骅
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2009
1
下载PDF
职称材料
6
通过睾丸内注射转染外源DNA在小鼠精子的表达
谢畅
于明举
惠楠
王岭斌
李文杰
赵永聚
《动物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010
7
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